郑红飞
- 作品数:6 被引量:7H指数:2
- 供职机构:甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金甘肃省生物技术专项甘肃省科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牦牛孤雌激活胚胎在不同培养液中的发育及DNMT1基因的表达
- 为寻求较佳的牦牛胚胎培养液,本实验中将成熟的牦牛卵母细胞进行孤雌激活后置于SOFaa和G1/G2两种不同的培养液中进行发育培养,统计其在24h、48h、96h、120h和168h的胚胎发育情况,并采用实时荧光定量PCR....
- 李秦潘阳阳张译夫郑红飞吕鹏何翃闳崔燕余四九
- 关键词:牦牛卵母细胞孤雌激活DNMT1实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 牦牛Tp53基因特征分析及其在不同发情时期卵巢中的表达被引量:4
- 2015年
- 为研究牦牛肿瘤抑制蛋白Tp53(Tumor protein p53)的基因序列特征及其在牦牛卵巢中的表达情况,采集不同发情时期牦牛卵巢。根据黄牛的基因序列设计5'到3'端特异性引物,RT-PCR扩增基因克隆得到Tp53基因,并对其基因结构等其他生物信息进行分析。采用Real-time PCR方法分析牦牛不同发情时期卵巢中Tp53基因的表达差异。结果显示:牦牛Tp53基因序列的编码区为1 161 bp,编码386个氨基酸。相似性与进化分析显示,与瘤牛Tp53基因的相似性最高,达到98.4%,与家猫的相似性最低,为80.7%,表明Tp53基因在进化中具有高度保守性;Real-time PCR检测结果显示,Tp53基因在各个发情时期卵巢中均有表达,且表达量差异显著(P<0.05)。Tp53基因的表达量出现差异可能是由于在不同发情时期卵巢细胞DNA损伤程度及内分泌等因素的不同所致。牦牛Tp53基因的成功克隆及生物信息学分析为该基因的进一步研究奠定了一定基础。
- 郑红飞潘阳阳刘鹏刚彭秀梅崔燕余四九
- 关键词:牦牛TP53生物信息学卵巢
- 两种培养液对牦牛孤雌激活胚胎发育及DNMT1基因表达的影响被引量:2
- 2015年
- 为寻求较佳的牦牛胚胎培养液,将成熟的牦牛卵母细胞进行孤雌激活后分别置于培养液SOFaa和G1/G2中进行发育培养,观察培养开始后第24、48、96、120和168小时胚胎的发育情况,并采用实时荧光定量PCR检测DNMT1基因的表达量。结果显示,SOFaa液中2-4细胞胚胎、4-8细胞胚胎、9-16细胞胚胎、桑葚胚和囊胚的发育率分别为87.50%、68.00%、40.00%、34.29%、12.86%;而G1/G2联合培养液中2-4细胞胚胎、4-8细胞胚胎、9-16细胞胚胎、桑葚胚和囊胚的发育率分别为89.33%、81.33%、58.67%、49.33%、17.14%。胚胎中DNMT1基因在G1/G2联合培养液中的表达量显著高于SOFaa液中的表达量。以上结果表明,G1/G2联合培养液可通过调控DNMT1基因的表达而提高胚胎发育率,可作为牦牛胚胎体外培养的较佳培养液。
- 李秦潘阳阳张译夫郑红飞吕鹏何翃闳崔燕余四九
- 关键词:牦牛卵母细胞孤雌激活DNMT1基因
- 牦牛PGF基因特征的分析及其在不同来源囊胚中表达情况的检测
- 2016年
- 为了探讨牦牛(Bos grunniens)胎盘生长因子(PGF)的特征及其在不同来源囊胚中的表达差异,依据黄牛(Bos taurus)PGF基因序列5′端和3′端的保守序列设计特异性引物,RT-PCR克隆得到牦牛PGF基因,利用生物信息学软件对牦牛PGF基因进行特征进行预测分析,同时采取实时荧光定量(RT-qPCR)检测PGF基因在牦牛体外受精囊胚和体内来源囊胚中表达的差异性。结果,本研究成功克隆得到牦牛PGF基因序列(GeneBank登录号:KU902418),在组成蛋白质的149个氨基酸中,含量最高的是半胱氨酸Cys(27.9%),最低的是丙氨酸Ala(21.4%),PGF基因编码的蛋白为亲水性蛋白。同源性分析和系统进化树分析结果表明,牦牛PGF基因与黄牛PGF基因具有高度同源性,为99.3%,表明PGF基因在进化过程中有高度的保守性。实时荧光定量结果显示,体内来源囊胚的PGF基因表达水平显著高于体外囊胚(P<0.05),约为体外囊胚的6.3倍。结果表明,PGF基因体外囊胚低水平表达在一定程度上影响囊胚附植。上述研究结果为哺乳动物囊胚附植机制研究提供了一定的理论基础。
- 张鉴潘阳阳何翃闳郑红飞陈平李谷月徐庚全余四九
- 关键词:牦牛囊胚