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禽白血病病毒衣壳蛋白表达载体的构建及应用被引量：1: 2017年; 为利用分段表达载体鉴定禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白单克隆抗体识别区域,构建ALV衣壳蛋白p27全长及分段真核表达载体。将实验室保存的pGEX-6p-1-p27质粒双酶切亚克隆到pcDNA3.1真核表达载体中,构建pcDNA3.1-p27全长表达质粒。同时设计引物,扩增p27基因1~480 bp的A片段以及241~720 bp的B片段,构建pcDNA3.1-p27A和pcDNA3.1-p27B分段表达载体,并在DF-1细胞中暂态表达,利用IFA和Western blot方法鉴定病毒衣壳蛋白单克隆抗体的识别区域。结果表明:重组质粒均能正确表达,并鉴定出两株单克隆抗体5D3和4F12的抗原识别区域均位于衣壳蛋白p27蛋白碳端161~240位氨基酸区域。研究成功构建并表达了ALV衣壳蛋白p27的全长和分段真核表达载体,并利用分段表达质粒鉴定了两株单克隆抗体的抗原识别区域,为深入研究衣壳蛋白p27的生物学功能提供了生物材料。; 孙舒胡海胡海秦爱建程晓薇; 关键词：真核表达载体

抗家禽Beta-连环蛋白多克隆抗体的制备及鉴定: 2015年; 本研究旨在制备能结合家禽Beta-连环蛋白(β-catenin)的特异性多克隆抗体并进行生物学鉴定。根据GenBank中公布的β-catenin序列,经生物软件比对分析筛选一段抗原性好的序列合成多肽,将多肽与KLH偶联免疫新西兰兔。免疫血清经多肽亲和层析后制得纯化的多克隆抗体,并利用Western blot、间接免疫荧光、免疫组化方法对多克隆抗体进行生物学鉴定。研究表明制备的抗家禽β-catenin多克隆抗体可有效检测家禽细胞中天然的β-catenin蛋白。; 张丹阳钱琨胡海石亚运张杰邵红霞金文杰秦爱建; 关键词：多克隆抗体

禽白血病病毒P27基因绝对定量PCR方法的建立及应用: ：建立一种检测禽白血病病毒衣壳蛋白p27(ALV-p27)基因绝对荧光定量PCR的方法.方法：设计ALV-p27特异性荧光定量PCR引物扩增基因并制备质粒标准品,同时建立检测ALV-p27的绝对荧光定量PCR方法.利用建...; 胡海钱琨张丹阳石亚运张杰邵红霞金文杰秦爱建; 关键词：雏鸡禽白血病病毒衣壳蛋白 P27基因聚合酶链反应

禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因绝对定量PCR方法的建立及应用被引量：9: 2015年; 研究旨在建立一种检测禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白p27(ALV-p27)基因实时荧光定量PCR的方法。通过设计ALV-p27特异性的荧光定量PCR引物扩增基因并制备质粒标准品,同时建立检测病毒衣壳蛋白p27基因的实时荧光定量PCR方法,并利用该方法检测6日龄胚胎感染,1日龄出壳雏鸡不同组织中p27基因的分布和表达情况。结果表明,ALV-p27基因在1日龄雏鸡脑组织中表达水平最高,而在胸腺组织中表达水平最低。研究建立的检测ALV-p27基因绝对定量PCR方法为进一步研究其生物学功能提供了一种技术手段。; 胡海钱琨张丹阳石亚运张杰邵红霞金文杰秦爱建; 关键词：禽白血病病毒 P27基因荧光定量PCR

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胡海