李君红
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：兰州军区兰州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒介导的CIB1过表达对人脑胶质瘤细胞增殖和周期影响被引量：3
- 2017年
- 目的神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤,其中恶性度最高的多形性胶质母细胞瘤现有的手术及放化疗等治疗方式对患者总体生存率无显著改善。本研究观察重组慢病毒中与肿瘤增殖、周期相关的钙整合素结合蛋白1(calcium-and integrin-binding protein 1,CIB1)基因,在人胶质瘤细胞系U251中的过表达情况及对其增殖和周期的影响。方法 PCR扩增CIB1目的片段,构建CIB1重组pLVX-IRES-CIB1-tdTomato慢病毒载体,将重组慢病毒表达载体感染293T包装细胞,进行病毒的包装并检测病毒滴度,筛选最佳病毒感染复数并感染U251胶质瘤细胞,荧光显微镜观察pLVX-IRES-CIB1-tdTomato慢病毒表达,CCK-8法检测CIB1过表达对人胶质瘤细胞增殖的影响,流式细胞仪检测CIB1过表达对细胞周期的影响。结果成功构建慢病毒表达载体pLVX-CIB1-IRES-tdTomato,制备了重组CIB1慢病毒和空载体慢病毒,病毒滴度分别为2.9×10~7和2.8×10~7 ifu/mL;用最佳病毒感染复数100感染U251细胞。CCK-8检测显示,CIB1感染组与空载体对照组及空白组相比明显促进细胞增殖(P<0.05),提示CIB1过表达对人脑胶质瘤细胞U251有生长促进效应。流式细胞检测显示,CIB1感染组U251细胞G_2/M期细胞百分比明显增加,S期细胞比例下降。结论 CIB1过表达可以促进U251细胞增殖,并使细胞G_2/M细胞比例上升。
- 李慧惠玲李君红王晓辉桑春艳张富婷周杰
- 关键词：胶质瘤细胞增殖
- 多巴胺对C8胶质细胞生长及LMO3和CIB1表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的了解多巴胺对C8胶质细胞生长的影响、可能受体途径以及对CIB1、LMO3表达的影响。方法采用MTT方法检测多巴胺、多巴胺受体激动剂、多巴胺受体拮抗剂对C8胶质细胞生长增殖的作用,同时采用免疫荧光组化法检测不同浓度多巴胺对C8胶质细胞中LMO3、CIB1表达及定位的影响。结果多巴胺对C8胶质细胞的作用与浓度相关,低浓度(10μmol/L)对C8胶质细胞生长无明显影响,中浓度(100μmol/L)可明显促进C8胶质细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),而高浓度(500μmol/L)则抑制C8胶质细胞生长(P<0.05);多巴胺处理组比多巴胺D1激动剂组促C8胶质细胞生长作用明显,同时加入多巴胺及D2受体拮抗剂组比多巴胺处理组C8胶质细胞显著增加(P<0.01)。低浓度(10μmol/L)多巴胺显著增加C8胶质细胞LMO3的表达水平(P<0.05);高浓度(500μmol/L)多巴胺则降低CIB1蛋白的表达(P<0.05)。结论多巴胺主要通过多巴胺D2受体对C8胶质细胞生长增殖起作用,并呈浓度相关性,多巴胺D2受体拮抗剂对C8胶质细胞促增殖作用有协同性,不同浓度多巴胺对C8胶质细胞中CIB1及LMO3的表达影响不同,具体作用机制还有待进一步研究。
- 惠玲王晓辉王美亮杨霄鹏马明仁桑春艳李君红张富婷
- 关键词：多巴胺多巴胺激动剂
- DPPC抑制A549细胞增殖、阻滞细胞周期及诱导DNA损伤的初步探究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨鬼臼毒素衍生物（DPPC）抑制人非小细胞肺癌A549细胞的增殖作用,阐述DPPC对A549细胞周期阻滞以及DNA损伤的相关分子机制。方法体外培养A549细胞,噻唑蓝（MTT）实验观察DPPC不同浓度或不同时间处理A549细胞后肿瘤细胞的增殖情况;倒置显微镜下观察0.5μmol/L DPPC处理A549细胞后的形态学变化;细胞流式仪检测不同浓度DPPC处理A549细胞后细胞周期的变化;蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测周期调控蛋白cyclin B1、cdc2（p34）和p-cdc2以及DNA损伤因子γ-H2AX的表达。并与依托泊苷和未予任何药物处理的A549细胞做对照。结果 MTT实验显示,DPPC不同浓度（0.001~10μmol/L）处理A549细胞48 h后或不同时间（12~72 h）同浓度（0.1μmol/L）处理A549细胞后,能够明显抑制肿瘤细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性;倒置显微镜下见DPPC处理后的A549细胞呈现整体萎缩,出现细胞碎片,细胞膜边缘出现小气泡等形态改变;细胞流式实验表明,DPPC能够显著影响A549细胞周期,使其多数阻滞在G2/M期;Westen blot实验结果显示,DPPC能够促进cyclin B1和cdc2（p34）的表达,同时抑制p-cdc2的表达,并使组蛋白H2AX的磷酸化增加。结论 DPPC能够显著抑制人非小细胞肺癌A549细胞的增殖,使细胞周期阻滞在G2/M期,可能与其上调周期调节蛋白cyclin B1、抑制cdc2（p34）磷酸化、诱导细胞DNA损伤有关;此外,DPPC体外表现出优越的抗肿瘤细胞增殖作用。
- 桑春艳杨霄鹏张富婷李君红惠玲
- 关键词：鬼臼毒素细胞增殖细胞周期蛋白类DNA损伤
- 高原环境下大鼠力竭运动后急性肾损伤的研究被引量：6
- 2015年
- 目的探讨大鼠在亚高原环境及高原环境下力竭运动后不同时间肾损伤程度的变化,以及对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)各指标进行比较,初步评价不同指标检测AKI的灵敏度与可靠性。方法 72只大鼠随机分为亚高原组和高原组,每组36只,再将两组大鼠分别随机分为6个亚组,每组6只,各组取样时间不同。通过对大鼠进行负重游泳至力竭,记录游泳时间,检测力竭后不同时间血清中肌酐、尿素氮以及中性粒细胞明胶酶相关纸质运载蛋白(neutrophil gelatnase associated lipocalin,NGAL)的含量。结果高原组力竭游泳时间明显比亚高原组短(P<0.05);亚高原组血清肌酐及尿素氮在力竭后12 h时升高(P<0.01),血清肌酐48 h时依然维持高浓度(P<0.01),而尿素氮在24 h时恢复到对照组水平,高原组血清肌酐及尿素氮在力竭运动后即刻升高(P<0.01),6 h后恢复到对照组水平,血清肌酐48 h后又显著升高(P<0.05),血清尿素氮12 h时又显著升高(P<0.05),48 h时恢复到对照组水平。亚高原及高原组血清NGAL在力竭后12 h时升高(P<0.05,P<0.01),在24 h、48 h持续升高。结论高原环境可使大鼠运动能力降低,血清中肌酐、尿素氮以及NGAL都可表征AKI,但NGAL灵敏度高、可靠性强,具有极高的稳定性。
- 张富婷常德辉张斌李君红桑春艳王养民惠玲
- 关键词：急性肾损伤力竭运动血清肌酐血清尿素氮
- CRISPR基因编辑技术在肿瘤研究中的应用被引量：3
- 2015年
- 自2013年研究人员第一次展示成簇的规律间隔的短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR）基因编辑技术在真核细胞基因编辑方面的巨大潜力之后,近几年在生物研究的各领域产生了革命性影响。在肿瘤研究方面,从基础研究到临床研究,再到转化医学的应用,CRISPR基因编辑技术均显示出强大的生命力和广泛的应用前景。
- 李君红张富婷桑春艳王晓辉惠玲
- 关键词：核糖核酸酶类
