何攀文
- 作品数：14 被引量：60H指数：5
- 供职机构：武汉市中心医院更多>>
- 发文基金：湖北省杰出青年人才基金武汉大学科技创新基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 运用SELEX技术筛选特异性高亲和IVB型纤毛结构蛋白RNA适配子被引量：5
- 2004年
- 目的 获得特异性高亲和IVB型纤毛结构蛋白prepilS的RNA适配子 (aptamers) ,为开发预防、治疗伤寒杆菌肠热症的新型药物试剂奠定基础。方法 采用SELEX技术 (SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEn richment)筛选IVB型纤毛结构蛋白prepilS的特异性适配子 ,通过体外构建一个长度为 88nt含有 30个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库 ,PCR扩增为双链DNA随机文库后 ,体外转录构建RNA随机文库 ,以Sepharose 4B为筛选介质 ,筛选具有特异性高亲和力prepilS蛋白的RNA适配子。结果 经 8轮筛选获得具有特异性高亲和prepilS蛋白的RNA适配子库。结论 成功地筛选出具有特异性高亲和力的RNA适配子库 ,该RNA适配子库可显著抑制伤寒杆菌侵入THP
- 潘勤章晓联汪付兵何攀文吴红艳屈雪菊戚中田
- 关键词：伤寒杆菌人体细胞
- 血清降钙素原与和肽素联合检测在脓毒血症患者病情监测和预后评估中的临床价值被引量：7
- 2015年
- 近些年降钙素原（PCT）在社区获得性肺炎和脓毒症的诊断、预后及指导抗生素治疗中的作用已经得到了大多数研究的肯定。和肽素在急危重症早期诊断和预后评估等方面也具有重要的意义。本研究旨在探讨血清PCT与和肽素联合检测在脓毒血症患者病情监测和预后评估中的临床价值。
- 李霞何攀文卢忠心黄浩宋敏吴建红
- 关键词：血清降钙素原预后评估病情监测脓毒血症社区获得性肺炎
- SAA、CRP、ESR联合检测在AECOPD病情监测中的价值分析被引量：11
- 2017年
- 目的:探讨联合检测血清淀粉样蛋白A(SAA)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)病情监测中的临床价值。方法:87例COPD患者分为COPD急性加重期组(n=45例)和COPD稳定期组(n=42例),同期选择40例门诊健康体检者作为对照组。根据是否出现呼吸衰竭、是否合并肺心病将AECOPD患者分为呼吸衰竭组、无呼吸衰竭组和合并肺心病组、未合并肺心病组,比较各组血清SAA、CRP表达水平及ESR变化,并分析血清SAA、CRP及ESR的相关性。结果:COPD急性加重期组患者血清SAA、CRP表达水平及ESR均明显高于COPD稳定期组和对照组(P<0.05);呼吸衰竭组患者血清SAA、CRP表达水平及ESR均明显高于无呼吸衰竭组(P<0.05);合并肺心病组患者血清SAA、CRP表达水平及ESR均明显高于未合并肺心病组(P<0.05),血清SAA表达水平与CRP及ESR均呈正相关性关系(r1=0.576,r2=0.607,P<0.05),血清CRP表达水平与ESR也呈正相关性关系(r3=0.482,P<0.05)。结论:联合检测SAA、CRP、ESR在AECOPD患者病情监测中具有较高的临床应用价值。
- 何攀文李霞叶胜兰黄汉平卢忠心吴建红
- 关键词：淀粉样蛋白A血沉
- 血管生成素-2基因沉默载体构建及其对肝癌细胞的作用被引量：1
- 2017年
- 目的:构建血管生成素(ang)-2基因沉默载体,并研究其对肝癌hepG2细胞株的作用。方法:根据ang-2基因序列设计shRNA,并与载体pLVX-shRNA连接,转化感受态细胞,提取质粒测序鉴定。将慢病毒shRNA载体及其辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,在HEK293T细胞中标定其病毒滴度。用包装好的慢病毒以及慢病毒阴性对照感染靶细胞hepG2,感染成功后通过Western Blot方法评价干扰载体对靶基因的干扰效果,并采用MTT法检测其对靶细胞增殖率的影响。结果:酶切鉴定和测序结果证实成功构建了ang-2基因沉默载体。包装并浓缩慢病毒,滴度为1×10~8 TU/ml。将ang-2基因沉默载体感染hepG2细胞,倒置显微镜下可见绿色荧光。Western Blotting检测ang-2蛋白表达水平较对照组明显降低(P<0.05),而对hepG2细胞增殖率无明显影响。结论:成功构建了ang-2基因沉默载体并感染靶细胞hepG2,证实其对目的基因具有很好的沉默效果。
- 李霞何攀文韩晓群吴建红朱清静
- 关键词：RNA干扰质粒构建慢病毒肝癌
- 联合检测SAA、CRP、ESR在COPD急性加重期病情监测中的临床价值
- 何攀文
- 发酵支原体M161Ag的研究进展
- 2002年
- 发酵支原体是一类没有细胞壁的原核细胞型微生物。作为艾滋病的协同刺激因子,其作用机制至今未明。近年来研究发现发酵支原体的膜表面有一种膜脂蛋白抗原物质,称M161Ag。它可激活单核/巨噬细胞系统的细胞,从而释放多种促炎性细胞因子,如白细胞介素1β,肿瘤坏死因子α,白细胞介素6、10、12,一氧化氮;还可通过旁路途径激活补体系统,致宿主细胞产生炎症反应和天然免疫。另外,M161Ag还促使未成熟的树突细胞成熟。通过树突细胞的抗原呈递作用,介导宿主细胞的特异性免疫应答。本文重点介绍M161Ag的功能及其与配体相互作用的信号传递途径。
- 何攀文
- 关键词：发酵支原体信号传递途径补体
- 伤寒杆菌IVB型菌毛致病性的研究
- 近年来,在微生物分子病原学领域中越来越重视对病原性细菌毒力岛控制的Ⅳ型菌毛(pilus)的研究.Ⅳ型菌毛是细菌重要的毒力因素,与细菌的侵袭力密切相关.伤寒杆菌的Ⅳ型菌毛为IVB型菌毛,章晓联教授等已经发现并克隆了11个位...
- 何攀文
- 关键词：鼠伤寒杆菌菌毛小鼠腹腔巨噬细胞种属特异性缺失突变株细胞水平
- 文献传递
- 特异性抵抗伤寒杆菌对人体细胞致病性的拮抗剂(Aptamer)
- 伤寒杆菌(Salmonella typhi)是沙门氏菌属中唯一严格对人致病的病原体,引起伤寒肠热症。至今全世界仍没有令人满意的完善的唯一对伤寒杆菌特异性进行治疗的试剂。伤寒杆菌特有的病原毒力岛(Pathogenicity...
- 章晓联潘勤何攀文
- 关键词：伤寒杆菌SELEX技术
- 文献传递
- 妊娠高血压综合征产妇D-二聚体凝血指标血小板参数的变化及临床检测意义被引量：23
- 2016年
- 目的观察妊娠高血压综合征（PIHS）产妇D-二聚体（D-D）、凝血指标、血小板参数的变化，并探讨其临床检测意义。方法75例PIHS产妇分为轻度子痫前期组（n=29例）、重度子痫前期组（n=26例）和子痫组（n=20例），同期随机选择住院待产的正常妊娠晚期40例孕产妇作为妊娠晚期组，另选取45例健康育龄妇女作为对照组。检测和比较各组观察对象D．D、凝血指标、血小板参数的变化。结果PIHS组D．D、纤维蛋白原（FIB）水平明显高于妊娠晚期组和对照组（P〈0．05），妊娠晚期组D-D、FIB水平明显高于对照组（P〈0．05）。PIHS组凝血酶原时间（PT）明显低于妊娠晚期组和对照组（P〈0．05），妊娠晚期组PT明显低于对照组（P〈0．05）。PIHS组和对照组活化部分凝血活酶时问（APTT）比较差异无统计学意义（P〉0．05），但均明显高于妊娠晚期组（P〈0．05）。各组凝血酶凝结时间（TT）比较差异无统计学意义（P〉0．05）。PIHS组和妊娠晚期组血小板计数（PLT）、血小板压积（PCT）比较差异无统计学意义（P〉0．05），但均明显低于对照组（P〈0．05）。妊娠晚期组和对照组平均血小板体积（MPV）、血小板体积分布宽度（PDW）比较差异无统计学意义（P〉0．05），但均明显低于PIHS组（P〈0．05）。子痫组D-D表达水平明显高于重度子痫前期组和轻度子痈前期组（P〈0．05），而重度子痫前期组D-D表达水平明显高于轻度子痫前期组（P〈0．05）。结论D-D、凝血指标及血小板参数检测对PIHS的早期诊治具有重要的临床价值。
- 何攀文李霞李莉卢忠心
- 关键词：妊娠高血压综合征D-二聚体凝血指标血小板参数
- 新发现的伤寒杆菌ⅣB型菌毛致病性研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究伤寒杆菌菌株ⅣB型菌毛的致病特性。方法 :本研究将表达ⅣB型菌毛的的伤寒杆菌J341及另一插有强启动子Tac并表达ⅣB型菌毛的重组伤寒杆菌菌株TyphiA2 1 6和不表达ⅣB型菌毛的伤寒杆菌菌株TyphipilS∶∶kmr 分别攻击人的THP 1细胞和小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ) ,利用细胞毒检测试剂盒检测细胞受到伤寒杆菌攻击后 ,伤寒杆菌对细胞的毒性作用 ;同时进一步采用实时荧光定量PCR法检测伤寒杆菌毒力岛上的ⅣB菌毛对人单核细胞的侵袭作用 ,分析表达ⅣB菌毛的伤寒杆菌菌株J341及TyphiA2 1 6和不表达ⅣB型菌毛的伤寒杆菌菌株TyphipilS∶∶kmr 分别对THP 1细胞的侵袭作用 ,通过对细胞内侵入的伤寒杆菌的ⅣB菌毛基因 (pilS)和伤寒杆菌O抗原的聚合酶基因 (rfc)DNA的含量的检测 ,来比较进入胞内细菌含量的差别。结果 :比较发现J341及TyphiA2 1 6比TyphipilS∶∶kmr 对人的细胞有更强的毒性以及侵袭性 ,而对鼠的细胞毒性和侵袭性没有明显差异。结论 :说明伤寒杆菌ⅣB型菌毛与细菌侵入人体细胞的毒性和侵袭性密切相关 ;并且伤寒杆菌ⅣB型菌毛的侵袭性和细胞毒性具有种属特异性 ,即对人的单核细胞等细胞有致病性 ,而对鼠的巨噬细胞无致病性。
- 何攀文章晓联汪付兵潘勤刘先洲
- 关键词：伤寒杆菌荧光定量PCR
