姚小剑
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：曼尼托巴大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省国际科技合作计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 灭活微生物传染性的安全套
- 本实用新型公开了一种灭活微生物传染性的安全套；是在聚氨酯安全套(PUC)内外表面包被有纳米银粒子层。数据提示纳米银粒子通过与氮原子的相互作用而稳定地附着于PUC表面。而且HeLa细胞接触纳米银包被PUC 3小时内没有毒副...
- 姚小剑肖献忠穆罕默德·法亚兹敖竹君陈利玉
- 文献传递
- 降钙素相关肽对骨髓间充质干细胞生物学特征影响的实验研究
- 2015年
- 目的 观察携带降钙素基因相关肽（CGRP）的慢病毒对细胞生存和分化的影响. 方法 培养大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）,携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs（MSCsCGRP＋＋组）,空病毒载体转染MSCs作为对照组;应用流式细胞仪检测病毒转染率,酶联免疫吸附（ELISA）法测定CGRP蛋白表达,应用流式细胞仪及细胞免疫组化检测细胞表面标记物,胎盘蓝染色观察细胞存活能力,噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况. 结果 携带CGRP的慢病毒转染MSCs后1d,荧光显微镜未观察到细胞有荧光,但ELISA测定MSCsCGRP＋ ＋组有少量CGRP表达,随着转染时间延长,细胞逐渐出现荧光,慢病毒转染MSCs后3d和4d,镜下可见强荧光表达,细胞转染率分别为（77.87％和79.58％）,ELISA检测MSCsCGRP＋＋组CGRP表达量较对照组[（19.53±0.50） pg/ml和（3.12±0.001） pg/ml]增加（t=48.964,P＜0.01）.慢病毒转染MSCs后3d,流式细胞仪检测MSCs仍高表达CD29和CD90,CD31的表达为24.75％,细胞转染后7d,CD31的表达为20.72％,与对照组6.63％比较CD31表达增加,vWF表达也随着转染时间延长表达逐渐增加;细胞转染后3d,MSCsCGRP＋/＋组及对照组均未见α-SMA表达,细胞转染14 d,在MSCsCGRP＋＋组α SMA染色仍阴性,对照组胞浆见α-SMA阳性表达;细胞转染后3d和7d,MTT及台盼蓝染色结果显示两组间细胞活力及存活情况均无差异性（3d细胞活力t=-0.253,3d细胞存活率t=-0.307,7d细胞活力t=0.290,7d细胞存活率t=-0.690,均P＞0.05）,β半乳糖苷酶检测细胞衰老程度在两组间差异也无统计学意义（3 d t=0.167,7 dt=0.141,均P＞0.05）,随着转染时间延长,细胞转染14d,MSCsCGRP＋＋组衰老程度较对照组降低（t=2.446,P＜0.05）. 结论 转染慢病毒后细胞生物活性无明显影响,细胞仍具有增殖分化能力,细胞转染分泌的CGRP能促进细胞向内皮分化,抑制细胞向平滑肌细胞分化,这为基因工
- 龙仙萍陈攀科崔璨汪松石蓓姚小剑
- 关键词：间质干细胞降钙素基因相关肽转染细胞学技术
- Importin α1与HIV-1整合酶相互作用及其对病毒复制的影响(英文)
- 2014年
- 目的研究HIV-1整合酶与细胞蛋白Importinα1(Impα1)的相互作用及其对HIV-1复制的影响。方法采用化学发光免疫共沉淀系统定量检测细胞内HIV-1整合酶与Impα1蛋白的相互作用,同时利用基因沉默技术下调CD4+C8166 T细胞中Impα1的表达,以研究Impα/β入核转运途径对HIV-1复制的影响。结果当T细胞内Impα1表达下降时,HIV-1对其感染性显著减弱。Real-time PCR分析结果显示,尽管病毒逆转录未受到影响,但其2-LTR DNA(入核指标)及整合DNA的形成受到了抑制,提示Impα1的下调明显影响HIV-1入核转运过程。结论该研究为HIV-1整合酶与Impα1蛋白之间的相互作用及其在病毒感染中的影响提供了重要的实验依据。
- 敖竹君Kallesh Danappa Jayappa姚小剑
- 关键词：HIV-1整合酶HIV-1复制
- 一种单循环复制艾滋病毒样颗粒及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种单循环复制艾滋病毒样颗粒及其制备方法，该病毒样颗粒由一个多基因缺失的HIV前病毒质粒、一个CMV?Gag/Pol表达质粒、一个Env表达质粒共转染细胞后分离筛选获得；多基因缺失的HIV前病毒质粒通过Gau...
- 姚小剑姚小刚敖竹君欧阳清检
- 文献传递
- 3种中药对艾滋病毒感染复制的影响被引量：3
- 2016年
- 目的了解中草药或制剂槲皮素、甘草酸二铵和青蒿琥酯对艾滋病病毒复制的影响。方法在C8166T细胞被携带分泌型荧光素（Gaussia luciferase,G-Luc）的HIV病毒感染的同时或2h后加入3种不同浓度的中草药（槲皮素、甘草酸二铵和青蒿琥酯）,2～3d后观察细胞形态变化及由病毒感染导致的膜融合所至合胞体的形成,并采用荧光素酶报告基因检测C8166T细胞培养上清中的病毒相关G-Luc活性。结果 C8166T细胞的G-Luc结果显示,与甘草酸二铵、槲皮素组相比,而青蒿琥酯组的荧光活性酶活性增幅最大（F=96.126,P〈0.01）。形态学观察显示：经青蒿琥酯处理的由病毒感染导致的膜融合所形成的合胞体,与对照组相比数目明显增多,且体积更大。Western blot检测表明C8166T细胞内的HIV-1核衣壳蛋白P24水平增强;ELISA检测显示该细胞培养上清中的HIV-1P24的含量与对照组相比有明显升高（F=9.503,P〈0.05）,提示青蒿琥酯处理可增强病毒的表达或释放。在用青蒿琥酯处理静止期人外周血单核细胞（PBMCs）后,ELISA检测细胞培养上清中的P24含量显示,0.078μg/ml青蒿琥酯组的P24含量较对照组明显增加（t=-14.354,P〈0.01）,HIV-1潜伏感染明显增加。Real-time PCR结果表明,在C8166T细胞系中,0.078μg/ml青蒿琥酯组的病毒RNA明显多于对照组（t=115.086,P〈0.01）,证实青蒿琥酯能提高细胞内HIV-1基因转录水平。结论青蒿琥酯可提高C8166T细胞和人PBMC中HIV-1基因的转录,具有潜在的促进HIV感染的作用。
- 田湉敖竹君王小霞姚小剑
- 关键词：HIV-1中草药青蒿琥酯
- 灭活微生物传染性的安全套及其制备方法
- 本发明公开了一种灭活微生物传染性的安全套及其制备方法；是在聚氨酯安全套(PUC)内外表面包被有纳米银粒子。数据提示纳米银粒子通过与氮原子的相互作用而稳定地附着于PUC表面。而且HeLa细胞接触纳米银包被PUC 3小时内没...
- 姚小剑肖献忠穆罕默德·法亚兹敖竹君陈利玉
- 文献传递
- HIV-1整合酶与宿主动力蛋白中间链1蛋白间相互作用的研究（英文）
- 2018年
- 目的研究在1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)的复制过程中,HIV-1整合酶(HIV-1 IN)与细胞质动力蛋白复合体中的动力蛋白中间链1蛋白(DIC1)之间的相互作用。方法本实验主要采用转染,免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP),免疫荧光(Immunofluorescence)和蛋白质印记法(Western Blot)对HIV-1 IN和DIC1进行检测。结果通过免疫共沉淀法显示HIV-1 IN与DIC1的相互作用,以及HIV-1 IN C末端的重要作用。通过免疫荧光法,证实DIC1和IN是在细胞质中相结合的,而非在细胞核中结合。结论 HIV-1进入细胞后可以立即与动力蛋白复合体相结合,从而促进病毒向细胞核移动以及病毒DNA整合。
- 王丽君陈碧荷敖竹君陈伟姚小剑
- 关键词：HIV-1动力蛋白
- 降钙素基因相关肽和受体活性修饰蛋白1对血管平滑肌细胞迁移的影响及机制被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨转染降钙素基因相关肽（CGRP）的骨髓间充质干细胞（MSC）对血管平滑肌细胞（VSMC）迁移的影响,及活性修饰蛋白1（RAMP1）在其中的作用和机制.方法 分离、培养大鼠MSC和VSMC,分别应用携带CGRP和RAMP1的慢病毒载体转染MSC和VSMC,然后将MSC与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的VSMC共培养.实验分为5组：（1） AngⅡ对照组（MSC＋ VSMC＋ AngⅡ）;（2） MSCCGRP＋组（MSCCGRP＋＋ VSMC＋ AngⅡ）;（3）MSCCGRP＋ RAMP1 组（MSCCGRP＋＋ VSMCRAMP1-＋AngⅡ）;（4） MSCCGRP＋ RAMP1＋组：（MSCCGRP＋＋ VSMCRAMP1＋＋ AngⅡ）;（5） RAMP1＋ （MSC＋VSMCRAMP1＋＋ AngⅡ）.应用Transwell实验评价VSMC的迁移能力,Western blot检测蛋白的表达水平.结果 Transwell实验结果显示,MSCCGRP＋组VSMC迁移数量[（50.8±2.6）个]少于AngⅡ对照组[（71.4±2.3）个],而多于MSCCGRP＋ RAMP1＋组[（30.4±3.0）个]（P均＜0.05）;MSCCGRP＋ RAMP1-组VSMC迁移数量[（69.0±5.6）个]多于MSCCGRP＋ RAMP1＋组（P＜0.05）,而与AngⅡ对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;RAMP1＋组VSMC迁移数量[（71.6±3.4）个]与AngⅡ对照组差异也无统计学意义（P＞0.05）.Western blot结果显示,MSCCGRP＋组磷酸化核因子-κB P65（P-P65）蛋白表达水平低于AngⅡ对照组（0.475±0.022比0.642±0.035,P＜0.05）;MSCCGRP＋ RAMP1-组P-P65蛋白表达水平高于MSCCGRP＋ RAMP1＋组（0.670±0.030比0.373 ±0.041,P＜0.05）,而与AngⅡ对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;RAMP1＋组P-P65蛋白表达量（0.643 ±0.039）与AngⅡ对照组比较差异也无统计学意义（P＞0.05）.结论 RAMP1对CGRP抑制VSMC迁移起促进作用,RAMP1-CGRP通过核因子-κB信号通路抑制VSMC迁移.
- 龙仙萍崔璨陈攀科汪松王冬梅许官学姚小剑石蓓
- 关键词：降钙素基因相关肽肌细胞平滑肌干细胞
