曹华
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院放射医学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人白血病抑制因子和白细胞介素6融合基因的构建与表达
- 1997年
- 为了获得对白血病细胞有更强的抑制和诱导分化作用,本实验应用计算机优化设计,采用PCR扩增和分子克隆技术,分别扩增编码IL-6成熟蛋白的部分cDNA片段和编码LIF成熟蛋白的cDNA片段与人工设计的四肽接头连接到克隆载体,并将IL-6基因插入到LIF基因的N端,亚克隆到原核表达载体pBV220酶切位点之间,融合成编码单一的基因。采用30℃扩增菌体,42℃诱导,实现了在E.coli中表达预期的36kD蛋白谱带。表达量约占菌体总蛋白量的21％。经初步活性测定,重组融合因子对HL-60白血病细胞克隆生长的抑制明显地强于LIF和IL-6单独使用时的作用。
- 孙丽亚丁清明葛忠良曹华张群伟
- 关键词：白血病抑制因子白细胞介素6融合基因基因构建基因表达
- rhTpo/GM-CSF融合蛋白的构建、表达及活性测定被引量：2
- 1998年
- 本研究的目的是找出一个治疗由于放化疗等原因造成的造血组织损伤导致的贫血、感染和出血的有效方法。通过RT-PCR的方法从人胎肝中克隆了重组人血小板生成素(rhTpo)的基因,利用基因工程的手段将其与重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的基因相融合,并在原核细胞中表达。研究结果表明,大肠杆菌JM101表达的融合蛋白rhTpo/GM-CSF在体外小鼠骨髓造血祖细胞的培养中保留了Tpo对巨核细胞系和红细胞系的刺激作用,并增加了GM-CSF对粒细胞系的刺激活性。结论提示,原核细胞表达的融合蛋白rhTpo/GM-CSF具有刺激骨髓红细胞系、粒细胞系及巨核细胞系造血的活性。
- 曹华崔立斌张群伟刘秀珍胡良平葛忠良马清钧
- 关键词：血小板生成素粒-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白
