李文波
- 作品数：16 被引量：57H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 首次^(131)I治疗儿童及青少年术后分化型甲状腺癌疗效的影响因素分析被引量：5
- 2016年
- 目的:讨论儿童及青少年分化型甲状腺癌(differentiated thyroid carcinoma,DTC)患者手术后首次放射性碘(radioiodine,RAI)治疗清除残余甲状腺组织的疗效的影响因素。方法:回顾性分析首次接受大剂量清除残余甲状腺组织治疗的患者88例,分为清甲治疗成功组与未成功组,对数据进行秩和检验、卡方检验或Fisher确切率法筛选影响因素,并做logistics回归分析。结果:用单因素分析筛选出治疗前甲状腺摄碘率(radioactive iodine uptake,RAIU)、淋巴结转移、肺转移是影响首次清甲治疗疗效的因素。多因素分析提示RAIU及淋巴结转移为影响首次清甲治疗疗效的独立影响因素。结论:儿童及青少年分化型甲状腺癌患者首次清甲治疗疗效的影响因素有RAIU、淋巴结转移、肺转移,其中RAIU、淋巴结转移的影响更为明显。
- 许璐庞华刘琼管丽丽王洁李文波
- 关键词：分化型甲状腺癌碘放射性同位素影响因素
- 甲状腺髓样癌人源噬菌体单链抗体的筛选及初步鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的:从大容量甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)人源噬菌体单链抗体(single chain variable fragments,sc Fv)库中筛选出特异的抗MTC单链抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:分别以甲状腺上皮细胞TEC细胞株和MTC细胞TT细胞株为抗原进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集循环,筛选出抗MTC抗体,将筛选出的阳性克隆感染E.coli HB2151;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导抗体可溶性表达,HiTrapTM Anti E-tag柱纯化表达抗体;SDS-PAGE和Western blot检测抗体表达和相对分子质量;ELISA检测可溶性sc Fv的特异性和免疫活性,分为TT细胞组、SW480细胞组、TEC细胞组和PBS空白对照组,分别检测各组在酶标仪A450 nm处的吸光度;四甲基偶氮唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)分别检测TT细胞组、SW 480细胞组与不同浓度sv Fv反应并读取A490 nm处的吸光度,设置空白对照PBS组,分别计算细胞抑制率。结果:5轮筛选后,抗体得到了明显富集。随机挑取单个细菌克隆,phage ELISA和sc Fv ELISA阳性率分别为65%和50%。SDS-PAGE、Western blot结果显示MTC特异性抗体分子量为28 k D左右。ELISA结果显示,TT细胞组的吸光度(0.41±0.12)较SW 480细胞组(0.20±0.03)、TEC细胞组(0.13±0.01)、PBS空白对照组(0.07±0.01)明显增加(P=0.000)。MTT法结果显示,TT细胞组和SW 480细胞组在sc Fv浓度为0.1、1、10μmol/L时,2细胞株间抑制率有统计学意义,统计量分别是t=2.881,P=0.02;t=5.073,P=0.006;t=7.324,P=0.000,且在sc Fv浓度为10μmol/L时,对TT细胞的抑制率最高(0.59±0.15)%。结论:利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性的抗MTC人源单链抗体。
- 刘琼庞华奚级梅李文波许璐
- 关键词：噬菌体抗体库人源单链抗体甲状腺髓样癌
- 枸杞多糖对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞的影响及可能机制的研究
- 李文波庞华周静吴宏姜蓉
- 甲状腺未分化癌人源噬菌体的单链抗体制备及其在荷人甲状腺未分化癌裸鼠模型的放免显象
- 刘倩刘琼李文波周静许璐刘影庞华
- 枸杞多糖对受X射线照射小鼠外周血象及骨髓单个核细胞的影响被引量：11
- 2016年
- 利用直线加速器全身均匀一次性照射昆明小鼠,建立放射损伤模型,经腹腔分别注射生理盐水(NS)、枸杞多糖(LBP)50、100和200 mg/kg,连续注射观察14天,计数小鼠外周血WBC、RBC、PLT及骨髓单个核细胞(BMNCs),检测BMNCs的细胞周期、凋亡率及BMNCs表面黏附分子CD49d和CD44的表达水平。结果表明,照射后小鼠表现为饮水、进食减少,行动缓慢、嗜睡,毛发凌乱,光泽性差,说明放射损伤模型建立成功;在相同时间点下,NS组与正常对照组相比,外周血WBC、RBC、PLT及BMNCs细胞计数明显减少(p<0.05)、BMNCs的细胞增殖能力明显减弱(p<0.05)、S期细胞比例显著减少(p<0.05)、G_0/G_1期细胞比例显著增加、BMNCs的细胞凋亡率明显增多(p<0.05)、黏附分子CD49d和CD44表达明显减少(p<0.05);而各LBP组与NS组相比,外周血各项指标、BMNCs细胞计数明显增多(p<0.05)、BMNCs细胞的增殖能力明显增强(p<0.05)、S期细胞比例显著增多(p<0.05)、G_0/G_1期细胞比例显著减少、细胞凋亡率明显减少(p<0.05)、黏附分子CD49d、CD44表达明显增加(p<0.05)。以上结果说明,LBP可能通过加速BMNCs细胞周期由G_0/G_1期向S期转换、降低BMNCs细胞凋亡率,提高放射损伤小鼠BMNCs细胞的增殖能力,进而上调细胞表面黏附分子CD49d和CD44的表达,来促进辐射损伤小鼠造血功能的恢复。
- 李文波庞华周静吴宏姜蓉
- 关键词：枸杞多糖骨髓单核细胞细胞周期
- 甲状腺未分化癌人源单链抗体库的构建及筛选被引量：5
- 2015年
- 目的构建天然人源甲状腺未分化癌噬菌体单链抗体库并初步筛选出抗甲状腺未分化癌抗体。方法从甲状腺未分化癌患者癌周淋巴结组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增抗体可变区基因VH和VL基因片段,并分别与相应Linker连接,再通过重叠延伸PCR技术将其拼接组装成sc Fv基因片段,并引入酶切位点SfiⅠ和NotⅠ。将双酶切后的sc Fv重组基因片段与噬菌粒栽体p CANTAB-5E连接,产物经化学转化转入大肠杆菌TG1,超感染噬菌体,构建噬菌体单链抗体库。以甲状腺未分化癌细胞(ARO细胞株)为抗原对该抗体库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选,并行ELISA鉴定抗体特异性。结果成功获得约为750 bp的sc Fv基因。用p UC19标准质粒测定转化效率达到108 cfu/μg,双酶切鉴定sc Fv基因的阳性插入率为86.4%(19/22)。筛选过程中,甲状腺未分化癌单链抗体得到富集,收获率不断提高,第4轮为第1轮的77倍。ELISA结果显示筛选出的抗体能与甲状腺ARO细胞株特异性结合。结论成功构建了人源甲状腺未分化癌噬菌体单链抗体库,并从中筛选出具有甲状腺未分化癌细胞特异性的人源噬菌体单链抗体,为进一步放免研究打下基础。
- 奚级梅庞华张森刘琼李文波
- 关键词：噬菌体展示技术噬菌体单链抗体甲状腺未分化癌
- 戴明循环管理模式在肾小球滤过率检查中的应用效果分析
- 2022年
- 目的比较戴明循环管理模式(PDCA)和常规管理模式对肾小球滤过率检查(GFR)准确性的影响。方法选取2018年1月至2019年12月该院行肾功能异常GFR检查患者1102例进行回顾性分析。以常规管理模式下实施GFR检查的311例作为对照组,以PDCA下实施GFR检查的801例作为观察组,使用鱼骨图、柏拉图、根因分析法探讨其中的主要原因,对比2组患者GFR水平及其准确性,采用独立样本秩和检验、χ^(2)检验和t检验,对操作不规范导致不准确项进行统计分析。结果同一工作人员对于图像重复处理所获得的左肾GFR水平分别为(41.200±8.130)、(40.920±7.410)mL/min,右肾GFR水平分别为(34.370±12.140)、(33.560±12.090)mL/min,差异均无统计学意义(P>0.05);不同工作人员对图像处理得到的左肾GFR水平分别为(37.930±10.240)、(38.300±9.850)mL/min,右肾GFR水平分别为(33.010±12.280)、(32.870±12.170)mL/min,差异均无统计学意义(P>0.05);采用手动勾画和自动勾画双肾显像区域,得到的左肾GFR水平分别为(44.270±6.250)、(40.730±6.080)mL/min,右肾GFR水平分别为(34.790±12.280)、(31.950±11.330)mL/min,差异均有统计学意义(P<0.05);采用手动勾画和自动勾画相同位置本底区域,得到的左肾GFR水平分别为(35.070±11.870)、(31.730±10.890)mL/min,右肾GFR水平分别为(43.650±8.550)、(39.040±8.050)mL/min,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组GFR水平准确率为84.89%,观察组为98.50%,差异有统计学意义(P=0.027)。结论PDCA在GFR检查操作中有显著效果,能提高该检查操作的质量和准确性。
- 李文波李佳雷成明王政杰
- 关键词：肾小球滤过率质量管理
- ^(131)I标记的甲状腺未分化癌人源单链抗体在荷瘤裸鼠模型的放射免疫显像被引量：1
- 2017年
- 目的测定^(131)I标记的甲状腺未分化癌(ATC)人源单链抗体(scFv)的放射性纯度与比活度,并探讨其在荷瘤裸鼠模型的体内分布情况和放射免疫显像特点,以期为ATC的诊断及治疗提供一种新的方法。材料与方法接种ATC细胞构建荷人ATC裸鼠模型。采用氯胺T法实现scFv的^(131)I标记,Sephadex G25M柱纯化标记抗体,采用三氯醋酸法测定其标记率,采用纸层析法测定^(131)I标记scFv的放化纯度、室温稳定性及血清稳定性。荷瘤裸鼠尾静脉注射^(131)I-scFv后12、24、48、72 h取各组织器官分析^(131)I-scv在体内组织器官中的生物分布情况,另取荷瘤裸鼠尾静脉注射^(131)I-scFv后12、24、48、72 h进行SPECT静态显像,观察瘤内放射性浓聚,待肿瘤清晰显影,进行SPECT/CT图像融合。结果纯化后的^(131)I-scFv标记率为91.64%,放化纯度为(93.3±0.3)%;^(131)I-scFv放于室温及血清孵育1、6、12、24 h后所测得放射性化学纯度均高于90%。^(131)I-scFv在肿瘤组织、肝、肾、肠、血液中具有较高的放射性分布。SPECT显示^(131)I-scFv能够在肿瘤组织中选择性浓聚,肿瘤组织靶/非靶比值在48 h时达最高为4.38,且显影最清晰。结论成功制备^(131)I-scFv,^(131)I-scFv在荷瘤裸鼠模型中有较好的显像效果,为进一步开展ATC的诊断及治疗研究奠定基础。
- 刘倩刘琼李文波许璐周静刘影庞华
- 关键词：碘放射性同位素单链抗体放射免疫显像
- ^(131)I标记的抗甲状腺髓样癌人源单链抗体在荷瘤裸鼠的体内分布和放射免疫显像被引量：2
- 2016年
- 目的测定^(131)I标记的抗甲状腺髓样癌(MTC)人源单链抗体(scFv)的放射化学纯度,并研究荷MTC细胞(TT cells)裸鼠^(131)I-scFv体内分布和体外放射免疫(RII)显像特点。方法氯胺T法对scFv进行^(131)I标记,Sephadex G200纯化标记抗体,三氯醋酸沉淀法测定标记率,纸层析法测定标记抗体在1、6、12、24h的放射化学纯度、室温稳定性和血清稳定性。构建荷TT细胞裸鼠模型,尾静脉注射^(131)I-scFv,分析^(131)I-scFv在裸鼠重要组织器官的分布情况,并于注射药物12、24、48、72h行SPECT正位静态显像,观察肿瘤内放射性浓集情况,肿瘤组织显像清晰时行SPECT/CT融合图像。结果标记抗体经纯化后,测得标记率为(78.60±0.08)%,放射化学纯度为(87.10±0.78)%,各个时间点的放射化学纯度均在90%以上。荷瘤裸鼠体内研究结果显示,^(131)I-scFv的放射性瘤/血、瘤/肌肉比值随时间的增长逐渐增高,48h达最高。RII显示,^(131)I-scFv可选择性聚集于肿瘤组织,48h时肿瘤显像与全身组织对比最清晰,此时融合图像可清晰显示肿瘤部位的放射性浓聚情况,体内分布和体外显像结果一致。结论成功标记了抗MTC人源scFv,生物活性较高,荷瘤裸鼠肿瘤的RII较好。
- 刘琼庞华李文波周静许璐奚级梅
- 关键词：甲状腺肿瘤放射免疫显像正电子发射断层显像术
- 枸杞多糖对电离辐射所致小鼠骨髓单个核细胞粘附分子表达及氧化损伤的影响
- 周静庞华李文波刘琼许璐
