刘业强
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：河北联合大学附属开滦总医院更多>>
- 发文基金：唐山市科学技术研究与发展指导计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 敲低QDPR基因慢病毒构建及其干涉NRK-52E细胞效果研究被引量：2
- 2014年
- 目的构建醌型二氢生物碟呤还原酶(quinonoid dihydropteridine reductase,QDPR)敲低慢病毒模型,检测其对肾小管上皮NRK-52E细胞QDPR基因的敲低情况。方法设计合成QDPR的干涉shRNA序列,并重组入GP2慢病毒载体质粒,测序检验重组质粒是否转入该序列。三质粒共转染获得干涉慢病毒,将其感染NRK-52E细胞,新霉素筛选抗性细胞,用实时定量PCR、western blot和QDPR酶活性测量检测干涉效果。结果重组入GP2的序列与设计序列一致,病毒转染NRK-52E细胞使其获得了新霉素抗性,QDPR基因表达、蛋白含量及酶活性显著降低。结论本研究合成的QDPR基因敲低慢病毒能使NRK-52E细胞QDPR基因的mRNA转录、蛋白浓度及活性降低,为后续QDPR基因在糖尿病肾病中的作用研究提供了模型。
- 蒲志杰张景义孙耀东杨振邦杨向君何海兰刘业强孟令宇沈宏杨方李治国
- 关键词：慢病毒糖尿病肾病肾小管上皮细胞
