张亚军
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 供职机构：浙江农林大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学更多>>
- 基于荧光染料PicoGreen和核酸适配体的伏马毒素B_1检测方法被引量：9
- 2015年
- 伏马毒素B1是主要存在于玉米及玉米制品中的一种可以引起癌症的霉菌毒素。针对霉菌毒素精准检测技术的开发对于保障食品安全至关重要。本研究利用核酸适配体与伏马毒素B1结合后不再结合其互补核酸序列的选择性以及Pico Green与双链DNA结合的特异性,开发了一种快速检测伏马毒素B1的适配体方法。Pico Green与双链DNA反应15 min后激发产生的荧光达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。该方法的最低检测限为0.1μg/L(0.1 ppb),线性范围为0.1-1μg/L(0.1-1 ppb),整个检测流程可在40 min内完成。特异性试验显示伏马毒素B1适配体与黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素、桔毒素和玉米赤霉烯酮等常见霉菌毒素无交叉反应。结果表明适配体方法与基于抗体的检测伏马毒素B1商品化ELISA试剂盒相当,Kappa值为0.857。由于核酸适配体比抗体成本低,检测时间短,因此基于核酸适配体的方法比基于抗体的ELISA方法更具有推广应用价值。
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- 关键词：核酸适配体荧光染料PICOGREEN
- 基于非标记荧光染料和核酸适配体的检测生物分子的方法
- 本发明涉及生物工程领域，旨在提供一种基于非标记荧光染料和核酸适配体的检测生物分子的方法。该方法是将核酸适配体和待检测的生物分子混合后，加入与核酸适配体互补的寡核酸链；核酸适配体与待检测的生物分子发生特异性结合，未结合的多...
- 宋厚辉金庆日杨梦华邵春艳程昌勇王晓杜杨杨杨永春卫芳芳桂海娈张亚军方维焕
- 文献传递
- 核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立被引量：4
- 2015年
- 赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L Na Cl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2(pH8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L^200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-Pico Green方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。
- 桂海娈金庆日张亚军王晓杜杨永春邵春艳程昌勇卫芳芳杨杨杨梦华宋厚辉
- 关键词：赭曲霉毒素A核酸适体荧光
- 基于适体技术的桔青毒素检测方法的建立被引量：3
- 2016年
- 桔青毒素(citrinin,CTN)是以玉米、谷物、奶酪等为主要成分的食品和动物饲料中常见的、由桔青霉菌产生的酮类真菌毒素,可引起人和动物的慢性中毒或癌症,一直缺少灵敏的快速检测方法。本文通过指数富集适体系统进化技术(简称SELEX)对可能与CTN结合的特异性适体进行了筛选,经过15轮循环,得到17条适体。通过二级结构分析、亲和力检测发现适体13(Apt-13)对CTN有较好的亲和度,解离常数Kd为0.06μmol/L。进一步利用非荧光标记染料Pico Green,利用其与双链DNA结合的原理,建立了桔青毒素非标记荧光检测方法,30min完成检测,最低检测限达到国家标准(50ppb)且与其他毒素无交叉反应。本研究建立的基于适体的桔青毒素检测技术成本低,可以替代传统的基于抗体的检测方法,为霉菌毒素的精准检测技术的开发提供了实验证据。
- 张亚军金庆日邵春艳桂海娈方维焕杨梦华宋厚辉
- 关键词：适体亲和度
