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高原鼠兔LDH-C4的酶促动力学特征及其在低氧适应中的作用: 高原鼠兔(Ochotona Curzoniae)生活在海拔3,000 m以上的高寒草原，是一种青藏高原特有的非冬眠小型啮齿动物，高原鼠兔对低氧具有很强的耐受性，在长期进化过程中形成了一系列适应低氧环境的生理机制。LDH-...; 汪洋; 关键词：高原鼠兔低氧环境

一种大分子量透明质酸的提取纯化方法: 本发明提供了一种大分子量透明质酸的提取纯化方法，它是从高原鼢鼠中提取纯化得到，该透明质酸的平均分子量为2.6×10<Sup>6</Sup>‑3.1×10<Sup>6</Sup>Da。本方法提取的透明质酸属于高分子透明质酸...; 魏莲魏琳娜汪洋魏登邦王宁索有瑞; 文献传递

高原鼠兔脑组织中精子特异性乳酸脱氢酶的作用被引量：3: 2015年; 高原鼠兔对高原低氧环境有很强的适应性。研究发现,精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)基因在高原鼠兔脑组织中表达,为阐明LDH-C4在高原鼠兔脑组织中的作用,应用荧光定量PCR和Western blot方法,测定了Ldh-c基因在高原鼠兔脑组织中的表达水平;应用对精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)特异性的抑制剂(N-isopropyl oxamate),通过肌肉注射后,研究抑制剂对高原鼠兔脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP含量的影响。结果表明,在mRNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔脑组织中均有表达,相对表达水平分别为0.38±0.05和0.74±0.13;当肌肉注射1 m L 1 mol/L的抑制剂30 min后,血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L;与对照组相比,抑制剂组脑组织中LDH比活力、乳酸和ATP含量显著下降,抑制剂对LDH、乳酸和ATP的抑制率分别为30.78%、46.47%和21.04%。结果表明,精子特异性乳酸脱氢酶基因在高原鼠兔脑组织中表达。LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为其脑组织生命活动提供至少20%的ATP,可能使高原鼠兔减小在低氧环境中对氧气的依赖,增强对低氧环境的适应能力。; 许利娜魏莲汪洋李筱魏琳娜魏登邦; 关键词：高原鼠兔脑组织

腹腔注射腺病毒pMultiRNAi-Ldhc对高原鼠兔骨骼肌Ldhc基因的沉默效果: 2018年; 腹腔注射是一种简单且方便给药的方式,为了验证腹腔注射腺病毒pMultiRNAi-Ldhc对高原鼠兔(Ochotonacurzoniac)骨骼肌Ldhc基因沉默的可行性,将27只高原鼠兔分为干扰组、空壳组和空白对照组,每组各9只个体,干扰组和空壳组分别注射0.65ml腺病毒pMultiRNAi-Ldhc和腺病毒pMultiRNAi-NS,空白对照组注射等量生理盐水,注射后7d检测骨骼肌中Ldhc基因mRNA和蛋白的表达水平,测定了乳酸脱氢酶(LDH)活性和乳酸(LD)及三磷酸腺苷(ATP)的含量。结果表明,与空白对照组相比,干扰组在mRNA和蛋白水平上,Ldhc基因表达分别降低了41.73%和15.76%;乳酸脱氢酶(LDH)活性、乳酸(LD)和ATP含量分别降低了23.98%、51.08%和19.29%。结果说明,腹腔注射腺病毒pMultiRNAi-Ldhc能有效沉默骨骼肌中Ldhc基因表达。; 王志洁汪洋安志芳魏琳娜魏莲魏登邦; 关键词：腹腔注射高原鼠兔乳酸脱氢酶三磷酸腺苷

高原鼢鼠组织中透明质酸提取工艺及分子表征: 透明质酸(Hyaluronic acid,HA),又名玻璃酸,是一种线性大分子酸性粘多糖,由(1-β-4)-D-2葡萄糖醛酸(1-β-3)-N-乙酰基-D-氨基葡萄糖的双糖单位重复连接组成.我们为了建立高原鼢鼠组织中透明...; 魏琳娜汪洋魏登邦魏莲; 关键词：高原鼢鼠

高原鼠兔组织中精子特异性乳酸脱氢酶的作用机理: 目的高原鼠兔（Ochotona curzoniac）具有很强的高原低氧适应能力,前期研究发现,精子特异性乳酸脱氢酶（LDH-C4）在高原鼠兔体细胞中表达,为阐明LDH-C4在高原鼠兔组织中的作用机理,研究了RNAi后高原...; 王志洁汪洋安志芳魏琳娜魏莲魏登邦; 关键词：高原鼠兔乳酸 ATP; 文献传递

高原鼠兔心脏中Ldh-c基因的表达及其对无氧糖酵解水平的影响被引量：3: 2015年; 高原鼠兔(Ochotona curzoniae)对高原低氧环境有很强的适应性。本研究组前期研究显示,精子特异性乳酸脱氢酶(sperm-specific lactate dehydrogenase,LDH-C4)基因Ldh-c在高原鼠兔心、肝、脑、肌肉等组织中都有表达。本研究为了阐明LDH-C4对高原鼠兔心肌组织无氧糖酵解水平的影响,将20只高原鼠兔随机分为抑制剂组和空白对照组,每组10只。抑制剂组注射1 m L 1 mol/L LDH-C4特异性抑制剂N-isopropyl oxamate于高原鼠兔股二头肌,双侧各注射500μL;空白对照组注射等量的生理盐水。应用荧光定量PCR和Western blot方法,测定LDH-C4基因Ldh-c在高原鼠兔心肌组织中的m RNA和蛋白表达水平;比较抑制剂组和空白对照组高原鼠兔心肌组织中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力;以及乳酸(lactate,LD)和ATP含量。结果显示,在m RNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔心肌组织中均有表达,相对表达量分别为0.47±0.06和0.68±0.08;当肌肉注射1 m L 1 mol/L的N-isopropyl oxamate时,30 min后血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L,与空白对照组相比,抑制剂组心肌组织中LDH活力[(6.18±0.48)U/mg vs(9.08±0.58)U/mg]、LD[(0.21±0.03)mmol/g vs(0.26±0.04)mmol/g]和ATP含量[(4.40±0.69)nmol/mg vs(6.18±0.73)nmol/mg]显著下降(P<0.01)。N-isopropyl oxamate对LDH活力、LD和ATP含量的抑制率分别为31.98%、20.90%和28.70%。以上结果说明:Ldh-c基因在高原鼠兔心肌组织中表达;LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为心肌组织的活动提供至少28%的ATP,这可能降低高原鼠兔在低氧环境中对氧气的依赖,增强其对低氧环境的适应。; 李筱魏莲汪洋许利娜魏琳娜魏登邦; 关键词：高原鼠兔心肌组织

高原鼢鼠组织中透明质酸提取工艺及分子表征被引量：1: 2017年; 旨在建立高原鼢鼠组织中透明质酸(Hyaluronic acid,HA)提取工艺。采用单因素试验确定粗提、酶解和除杂等工艺的最佳条件,通过响应面法进一步优化粗提和酶解工艺条件。通过红外分光光度法确定HA的分子结构,Bitter-Muir法确定其葡萄糖醛酸的含量,黏度法和体积排阻色谱法确定透明质酸的分子量。高原鼢鼠最佳粗取工艺∶液料比4 m L/g(水/动物组织,V/W),提取温度26℃,提取时间1.6 h;最佳酶解工艺:酶解温度37℃,p H8.7,加酶量0.7%(1∶250胰蛋白酶/动物组织,W/W);最佳除杂工艺为:氯苯体积20%(氯苯/HA水溶液,V/V),以3倍体积95%乙醇沉淀,以7%活性碳(活性碳/HA水溶液,W/V)除杂,透析时间3 h。在此工艺条件下,每500 g高原鼢鼠组织可得到(144±3.61)mg HA粉末。平均回收率为72.73%。红外图谱显示提取物具有与Sigma公司的HA标准品一致的吸收峰,葡萄糖醛酸的质量分数为45.60%,蛋白质含量为0.11%,其分子量达到3×106 Da。本工艺提取的高原鼢鼠组织来源的HA回收率好,纯度高;高原鼢鼠组织中HA分子量大,含量高。; 魏琳娜汪洋魏登邦魏莲王宁索有瑞; 关键词：高原鼢鼠

高原鼠兔肝中Ldh-c基因的表达及其对无氧糖酵解水平的影响被引量：4: 2015年; 高原鼠兔(Ochotona curzoniac)对高原低氧环境有很强的适应性。我们研究发现,精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)在高原鼠兔肝组织中表达。为了阐明LDH-C4对高原鼠兔肝组织无氧糖酵解水平的影响,将20只高原鼠兔随机分为抑制剂组和空白对照组,每组10只。抑制剂组注射1 mol/L LDH-C4特异性抑制剂N-异丙基草氨酸盐(N-isopropyl oxamate)于高原鼠兔股二头肌,双侧各注射500μl,空白对照组注射等剂量的0.9%生理盐水。应用荧光定量PCR和western blot方法,测定了精子特异性乳酸脱氢酶基因(Ldh-c)在高原鼠兔肝组织中的表达水平,应用高压液相色谱法测定了血液中抑制剂的浓度,用生物化学方法测定了抑制剂组和空白对照组高原鼠兔肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)比活力以及乳酸(LD)和ATP含量。结果表明,在m RNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔肝组织中均有表达,m RNA相对表达水平为0.22±0.04,蛋白相对表达水平为0.97±0.20;当肌肉注射1 mol/L的抑制剂30 min后,血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L,肝组织中乳酸脱氢酶比活力抑制剂组和空白对照组分别为(4 990±290)U/g和(7 360±420)U/g,抑制剂组和空白对照组乳酸含量分别为(0.38±0.05)mmol/g和(0.53±0.03)mmol/g,抑制剂组和空白对照组ATP含量分别为(5.84±0.83)μmol/g和(7.78±1.06)μmol/g,经单因素方差分析,抑制剂组的乳酸脱氢酶比活力和乳酸及ATP含量均显著下降(P<0.01);抑制剂对乳酸脱氢酶比活力和乳酸及ATP含量的抑制率分别为30.19%±3.90%、32.22%±8.70%和24.94%±7.80%。以上结果说明,Ldh-c在高原鼠兔肝组织中表达,LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为其肝组织生命活动提供至少24%的ATP,这可能使高原鼠兔减小了在低氧环境中对氧气的依赖,增强了对低氧环境的适应力。; 魏琳娜魏莲汪洋李筱许利娜魏登邦; 关键词：高原鼠兔肝组织

miR-346在糖尿病肾病TGF-β介导的Smad信号通路中的作用被引量：7: 2016年; 目的:观察miR-346在高糖环境下小鼠肾小球系膜细胞TGF-β介导Smad信号通路中的作用,探讨miR-346参与糖尿病肾病(DN)的发病机制。方法:体外高糖(25 mmol/L)下培养小鼠肾小球系膜细胞(MC),p Genesil-miR-346和重组TGF-β药物作为干预因素,分别设TGF-β药物刺激组(10、30 ng/m L)、TGF-β药物刺激+shRNA P53干扰组、阴性对照组。细胞免疫荧光检测细胞表型;Western法检测P53蛋白和Smad3/4蛋白的表达;实时荧光定量RT-PCR法检测mRNA表达。结果:⑴miR-346的表达可由P53通过调节miR-346基因中启动子来调节;⑵miR-346可调节Smad3/4的表达,其过程是TGF-β通过P53、miR-346通路从上游来调节的。结论:miR-346通过TGF-β/Smad信号通路调控糖尿病肾病相关基因表达,二者形成正反馈效应,在DN的发生和发展中起到非常重要的作用。; 张永史秀岩罗昌霞肖厚勤汪洋; 关键词：糖尿病肾病肾小球系膜细胞 SMAD信号

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