李月
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 活体电穿孔导入法增强恶性疟原虫核酸疫苗免疫反应研究被引量：1
- 2016年
- 目的采用活体电穿孔免疫方法,研究恶性疟原虫DNA核酸疫苗不同免疫剂量对于动物免疫反应的影响,并对载体中Cp G寡脱氧核苷酸基序的免疫刺激活性进行了初步探讨。方法将恶性疟原虫多表位嵌合抗原M.RCAg-1基因克隆于真核表达载体VR1012中,使用电穿孔导入方法免疫小鼠,采用ELISA检测抗体效价、ELISPOT测定细胞因子分泌水平,探索基因疫苗最佳免疫剂量以及考察免疫反应类型。使用计算机分析恶性疟核酸疫苗中特殊CpG基序组成,实验验证基因疫苗中CpG基序的免疫刺激活性。结果相同DNA免疫剂量下,电穿孔免疫法与单纯肌内注射免疫法相比较,小鼠血清IgG抗体效价提高118倍,且能显著诱导体内特异性Th1和Th2型细胞反应。电穿孔免疫小鼠血清可识别天然虫体抗原,抗体效价可达1∶1200。恶性疟原虫核酸疫苗抗原DNA含有24个CpG免疫活性基序,可以有效的刺激人外周血单个核细胞(PBMCs)增殖与IL-6分泌。结论活体电穿孔方法可以显著提高恶性疟原虫DNA疫苗体液免疫和细胞免疫水平。
- 高宇辉邓唯唯张佳佳李月
- 关键词：DNA疫苗电穿孔CPG基序
- α-甘露糖肽作为佐剂对恶性疟原虫多表位蛋白疫苗M.RCAg-1免疫原性的影响
- 2016年
- 目的探讨α-甘露糖肽(α-mannatide)作为佐剂对恶性疟原虫多表位蛋白疫苗M.RCAg-1免疫原性的影响。方法将小鼠随机分为4组:疫苗组(M.RCAg-1)、疫苗佐剂组(M.RCAg-1+α-mannatide)、佐剂对照组(α-mannatide)、弗氏佐剂对照组(M.RCAg-1+Freund’s),分别于第0、14、28天经背部皮下免疫小鼠,0.1 ml/只。采用ELISA法检测3次免疫后小鼠血清Ig G抗体水平、抗体亚型以及血清抗体对单表位的识别,间接免疫荧光反应(IFA)检测抗体对恶性疟原虫天然蛋白的识别,ELISPOT检测其细胞因子的分泌水平。结果 3次免疫后,疫苗佐剂组GMT明显高于疫苗组(P<0.05);疫苗佐剂组GMT与弗氏佐剂对照组持平(P>0.05)。疫苗佐剂组产生的高水平Ig G主要以Ig G1为主。疫苗佐剂组抗体对单表位和天然虫体的识别效果显著。免疫小鼠各表位和蛋白诱发分泌IL-4的特异性淋巴细胞克隆数高于分泌IFNγ的特异性淋巴细胞克隆数(P<0.05)。结论α-mannatide作为恶性疟原虫多表位蛋白疫苗M.RCAg-1的佐剂能诱导其产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答,具有一定的抗疟原虫感染保护作用。
- 李月邓唯唯姚美雪张佳佳王冰王恒
- 关键词：佐剂恶性疟原虫蛋白疫苗免疫原性
- 基于山梨醇多次同步化处理的恶性疟原虫体外培养同步化方法
- 2015年
- 为了获得恶性疟原虫红细胞内期不同生长阶段更加精准的组织材料，本研究探索一种简便易行并能获得同步化程度很高的恶性疟原虫虫株的方法。该方法采用山梨醇多次连续同步化恶性疟原虫环状体，并继续培养得到同步化程度高、窗口小、虫血率高的红细胞内期各期的恶性疟原虫虫株；室温条件下（17～20℃）继续培养同步化至裂成熟殖体期的恶性疟原虫虫株，用孔径1．2μm的无菌滤膜过滤，收集裂殖子。经同步化处理之后，恶性疟原虫在环期、早期滋养体期、晚期滋养体期和成熟裂殖体期的同步化程度分别在90％、85％、85％和80％以上，同步化后各期恶性疟原虫虫血率可达10％～20％，各期虫株的生长周期的窗口可达4h以内。
- 姚瑶张连惠席珏敏郭莉李月王恒
- 关键词：恶性疟原虫山梨醇同步化
