刘宇
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 供职机构：山东农业大学生命科学学院作物生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 植物非细胞自主性小RNA分子研究进展
- 2015年
- 非细胞自主性是RNA干扰的主要特点之一,表现为沉默效应可以在细胞、组织和生物个体间传递和扩散,可移动的小RNA分子在这种非细胞自主性的沉默扩散中发挥了核心作用。近年来的研究表明小RNA分子可以与转录因子、多肽和植物激素一样传递胞间信息,并以其特有的方式调控发育模式、响应环境胁迫、增强病毒抗性和维持转座子的沉默。综述了近年来在植物非细胞自主性RNAi研究中取得的主要进展,主要介绍了通过韧皮部和胞间连丝途径传递沉默信号的各种小RNA分子及其生物学作用、非细胞自主性小RNA的分子特征和运输效率的调控,并对存在的问题及其研究前景进行了展望。
- 邓帅张婷婷王茹茹刘宇张元湖
- 关键词：RNA干扰沉默效应小RNA分子特征
- 苹果MdAFS基因亚细胞定位表达载体的构建及分析
- 2017年
- 为研究萜烯合酶亚细胞定位的改变对植物萜类及其生长发育特性的影响,以青香蕉苹果(Malus domestica Borkh cv.White Winter Pearmain)果皮、菊花、酵母和拟南芥为材料,采用PCR技术分别克隆了α-法尼烯合酶基因(AFS)、Rubisco强启动子(Ru)、线粒体定位转运肽(Mit)与叶绿体定位转运肽(Pla),并利用plant CARE软件和Signal P4.1Server网站对所得启动子和转运肽序列进行了预测分析。结果表明Ru序列具备强启动子特有的TATAbox、CAATbox以及多种相关的激素响应元件,且所得线粒体和叶绿体定位转运肽也均预测到转运肽的功能。利用所得的以上序列分别构建了由Ru强启动子驱动的线粒体和叶绿体定位的AFS基因表达载体,并成功转化获得了转基因烟草植株,实时荧光定量PCR表明目的基因在转基因植物中有较高的表达,并且存在空间表达特异性。
- 丁瑞瑞王露王茹茹刘宇张元湖成妮妮
- 关键词：苹果亚细胞
- 苹果MdAFS叶绿体定位表达对拟南芥萜类挥发物的影响被引量：1
- 2018年
- 以‘青香蕉’苹果(Malus×domestica‘White Winter Pearmain’)α–法尼烯合酶基因(MdAFS)为目标基因,构建叶绿体定位的植物过表达载体,并通过农杆菌介导遗传转化拟南芥,获得使MdAFS在叶绿体中过表达的拟南芥转基因株系。将pBI122-rbcS1-pla-MdAFS-GFP表达载体瞬时表达本氏烟,分析表明叶绿体定位肽能成功将MdAFS蛋白定位到叶绿体中。定量测定莲座期和盛花期拟南芥光合色素,结果显示,转基因拟南芥叶绿素和类胡萝卜素含量较野生型显著增加。qRT-PCR分析萜类代谢相关基因转录表达水平表明,尤其在盛花期,过表达MdAFS能显著影响萜类代谢基因表达上调。应用静态顶空固相微萃取法收集拟南芥挥发物并结合GC–MS分析鉴定萜类挥发物成分,转基因拟南芥中萜类挥发物含量和种类明显增加。这些结果表明,过表达MdAFS能显著影响萜类代谢流的重新定向,增加萜类代谢挥发物。叶绿体是萜类代谢工程一个理想的亚细胞空间。
- 王茹茹张婷婷刘宇吕东梅张元湖
- 关键词：苹果拟南芥AFS
- 过表达苹果α-法尼烯合酶基因(α-AFS)加快烟草发育进程的转录组分析
- 法尼烯(Farnesene)是一种挥发性倍半萜类次生代谢物，是多种植物精油的成分之一，它与昆虫的诱导和苹果虎皮病的发生有关。α-法尼烯合酶是合成法尼烯的最终酶。在烟草(NC89)中过表达苹果α-法尼烯合酶基因后得到的转基...
- 刘宇张元湖
- 关键词：烟草Α-法尼烯
- 苹果和梨AFS基因启动子的克隆、序列比对及功能分析被引量：5
- 2015年
- 苹果(Malus×domestica L.)和梨(Pyrus communis L.)果实在低温储存过程中虎皮病的发生与果皮中受乙烯诱导的α–法尼烯合酶基因(AFS)的表达及α–法尼烯的积累密切相关。采用TAIL-PCR技术分别从‘富士’苹果和‘丰产’梨中克隆到了约2 kb的α–法尼烯合酶基因(AFS)启动子序列,并提交至Gen Bank中(登录号分别为KM676083和KM676082)。序列比对发现两启动子同源性仅为48.31%,远低于其下游编码区97%的相似度。顺式作用元件在线预测分析发现二者同时存在乙烯、脱落酸、茉莉酸、水杨酸等激素响应元件,低温、厌氧、病原菌等胁迫响应元件,以及3个节律性表达元件和2个诱导子响应元件。对‘丰产’梨中AFS基因表达模式的分析也证实了部分预测的诱导因素对其表达有调控作用。将‘丰产’梨AFS基因启动子序列进行系列删除,与GUS报告基因构建融合表达载体转化烟草,利用GUS染色方法分析了不同长度启动子的转录活性差异,发现缩短至153 bp的启动子片段仍具有较强的转录活性,且长度在276 bp至573 bp的启动子片段其驱动下游基因转录的活性较其他片段更强。通过后续对各作用元件尤其是乙烯响应元件的研究将有助于进一步从分子水平认识虎皮病的发生机制。
- 邓帅成妮妮丁瑞瑞刘宇张元湖
- 关键词：苹果AFS启动子顺式作用元件虎皮病
