杨庆良
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- LHRHa与八聚精氨酸共修饰载氟尿嘧啶靶向脂质体的构建及其抗前列腺癌作用被引量：3
- 2015年
- 目的构建促黄体激素释放激素类似物(LHRHa)与八聚精氨酸(R8)共修饰载氟尿嘧啶(5-FU)脂质体(LHRHa/R8-LP-5-FU),对其前列腺癌靶向性以及治疗效果进行初步研究。方法采用薄膜分散法制备LHRHa/R8-LP-5-FU,考察其形态、粒径、电位,并通过PC-3前列腺癌细胞定性和定量摄取实验考察其前列腺癌细胞靶向性。采用噻唑蓝(MTT)实验以及肿瘤球实验考察LHRHa/R8-LP-5-FU对PC-3细胞增殖抑制率。结果所制备LHRHa/R8-LP-5-FU粒径为(115.0±15.2)nm,电位为(11.00±2.15)m V,5-FU的包封率(84.5±5.1)%。体外细胞摄取实验表明,PC-3细胞对LHRHa/R8-LP摄取效率分别是R8修饰脂质体(R8-LP)和LHRHa修饰脂质体(LHRHa-LP)2.8和3.2倍(P<0.01)。细胞毒性实验结果显示,以0.9%氯化钠溶液为对照,LP-5-FU、R8-LP-5-FU、LHRHa-LP-5-FU和LHRHa/R8-LP-5-FU对PC-3细胞的增殖抑制率分别为(26.4±4.5)%,(39.5±4.2)%,(48.6±3.5)%和(82.5±4.3)%(P<0.01)。LHRHa/R8-LP-5-FU对肿瘤球的生长抑制作用明显高于其他脂质体。细胞毒性实验结果与细胞摄取实验结果一致。结论 LHRHa与细胞穿膜肽共修饰载5-FU脂质体具有良好的前列腺肿瘤细胞靶向性和抗肿瘤作用,是一种潜在的治疗前列腺癌的高效给药系统。
- 杨庆良夏永华何岩张广云宋歌
- 关键词：脂质体
- 神经胶质瘤致病因子-1在肾癌细胞株769-P体外侵袭活性强化中的作用及其机制被引量：1
- 2016年
- 目的 观察神经胶质瘤致病因子-1（Gli-1）在肾癌细胞株769-P细胞体外侵袭活性强化中的作用.方法 构建Gli-1-小干扰RNA （siRNA）慢病毒载体,将体外培养好的肾癌769-P细胞株分为3组：A组：Gli-1-siRNA和pGCL-绿色荧光蛋白（GFP）共转染组.B组：未转染组;C组：pGCL和pHelper 1.0共转染组.A组为实验组,B、C两组为对照组.应用基因转染方法,将A组肾癌769-P细胞转染Gli-1-siRNA慢病毒载体.检测Gli-1基因表达对肾癌细胞株769-P细胞的抗增殖作用和生物学功能的影响,通过Western blot和实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）技术检测Gli-1-siRNA在769-P细胞中的表达水平,并通过噻唑蓝（MTT）法、划痕实验、流式细胞仪、显微镜等观察比较转染Gli-1-siRNA的769-P细胞的的迁移能力、黏附能力和凋亡等形态学改变.结果 （1）阴性对照组的Gli-1 mRNA表达量为98.2 ±6.6,Gli-1-siRNA转染组为53.8 ±4.6,差异有统计学意义（P＜0.05）.（2）阴性对照组的Gli-1蛋白表达量为94.9±7.9,Gli-1-siRNA转染组为42.6±3.2,差异有统计学意义（P＜0.05）.（3）划痕实验结果显示Gli-1-siRNA转染的769-P细胞株迁移能力低于正常769-P细胞株（P＜0.05）.（4） MTT实验结果显示,Gli-1-siRNA对769-P细胞的活性抑制明显增强,相同作用时间不同比例之间差异有统计学意义（P＜0.05）,同一比例不同作用时间之间差异有统计学意义（P＜0.01）.（5）流式细胞术检测结果显示,B、C组769-P细胞12 h的凋亡率为（10.67±0.23）％和（6.84±0.16）％,A组细胞12h凋亡率为（45.40±5.79）％,24h凋亡率为（60.67±5.79）％,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.（6）A组Gli-1-siRNA转染成功的769-P细胞其胞质内出现颗粒状物,肾癌细胞逐渐模糊、消失.24h后769-P细胞数明显减少,48 h后癌细胞大部分凋亡,细胞漂浮,并且在培养液中出现细胞碎片.B、C组769-P细胞状况良好,未见明显细胞�
- 杨庆良张海芳张广云周晨龙
- 关键词：肾癌小干扰RNA
