童梅
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：北京三元基因工程有限公司更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于SM蛋白的CHO细胞分泌工程化改造和抗体表达的研究被引量：3
- 2014年
- 目的通过构建基于SM基因的分泌工程化改造的CHO-AV-SM细胞株,探讨在悬浮培养条件下,过表达转运蛋白SM基因对分泌蛋白表达的影响。方法首先从人HEK293FT细胞中克隆出sly1和munc18c基因,然后构建含有SM基因的真核表达载体pBSM;随后将pBSM质粒稳定转染入CHO-AV细胞并鉴定,获得了基于SM基因的分泌工程化改造的CHO-AV-SM细胞株;在此基础上对CHO-AV-SM细胞株进行悬浮培养适应,并测定了CHO-AV和CHO-AV-SM细胞株的生长和蛋白表达参数。结果过表达转运蛋白SM基因,CHO-AV-SM细胞株的抗体表达量较CHO-AV抗体表达量提高约75%,且测得第6天细胞数达到最大值,此时CHO-AV的表达量约为45.4μg/ml,CHO-AV-SM的表达量为79.5μg/ml。结论通过构建全抗稳定表达细胞,在细胞中过表达SM基因,并悬浮培养适应,建立了悬浮培养条件下基于转运蛋白过表达的分泌工程改造方法,为转运蛋白改造CHO细胞,提升全抗表达能力提供了有力支持。
- 刘毅华童梅刘金毅徐晨
- 关键词：CHO蛋白质工程蛋白质类蛋白质类贝伐单抗
- 聚乙二醇定点修饰蛋白质药物的技术和临床研究进展被引量：1
- 2015年
- 聚乙二醇(PEG)定点修饰蛋白药物是针对蛋白特定基团特定位点的修饰,相比于非定点随机修饰的特点是PEG修饰位点的单一与确定,避免了修饰异构体的干扰,能较好的保留药物体内外活性;修饰产物组成均一、性质稳定,便于质量控制,降低由修饰异构体引起的潜在的安全性风险,并很大程度上提高得率,降低成本。已有PEG定点修饰蛋白药物上市,还有部分处于临床试验阶段。本文综述了PEG定点修饰蛋白药物的技术研究与临床进展,包括PEG定点修饰剂、定点修饰方法、PEG定点修饰的上市和临床药物及面临的问题,并展望了PEG修饰技术未来的发展前景。
- 杨凯睿高向东徐晨童梅陆小冬
