冯怡
- 作品数：4 被引量：44H指数：4
- 供职机构：北京生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 内皮抑素研究进展被引量：5
- 2001年
- 新生血管的生成 (Angiogenesis)与多种生理过程相关 ,受多种促进和抑制因子的调节 ,细胞外基质蛋白经酶解产生的小片段中很多都参与了这一过程的调节。内皮抑素 (Endostatin)是 1997年首先从小鼠血管内皮瘤EOMA细胞培养上清中发现的 ,是细胞外基质蛋白胶原XVⅢα1链NC1结构域C末端 184个Aa的片段。可抑制bFGF和VEGF刺激的血管内皮细胞的增殖和迁移 ,抑制新生血管的形成 ,抑制肿瘤的形成和转移。由于其作用对象是血管内皮细胞 ,而不是转化的肿瘤细胞本身 ,长期反复治疗中不会引起耐药性。它在肿瘤治疗中的应用前景引起多方关注 ,相关研究广泛开展起来。本文综述了近几年在其生物功能。
- 冯怡
- 关键词：内皮抑素新生血管生成肿瘤治疗
- 人脐静脉血管内皮细胞的分离、培养、鉴定及试验研究被引量：8
- 2002年
- 血管内皮细胞体外培养,在血管再生、新血管生成机理、内皮细胞在心血管系统疾病中的作用、内皮细胞与造血的关系等方面的研究中有很高的应用价值。本研究借鉴了前人的工作,建立了胶原酶灌流消化获得人脐静脉血管内皮细胞并进行体外培养的的方法,探讨了影响人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分离培养的影响因素。同时应用建立的HUVEC体外培养进行了内皮抑素的抑制活性检测,证明了内皮抑素对于激活增殖的HUVEC的抑制作用,为今后的试验研究打下了基础。
- 冯怡马清钧
- 关键词：人脐静脉血管内皮细胞细胞培养内皮抑素
- 人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化与生物功能研究被引量：25
- 2001年
- 内皮抑素 (Endostatin)是近年来新发现的一种内源性新生血管生成 (Angiogenesis)抑制因子 ,通过抑制新血管生成而抑制肿瘤的形成和转移且不会引起耐药性 ,具有极高的临床应用前景。巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)具有表达率高、产物可分泌、可对高等真核生物蛋白正确进行翻译后加工、遗传稳定、发酵工艺成熟等优点被用来进行重组人Endostatin的表达。本研究用PCR的方法从人胎肝cDNA文库中扩增出人Endostatin的cDNA ,测序正确后转入毕赤巴斯德甲醇酵母 ,并获得了高效可溶型表达 ,用肝素亲和层析的方法进行纯化 ,纯化后产物经SDS PAGE薄层扫描分析纯度达 98 7%以上 ,质谱测定分子量为 2 0 43kD与理论值一致 ,蛋白质N端序列测定结果为SPPAHTHRDFQPVLH与天然序列一致。生物活性检测证明可抑制鸡胚尿囊绒毛膜 (CAM)的新生血管生成 (Angio genesis) ,并可抑制血管内皮细胞的增殖。因此用酵母表达系统可以得到具有生物活性的内皮抑素 。
- 冯怡崔立斌刘传暄马清钧
- 关键词：内皮抑素新生血管生成生物功能
- 用RNaseⅢ制备的小干涉RNA降解SARS冠状病毒基因的细胞内转录物被引量：8
- 2004年
- SARS冠状病毒是引起重症急性呼吸综合症的主要原因 ,目前尚没有特效药物或疫苗对抗这种新病毒。RNA干涉是指双链RNA可以特异地降解细胞内同源基因的mRNA。在哺乳动物细胞中 ,<30bp的小双链RNA能引起RNA干涉 ,又可以避免干扰素反应。通过体外转录得到SARS病毒 3种基因RNA依赖的RNA聚合酶、刺突蛋白及核衣壳蛋白部分片段的长双链RNA ,然后用RNaseⅢ有限切割成长度 <30bp的小干涉RNA。同时把上述 3种基因片段分别连接到质粒pGL3 Control中 ,得到的 3个质粒pGL R、pGL S和pGL N可以分别在细胞内转录出荧光素酶 RNA依赖的RNA聚合酶、 刺突蛋白、 核衣壳蛋白的杂合mRNA。上述质粒分别和相应的小干涉RNA共转染HEK2 93F细胞 ,测定荧光素酶活性 ,结果小干涉RNA使相应质粒表达荧光素酶的活性显著下降 ;用逆转录定量PCR反应测量mRNA丰度 。
- 朱旭东党颖冯怡李涛黄培堂
- 关键词：SARS冠状病毒刺突蛋白核衣壳蛋白
