曹广英
- 作品数：10 被引量：38H指数：3
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：国家花生产业技术体系建设项目山东省农业科学院青年科研基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用SSR标记鉴定花生杂交F1代真假杂种被引量：8
- 2016年
- 以抗青枯病花生品种日花1号、山东省花生研究所选育的高油酸花生品种花育662和高产大花生品种花育9610为亲本正、反交获得的F_1代种子为材料,利用微卫星(SSR)标记技术鉴定真杂种;从候选的50对SSR引物中筛选得到在亲本中有稳定、清晰多态性位点的引物5对,对杂种F_1代进行鉴定。结果表明,四个杂交组合共鉴定出30粒真杂种,并得到形态学鉴定结果的确认。
- 曹广英吴琪王云云张青云王秀贞唐月异孙全喜王传堂关淑艳
- 关键词：花生SSR杂种鉴定
- 花生CAX相互作用蛋白4(CXIP4)基因克隆表达分析及载体构建
- 2017年
- 钙离子是细胞信号传导中重要的第二信使。CAX interacting protein(CXIP)是一类能够激活Cation exchanger(CAX)的钙离子转运活性蛋白,在离子转运体系中起重要作用。本研究利用RACE方法获得花生CAX相互作用蛋白4(CXIP4)基因的cDNA和DNA全长序列。该基因cDNA序列的全长包括966bp的开放阅读框,编码321个氨基酸。DNA全长为966bp,不含有内含子序列。推测的蛋白质分子量为36706.24Da,等电点为9.62。使用荧光定量技术(qRT-PCR)分析了该基因在花生品种日花1号植株中的组织表达和青枯菌胁迫条件下的表达变化规律,并构建了该基因的过表达载体、反义表达载体以及原核表达载体,为进一步研究花生中该基因的功能及其在花生抗青枯病中的作用奠定基础。
- 吴琪曹广英唐月异王秀贞孙全喜王志伟陈剑洪姜启双王传堂
- 关键词：花生青枯菌
- 黄曲霉漆酶基因HIGS载体的构建及对花生的转化被引量：1
- 2015年
- 黄曲霉毒素污染严重影响着花生食品安全。通过常规育种的方式培育抗黄曲霉花生新品种进展缓慢,效果也难如人意。HIGS(Host-Induced Gene Silencing,寄主诱导的转基因沉默)技术是一种新兴的RNA干扰技术,为培育抗病植物提供了可能。但该技术在花生上的应用尚未见报道。为创造抗黄曲霉花生新品系,本研究利用该技术构建了两个黄曲霉漆酶基因(Lac1和Lac2)的HIGS载体,并试图将其转化到易感黄曲霉的花生品种粤油20中,获得了转Lac1基因的PCR阳性种子。根据HIGS的原理,黄曲霉侵染后,转基因花生中产生的dsRNA将抑制黄曲霉漆酶基因表达,从而使转基因花生对黄曲霉产生抗性。基于该原理,下一步将对转基因种子是否抗黄曲霉侵染进行鉴定。本研究为利用HIGS技术探索黄曲霉漆酶基因与黄曲霉致病性的关系奠定了基础,为培育抗黄曲霉花生品种提供了一条新思路。
- 孙全喜王云云王秀贞唐月异吴琪张青云曹广英王传堂
- 关键词：花生黄曲霉漆酶基因
- 花生核糖体蛋白L29-1(RPL29-1)基因克隆表达分析及载体构建被引量：5
- 2016年
- 核糖体蛋白是核糖体的主要组成成分,在细胞内蛋白质生物合成过程中具有重要作用。RPL29-1是核糖体大亚基60S的一个组件。本研究以花生品种日花1号为材料,利用RACE方法成功得到RPL29-1基因的c DNA序列,并获得DNA序列。RPL29-1基因c DNA序列包括186 bp的开放阅读框,编码61个氨基酸。RPL29-1基因DNA序列含有两个外显子和一个内含子。一级结构分析表明,RPL29-1蛋白质分子量为7 127.02 Da,等电点为10.29。本研究采用荧光定量技术(q RT-PCR)分析了RPL29-1基因在花生品种日花1号植株中的组织表达和青枯菌胁迫条件下的表达变化规律,并构建了RPL29-1的过表达载体和反义表达载体,为进一步通过功能分析研究花生RPL29-1基因在抗青枯病中的作用奠定基础。
- 曹广英吴琪唐月异王秀贞孙全喜关淑艳王传堂
- 关键词：花生核糖体蛋白植物表达载体构建
- 花生AhNCED1基因的克隆、序列分析与载体构建被引量：1
- 2017年
- 脱落酸(ABA)在植物生长发育中起着重要的作用,9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶基因(NCED)是其合成途径中的关键基因。采用逆转录PCR(RT-PCR)技术在花生种子中克隆到其同源基因AhNCED1,预测该基因开放阅读框为1 806 bp,编码601个氨基酸,蛋白质的分子质量为66.8 ku,等电点为8.49。通过生物信息学分析表明,该基因含有2种跨膜区,但均不明显;由17个丝氨酸、8个苏氨酸、5个酪氨酸参与磷酸化过程;同源比较发现,该基因与来自拟南芥、柱花草等的NCED具有较高的同源性,进化分析表明该基因与柱花草NCED的亲缘关系最近。笔者成功构建了该基因的亚细胞定位载体AhNCED1-GFP和超表达载体p Cambia2300EC-AhNCED1,为进一步研究花生中AhNCED1基因的功能奠定了基础。
- 王云云孙全喜王秀贞唐月异吴琪张青云曹广英祁雪张君王传堂
- 关键词：花生生物信息学
- 花生青枯菌响应基因克隆及表达分析
- 中国是世界上最大的花生种植、出口大国,花生是我国重要的经济作物。由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的花生青枯病(Bacterial wilt,BW)是我国花生的主要细菌性病害,严重限制了我...
- 曹广英
- 关键词：花生青枯菌荧光定量PCR植物表达载体构建
- 文献传递
- 26个花生品种果柄强度研究被引量：17
- 2016年
- 果柄强度是影响花生机械化生产的重要农艺性状。本研究对分段式收获的26个花生品种的果柄强度进行了测定。结果表明,26个花生品种经起拔、大田晾晒3日后的果柄强度普遍偏低;大花生、小花生品种的果柄强度没有显著差异;其中13个品种的果柄强度随荚果成熟度变化而有显著变化,而另外13个品种并没有显著变化。本研究为培育适合机械化收获的花生新品种奠定理论基础。
- 吴琪曹广英王云云祁雪王秀贞唐月异孙全喜张青云王传堂
- 关键词：花生成熟度机械化收获
- 花生ABI3基因的克隆、序列分析及表达载体构建被引量：2
- 2016年
- 脱落酸(ABA)作为植物体内的一种重要激素,参与植物多个生长发育过程。ABI3是ABA信号转导途径中的关键基因。本研究采用RT-PCR技术从花生成熟种子中克隆到ABI3的同源基因AhABI3。预测该基因开放阅读框为2313 bp,编码770个氨基酸。同源比较发现Ah ABI3与拟南芥、鹰嘴豆等的ABI3具有较高的相似性;进化分析表明AhABI3与鹰嘴豆ABI3亲缘关系最近。本研究还成功构建了AhABI3的过量表达载体pCambia2300EC-Ah ABI3,为进一步研究其功能奠定了基础。
- 王云云孙全喜王秀贞唐月异吴琪张青云曹广英祁雪张君王传堂
- 关键词：花生植物表达载体构建
- 花生NADH脱氢酶1亚基10B-like基因克隆表达分析及载体构建
- 2018年
- NADH脱氢酶是线粒体氧化呼吸链上重要的复合物,对线粒体功能有至关重要的作用。本研究以花生品种"日花1号"为材料,利用RACE方法成功得到NADH脱氢酶1亚基10B-like基因(ND1-10B-like)的c DNA和DNA全长。基因开放阅读框为321 bp,编码106个氨基酸组成的肽链,预测的蛋白质分子量为12 570.29 Da,等电点为6.97。DNA序列包含一个内含子和两个外显子,共1 269 bp。检测了基因组织表达和胁迫表达情况,结果显示该基因在叶片中表达量最高,在青枯菌胁迫条件下0.5 h表达量即可升高到初始值的5.7倍,对生物胁迫反应非常迅速。并进一步构建了基因过表达载体p CAMBIA2300-OE-ND1和反义表达载体p CAMBIA2300-IN-ND1,并为进一步研究花生中该基因的功能及其在花生抗青枯病中的作用提供帮助。
- 吴琪曹广英唐月异王秀贞孙全喜王志伟吴昌湛陈剑洪王传堂
- 关键词：花生
- 花生AhCDPK32基因克隆及表达载体的构建被引量：3
- 2016年
- 利用RT-PCR方法,从花生品种"汕油21"成熟种子中克隆了钙依赖蛋白激酶(camcium-dependent protein kinase,CDPK)基因Ah CDPK32,该序列包含1 617 bp开放阅读框,共编码538个氨基酸。核苷酸序列在NCBI中进行Blast比较,结果显示与大豆Gm CDPK32(Gen Bank登录号为XM_003554131)基因同源性为87%。生物信息学分析结果,预测蛋白质分子量为60.807 k D,蛋白质等电点(PI)为6.96,蛋白质信号肽分析和疏水性分析,表明信号肽剪切可能性小,蛋白质具亲水性。我们构建了该基因超表达载体p CambiaAh CDPK32,为进一步研究该基因的功能提供了理论基础。这是第一次在花生中克隆到CDPK基因的报道。
- 张青云孙全喜唐月异王秀贞吴琪王云云曹广英祁雪王传堂
- 关键词：花生钙依赖蛋白激酶进化树
