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许凯
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1
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供职机构:
北京科兴生物制品有限公司
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
邵铭
中国食品药品检定研究院
刘书珍
中国食品药品检定研究院
黄金凤
北京科兴生物制品有限公司
李长贵
中国食品药品检定研究院
徐康维
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2014
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B型流感病毒血凝素的纯化
2014年
目的纯化B型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)。方法使用不同浓度的菠萝蛋白酶酶切B型流感病毒HA,超速离心获得含HA的上清后,经蔗糖密度梯度离心进行纯化,HPLC分子筛分析纯化效果。纯化后的蛋白经糖苷酶PNGaseF处理后,切取丰度较高的蛋白条带,进行质谱鉴定。结果病毒蛋白与菠萝蛋白酶蛋白含量的最佳比例为40:1;5%-30%梯度浓度的蔗糖能很好地去除低相对分子质量的蛋白,流感病毒内丰度较高的NP及M蛋白得到很好的去除;纯化的HA蛋白的纯度大于90%,且HPLC分析显示仅有1个主峰,均一性良好。结论优化了B型流感病毒HA蔗糖密度梯度离心纯化方法,获得了高纯度的HA蛋白,为制备HA标准抗血清奠定了基础。
徐康维
黄金凤
许凯
李娟
邵铭
刘书珍
王军志
李长贵
关键词:
流感病毒
血凝素
纯化
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