魏纪珍
- 作品数：23 被引量：41H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种评价棉铃虫抗性治理效果的方法
- 本发明涉及一种评价棉铃虫抗性治理效果的方法。该方法包括以下步骤：1）选择两种用于治理棉铃虫的药物；2）接种敏感或抗性棉铃虫幼虫；3）观察幼虫死亡情况，计算死亡率；4）建立二因素D-饱和方法建立回归方程，评价两种药物的治理...
- 梁革梅魏纪珍张丽丽高珍张永军
- 一种评价昆虫中肠消化酶对Bt蛋白活化作用的方法
- 本发明提供一种评价昆虫中肠消化酶对Bt蛋白活化作用的方法，其是将特异性消化酶抑制剂与昆虫中肠消化酶液按比例混合，在体外对Bt蛋白原毒素进行活化，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对活化效果进行分析，用软件ImageJ 1.46对...
- 魏纪珍梁革梅王冰洁陈琳张万娜
- 文献传递
- 棉铃虫幼虫取食Vip3Aa蛋白后的中肠组织病理变化被引量：7
- 2012年
- 为了进一步明确Vip3Aa的作用机制,利用透射电镜观察了棉铃虫4龄幼虫取食含Vip3Aa蛋白饲料后中肠杯状细胞的病理变化,并比较了其病变与取食含Cry1Ac饲料后棉铃虫组织病变的差异。取食含Vip3Aa饲料后,棉铃虫幼虫的中肠杯状细胞逐渐发生病变,主要表现为:微绒毛肿胀、脱落;细胞核核膜界限不清晰,染色质分布不均匀;线粒体变形、数量减少,内脊不清晰;内质网杂乱不规则、数量减少。与取食Cry1Ac的棉铃虫相比,取食Vip3Aa的棉铃虫中肠杯状细胞发生病变较为缓慢,在取食12h后才发现明显病变,随着取食时间的增加病变越来越明显;而取食Cry1Ac的棉铃虫2h后中肠杯状细胞就出现明显病变。本研究可为Vip3Aa作为新毒素策略的重要蛋白在棉铃虫Helicoverpa armigera综合防治中更好地发挥作用提供理论依据。
- 张彦梁革梅张丽丽魏纪珍
- 关键词：棉铃虫CRY1AC中肠组织病理变化
- Cry1Ac和Cry2Ab蛋白对大草蛉生长发育及酶活力的影响被引量：9
- 2014年
- 为明确转Cry1Ac和Cry2Ab基因棉花对大草蛉的影响,运用Bt蛋白与人工饲料混合的方法,以大于转基因棉花叶片中蛋白含量20倍的剂量饲喂大草蛉初孵幼虫,初步研究了Cry1Ac和Cry2Ab对大草蛉生物学参数和消化酶、解毒酶活性的影响。结果表明:取食含Bt蛋白饲料的大草蛉幼虫的发育历期、体重、蛹重、成虫体重、羽化率等生物学参数与对照相比均没有显著差异;在大草蛉幼虫体内可以检测到含量较高的Cry1Ac和Cry2Ab蛋白,分别为974.92~1282.39 ng/g鲜重和5592.62~6082.92 ng/g鲜重,而在大草蛉成虫体内检测到的Cry1Ac和Cry2Ab蛋白含量非常低,分别为0.29~0.39 ng/g鲜重和50.34~56.71 ng/g鲜重;取食含Bt蛋白的饲料对大草蛉幼虫的类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶、氨肽酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性有一定的影响,但对大草蛉成虫影响与对照差异不显著。表明大草蛉取食含Bt蛋白的人工饲料后,虽然体内可以检测到一定含量的Bt蛋白,但对大草蛉的生长发育并没有显著的直接不利影响。
- 王英丽魏纪珍张丽丽袁向东梁革梅
- 关键词：大草蛉
- 一种评价药剂对昆虫毒力效果的生物测定方法
- 本发明涉及生物测定，具体公开了一种评价药剂对昆虫毒力效果的生物测定方法，将饲料置于孔板中，并使其完全填充孔板底部，且形成平展表面；将待测药剂加入孔板中，覆盖饲料表面，待药剂渗入饲料内部、饲料表面药剂自然风干后，接入昆虫进...
- 梁革梅陈琳王冰洁魏纪珍刘臣赵曼
- 文献传递
- 棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达分析被引量：1
- 2015年
- 【目的】通过对棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达谱分析,进一步明确Polycalin基因在抗性中发挥的作用,为棉铃虫Helicoverpa armigera的抗性治理提供理论依据。【方法】通过RACE结合PCR技术克隆获得了棉铃虫Polycalin基因的全长序列,利用实时荧光定量PCR技术测定了在棉铃虫不同发育时期、幼虫肠道不同部位的Polycalin基因表达量,比较了棉铃虫取食含Cry1Ac蛋白的饲料后,Polycalin基因表达量的变化。【结果】该基因全长序列为2 955 bp,开放阅读框为2 781 bp,编码926个氨基酸（Gen Bank登录号为KP100652）;预测蛋白的分子量为101.68 ku,等电点为4.57。推导的氨基酸序列中,N末端含有20个氨基酸组成的信号肽,含有8个O-糖基化位点,3个N-糖基化位点,C末端存在2个GPI结合位点。Polycalin在棉铃虫所有发育阶段都可以表达,幼虫期表达量较高,尤其在1~3龄幼虫体内表达量最高,在卵、成虫和蛹中的表达量较低。棉铃虫4龄幼虫取食含活化Cry1Ac蛋白的人工饲料后,Polycalin基因的表达受到抑制。【结论】研究结果可以为进一步揭示Polycalin基因的功能及其在Bt杀虫机制中的作用奠定基础。
- 王亚楠钟丰魏纪珍谢丙堂张万娜陈利珍梁革梅
- 关键词：棉铃虫BT
- 一种评价生物蛋白对绿盲蝽影响的方法
- 本发明提供一种评价生物蛋白对绿盲蝽影响的方法，包括：1）将待测生物蛋白稀释成不同浓度，与绿盲蝽人工饲料混合，制得生物蛋白测定饲料，并以不添加生物蛋白的饲料组作为对照；2）用拉伸的封口膜分别包裹测定饲料和对照饲料，制成胶囊...
- 王英丽梁革梅魏纪珍袁向东张丽丽谢丙堂钟丰
- 文献传递
- 一种评价消化酶在棉铃虫Bt蛋白抗性中作用的方法
- 本发明提供一种评价消化酶在棉铃虫Bt蛋白抗性中作用的方法，其是利用特异性消化酶抑制剂分别处理对Bt蛋白敏感和对Bt蛋白具有抗性的棉铃虫，然后进行生物测定，通过比较所述消化酶抑制剂对抗、感品系棉铃虫的Bt蛋白毒力的抑制效果...
- 魏纪珍梁革梅陈琳王冰洁张万娜
- 取食Cry2Ab蛋白后棉铃虫幼虫中肠组织的病理变化被引量：3
- 2013年
- 为了明确Cry2Ab杀虫蛋白的作用机制,利用透射电镜观察了棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)3龄末幼虫取食含Cry2Ab蛋白(8μg/g)饲料后中肠的组织病理变化,并与分别取食含Cry1Ac蛋白(0.97μg/g)饲料和正常饲料的棉铃虫进行了比较。结果表明:棉铃虫取食Cry2Ab蛋白后中肠细胞及其细胞器均发生了明显的病变,主要表现为:中肠杯状细胞的杯腔肿胀或拉长,部分柱状细胞被杯状细胞挤压出来,微绒毛脱落,细胞核皱缩,质膜和核膜不清晰,染色质凝聚,线粒体拉伸变形,内质网肿胀断裂;并且随着取食时间的延长病变越来越明显。与取食Cry1Ac蛋白的棉铃虫相比,Cry2Ab引起棉铃虫中肠组织发生病变的速度较慢。本研究可为Cry2Ab作为转基因棉花的重要杀虫蛋白在将来更好地发挥作用提供理论依据。
- 高珍梁革梅魏纪珍张丽丽
- 关键词：棉铃虫杀虫蛋白CRY2ABCRY1AC中肠组织病理变化
- Bt抗性和敏感棉铃虫钙黏蛋白及氨肽酶N1表达量的比较被引量：3
- 2011年
- 棉铃虫体内的钙黏蛋白(CAD)和氨肽酶N1(APN1)是Bt的主要作用靶标,两种受体蛋白的变化也是棉铃虫对Bt产生抗性的主要原因。本文利用实时荧光定量PCR技术比较了Bt抗性和敏感棉铃虫CAD和APN1的表达量变化,分析受体蛋白表达量变化与抗性的关系。结果表明,与敏感品系相比,抗性品系棉铃虫CAD和APN1的表达量明显降低,1、2龄幼虫的差异达到极显著。在敏感品系中,CAD和APN1的表达量随龄期的增加呈现"V"字形变化,1、2龄幼虫的表达量最高,3、4龄时显著降低,到5龄时表达量又有所增加。抗性品系中CAD和APN1的表达量提前降低,与表达量最高的1龄幼虫相比,2、3龄时表达量显著降低,到4、5龄时又略有回升。说明棉铃虫中肠钙黏蛋白、APN1表达量的下降与抗性相关,且不同龄期棉铃虫幼虫表达量不同。
- 张涛魏纪珍张丽丽陆琼梁革梅杨朗
- 关键词：棉铃虫BT钙黏蛋白表达量
