吴鹏
- 作品数：48 被引量：30H指数：3
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目兵团博士基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学交通运输工程更多>>
- TIM-3抗原、纳米抗体及其筛选和鉴定方法、纳米抗体的应用
- 本发明属于来自动物或人的抵抗物质技术领域，公开了一种TIM‑3抗原、纳米抗体及其筛选和鉴定方法、纳米抗体的应用，纳米抗体为TIM‑3纳米抗体序列为SEQ ID NO：1；TIM‑3抗原为哺乳动物细胞瞬时转染表达，使用TI...
- 陈创夫吴鹏
- 文献传递
- CTLA-4纳米抗体、制备方法及其应用
- 本发明属于生物医学技术领域，特别涉及CTLA‑4纳米抗体、制备方法及其应用。使用纳米抗体可以提高或者协同增强与抗原的结合能力。纳米抗体不具备完整的抗体结构，缺少Fc端以及Y型结构，抗原与纳米抗体结合后不容易被识别，可以轻...
- 陈创夫吴鹏
- 禽白血病病毒p27基因的原核表达及生物信息学分析被引量：1
- 2019年
- 为了进一步研究禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27蛋白的结构与功能,并获得具有反应原性的重组蛋白p27,试验通过PCR技术克隆p27基因,构建克隆载体pMD19-T-p27,并应用生物信息学软件对获得的p27基因序列进行分析,构建重组表达载体pET-28a-p27,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,通过SDS-PAGE和Western-blot对获得的重组蛋白p27进行分析。结果表明:通过PCR技术克隆获得ALV p27基因,并成功构建了克隆载体pMD19-T-p27;生物信息学分析发现,p27蛋白由239个氨基酸组成,分子式为C(1140)H(1853)N(323)O(339)S6,理论等电点为6.23,无信号肽和跨膜区,含有8个丝氨酸磷酸化位点和13个苏氨酸磷酸化位点,无糖基化位点,共有9个抗原表位,二级结构和三级结构中以α-螺旋为主;成功构建了重组表达载体pET-28a-p27,并在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中高效表达;诱导6小时时蛋白质表达量最大,分子质量约为27 ku,且以可溶性为主;重组蛋白p27具有较好的反应原性和特异性。说明试验获得了具有反应原性的重组蛋白p27,为建立禽白血病快速诊断方法和新型疫苗的研发提供了理论基础。
- 徐明国杨宁宁刘志科张桂枝吴鹏易继海吴文星王震陈创夫
- 关键词：禽白血病P27基因反应原性抗原表位生物信息学分析
- 一种MSTN纳米抗体、构建方法及其应用
- 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种MSTN纳米抗体、构建方法及其应用，构建绵羊MSTN基因表达产物的纳米抗体文库；通过噬菌体展示技术得到针对MSTN基因表达产物特异性纳米抗体；构建双价绵羊MSTN纳米抗体。本发明提供...
- 陈创夫盛金良吴鹏李尤简郭吉星
- 文献传递
- 一株NSP2蛋白部分氨基酸缺失的猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传变异分析
- (目的)为了研究新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)遗传变异情况.(方法)经PRRSV 临床病样分离,通过PT-PCR 方法对发病猪场PRRSV NSP2 部分基因和ORF5 基因进行扩增、克隆和测序,分析其分子变异...
- 张勋梁田杨素芳陈新凯吴鹏盛金良
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因遗传变异分析
- 文献传递
- PD-1纳米抗体、制备方法及其应用
- 本发明属于生物医学技术领域，特别涉及PD‑1纳米抗体、制备方法及其应用。使用纳米抗体可以提高或者协同增强与抗原的结合能力。纳米抗体不具备完整的抗体结构，缺少Fc端以及Y型结构，抗原与纳米抗体结合后不容易被识别，可以轻易逃...
- 陈创夫吴鹏
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒纳米抗体文库构建与筛选被引量：4
- 2018年
- 旨在获得牛病毒性腹泻病毒(BVDV)特异性纳米抗体。通过用BVDV-E0重组蛋白对羊驼进行免疫,分离血液中的淋巴细胞。利用噬菌体展示技术,构建噬菌体展示文库,经过连续3次生物淘筛获得与BVDV-E0蛋白结合的噬菌体,对所得VHH序列进行测序和基因比对。用ELISA筛选出抗BVDV-E0的高亲和力纳米抗体,并验证纳米抗体的亲和力和活性。结果成功构建了插入率为86%、库容量为1.3×1011 cfu的噬菌体表达文库,经过筛选获得5个BVDV-E0阳性单克隆,将这些基因克隆至原核表达体系,表达和纯化后获得了高纯度的BVDV-E0纳米抗体,经亲和力的鉴定获得2个不同的高亲和力的VHH基因,并且能结合人工抗原E0,还能够被竞争抗体所阻断。研究结果为用于组装检测BVDV试剂盒和研制BVDV疫苗奠定了基础。
- 丁金花李启峰马旭升肖红冉肖盛中吴鹏盛金良陈创夫
- 关键词：噬菌体展示技术
- 一株猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2部分基因、ORF2-7基因的克隆与序列分析
- 引言猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种严重危害养猪业的高度传染病[1].为了研究新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)遗传变异情况,采用PT-PCR方法对PRRSV阳性病料...
- 张勋梁田陈新凯吴鹏肖媛媛盛金良
- 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0蛋白原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：7
- 2018年
- 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)能够引起牛羊的持续感染,临床上很难对其根除,建立该病有效检测方法对净化畜群具有重要意义。本研究构建BVDV E0蛋白基因重组表达载体在大肠杆菌中诱导表达,用重组的E0蛋白为包被抗原,确定抗原最佳包被浓度为5μg/mL,最佳血清稀释比为1∶10,最佳封闭液为5%脱脂奶粉,最佳封闭条件为37℃封闭2 h,酶标二抗稀释度为1∶5000,作用时间为30 min,样品临界值X+2S为0.278。该方法与IDEXX的BVDV间接ELISA试剂盒比较总符合率为86%,与口蹄疫病毒、牛支原体、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副结核、牛布鲁氏菌病阳性血清无交叉反应。该检测方法能够用于BVDV抗体水平的临床检测,可为感染病畜的合理淘汰提供实验依据。
- 丁金花马旭升蔡卓轩肖盛中吴鹏盛金良陈创夫
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒间接ELISA
- 牛病毒性腹泻病毒E2抗原表位表达及验证被引量：2
- 2016年
- [目的]获得高效表达的重组牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea virus,BVDV)E2免疫抗原蛋白。[方法]应用软件分析BVDV-E2蛋白抗原表位,将富含抗原表位基因片段连接表达载体p GEX-4T-1,并转化至大肠杆菌(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot检测诱导表达蛋白,经镍柱分离纯化;以纯化蛋白为包被抗原,用间接ELISA检测抗原对免疫血清的反应性。[结果]成功克隆BVDV-E2抗原表位基因,并在大肠杆菌中高效表达,Western Blot和ELISA证实表达重组蛋白对BVDV阳性血清具有反应原性。[结论]获得大小为49.5 k Da的BVDV-E2抗原表位蛋白,并且该抗原稀释度在1:40,抗体稀释度在1:20时结合效果最佳。可用于后续的纳米抗体筛选的研究。
- 黄美玲吴鹏李天森张国奇杨霞陈创夫盛金良
- 关键词：抗原表位E2蛋白BLOT间接ELISA
