王超
- 作品数：12 被引量：19H指数：3
- 供职机构：泰安出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 基于博弈视角 构建HACCP认证采信模型
- 2018年
- 一、备案监管：充分发挥声誉机制（一）博弈博弈论（Game Theory）英文原文是＂游戏理论＂。公认的博弈论学科创建是始于冯诺依曼和摩根斯坦的著作《博弈论与经济行为》。博弈的要素有三个：参与人（player）、策略（strategy）、收益（gain）或支付（payment）,有关这些要素的知识被称为信息,而共同的知识是指被所有参与人掌握的信息。
- 高瑞刚王雪红王超
- 关键词：HACCP认证博弈论游戏理论经济行为
- 鸭坦布苏病毒E基因主要抗原域的原核表达及单克隆抗体的制备被引量：1
- 2016年
- 为制备鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因主要抗原域的单克隆抗体(MAb),本研究经DNAStar软件分析预测E蛋白含有的优势抗原表位区,以DTMUV QD株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增涵盖编码主要优势表位的E基因片段(943 bp^1 287 bp),并将其克隆至表达载体p ET-28a中,转化于大肠杆菌中进行诱导表达。对表达的重组蛋白进行western blot鉴定,将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与SP2/0细胞融合,经筛选和鉴定,获得了两株能够稳定分泌抗E蛋白的杂交瘤细胞株,命名为4G8和6B12,其亚型均为Ig G1型,并且识别于不同的抗原位点。经间接免疫荧光检测,MAb 4G8和6B12均能够与DTMUV发生特异性反应。本研究所制备的MAb为进一步鉴定DTMUV以及分析囊膜糖蛋白E的结构和功能奠定了基础。
- 孙涛王超徐彪王宏华邓明俊郑小龙岳志芹
- 关键词：原核表达单克隆抗体
- 鸭坦布苏病毒E基因的分子特性分析
- 2015年
- 为给鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)囊膜糖蛋白选择良好的抗原域和宿主表达系统提供参考依据,本研究通过选取DTMUV QD株基因文库中的一个重组质粒并测序,结合NCBI的ORF Finder和BLAST工具发现一个全长为1488 bp完整开放阅读框架(Open Reading Frame,ORF)片段。将该ORF编码蛋白通过NCBI的BLASTP分析和DNAstar进化树分析,确定该蛋白与类黄病毒E基因编码的蛋白具有较高的相似性。随后应用生物信息学分析工具Conserved Domains确定保守结构域、运用Signal P4.1预测信号肽、TMHMM 2.0预测跨膜区。应用在线程序Net NGlyc1.0预测糖基化位点,Net Phos2.0预测磷酸化位点、Prot Scale进行疏水性分析。最后运用在线EMBOSS和自动蛋白同源建模数据库进行3D结构预测以及密码子偏爱性分析。结果表明,E蛋白与其它黄病毒衣壳蛋白具有相似的功能,没有信号肽切割位点,在451-468和475-492aa区域含有跨膜区,为相对低表达基因,含有较多种类的稀有密码子,与人密码子使用频率较为接近。这为进一步研究DTMUV E基因的体外表达和宿主选择提供了分子生物学依据。
- 孙涛王超邓明俊王群郑小龙徐彪
- 基于宏基因组学的鸭坦布苏病毒非诊断性检测方法
- 本发明公开了一种基于宏基因组学的鸭坦布苏病毒非诊断性检测方法，包括下列步骤：（1）样品处理；（2）DNA和RNA的提取；（3）RNA样品的反转录等温链位移扩增；（4）核酸文库的制备；（5）Ion？Torrent测序；（6...
- 孙涛邓明俊王超房保海徐彪
- 文献传递
- 基于宏基因组学的鸭源样本中坦布苏病毒检测方法的建立
- 2016年
- 利用二代高通量测序技术建立检测鸭源样品中坦布苏病毒的方法。首先将样品过滤和经核酸酶处理,再利用等温链位移扩增(SPIA)技术快速制备样品总cDNA,最后经磁珠纯化和文库构建后,通过Ion Torrent进行高通量测序获得基因组信息。结果显示,通过SPIA扩增和核酸文库制备的优化,可从微量病原样本中获得327pmol/μL的核酸文库样本。Ion Torrent测序共获得1 725 436条reads,约6.2M数据,平均109bp。数据拼接并Blast发现,病原样品的核酸序列可注释鸭坦布苏病毒全部基因组数据,与首次发生在我国的鸭坦布苏病毒BYD-1株参考序列的同源性为100%。将所测病毒序列与其他5种黄病毒科成员进行同源性比对,发现与近3年发生在我国的鸭坦布苏病毒同源性最高,在98%以上。且NS基因进化树分析与鸭坦布苏病毒处于同一分支上,符合鸭坦布苏病毒特征。本研究建立的基于未知病原SPIA扩增结合高通量测序检测方法,可同步获知坦布苏病毒基因的核酸信息。
- 孙涛王超邓明俊郑小龙王群徐彪
- 关键词：宏基因组学
- 鸭坦布苏病毒E蛋白第三结构域原核表达的方法及其应用
- 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒E蛋白第三结构域原核表达的方法，包括下列步骤：（1）特异性引物的设计与合成；（2）鸭坦布苏病毒E蛋白第三结构域的克隆测序；（3）鸭坦布苏病毒E蛋白第三结构域的克隆表达；（4）第三结构域重组质粒...
- 孙涛邓明俊王超房保海徐彪
- 文献传递
- 黄芪多糖和甲砜霉素影响ALV-J对SPF鸡致病性的分析被引量：2
- 2015年
- 为验证育雏早期应用黄芪多糖及甲砜霉素对ALV-J先天性感染雏鸡发病作用的影响,通过5日龄SPF鸡胚卵黄囊接种1 000TCID50ALV-J,鸡胚出壳后随机分为3组,两试验组分别定期口服黄芪多糖和甲砜霉素,一组作为病毒感染对照。对试验雏鸡泄殖腔排毒规律、病毒血症、疫苗免疫水平、免疫器官指数、体重、肿瘤发生率、肿瘤类型等进行动态测定,评估黄芪多糖和甲砜霉素对雏鸡先天感染ALV-J发病作用的影响。结果表明,两种药物对ALV-J病毒血症、ALV-J抗体及疫苗免疫抗体的产生无显著影响。黄芪多糖组与病毒感染对照组体重差异不显著;甲砜霉素组早期体重明显高于其他两组,但后期体重却明显低于另外两组。甲砜霉素组育雏早期血液中白细胞和淋巴细胞的水平显著低于另外两组,60日龄后脾和法氏囊的免疫器官指数显著降低,与另外两组差异显著。肿瘤发生率以甲砜霉素组最高,达28.57%(10/35),其次是病毒感染对照组,为20%(7/35),黄芪多糖组最低,仅为11.43%(4/35)。另外,甲砜霉素组肿瘤类型多,出现血管瘤、髓样细胞瘤、淋巴肉瘤、纤维肉瘤和腺癌,并且肿瘤进展快,病变重。育雏早期应用甲砜霉素会导致雏鸡免疫抑制,促进ALV-J的致瘤作用,患病鸡肿瘤呈多样化特征。黄芪多糖对ALV-J的致病性有一定的抑制作用,但未发现对病毒血症的影响。两种药物对ALV-J的致病作用的影响机制有待于进一步研究探讨。
- 王广文吕林王超张振东程子龙屈亚锦刘思当
- 关键词：黄芪多糖甲砜霉素药物预防ALV-J
- 山羊痘病例的病理学诊断及病毒鉴定被引量：3
- 2015年
- 菏泽市某养羊场从散户购买青山羊50余只,购进后1周左右陆续发病,发病羊体温41～42℃,2周内死亡率超过60%,部分羊体表有痘疹样病变,疑似羊痘。对该病例进行了现场调查、尸体剖检、病理组织学检查及病毒分离鉴定。结果显示：病羊眼睑、口、鼻部有痘疹结节,皮肤有大量红色丘疹。剖检病死羊可见肺、胃肠黏膜、肾及肝表面有数量不等的灰白色丘疹。皮肤及黏膜痘疹部的上皮细胞增生、水泡变性,并见胞浆红染包涵体;肺、肝、肾丘疹完全符合痘疹的病变特征,通过Macehiavello包涵体染色在皮肤、黏膜增生的上皮细胞及肝、肾痘细胞的胞浆内有紫红染包涵体。将获得p32基因序列与GenBank上登录的相应序列进行同源性分析表明该分离株与山羊痘病毒分离株的同源性为99.4%～99.8%,但与绵羊痘病毒的同源性偏低（97.2%～98.1%）。系统进化树分析表明该分离株与山羊痘病毒处于同一分支。将纯化后的p32基因扩增产物用Hinf I酶切位点分析表明,该病毒仅在688bp处存在1个酶切位点,酶切后产生2条目的片段（688和311bp）。对p32基因序列进一步分析表明,在169～171位点上存在3个碱基（GAT）的插入,而山羊痘病毒和其他痘病毒在该位点上有3个碱基缺失,证明此次疫情是由山羊痘病毒引起的。据病理学及病原学诊断结果判定该病例为山羊痘重症感染。按《中华人民共和国动物防疫法》规定,扑杀并无害化处理发病羊群,羊舍、场地、用具严格消毒,粪便堆积发酵处理,受威胁区的羊群实施疫苗紧急接种羊痘疫苗,疫情未发生进一步扩散。
- 王广文程子龙王超吕林胡东方张振东屈亚锦刘思当
- 关键词：山羊痘P32基因病理学诊断
- 利用表面离子共振系统检测三种禽流感病毒亚型的研究
- 2014年
- 目的利用表面离子共振系统建立检测H5、H7、H9三种亚型禽流感病毒的方法。方法取原核表达的H5、H7、H9亚型的血凝素HA蛋白偶联于CM5芯片上,利用HBS缓冲液梯度稀释病毒参考抗原并分别与固定浓度的三种亚型的禽流感抗血清进行反应,采用竞争法制备标准曲线并用以计算样品的浓度和确立检测灵敏度低限。对不同亚型之间及五种其他常见禽类病毒抗体进行特异性检测试验。结果建立的表面离子共振方法在检测各亚型时相互之间无交叉反应,未检测到其他禽源病毒的阳性响应信号,HA重组蛋白的检测极限可达0.5μg/m L。结论研究表明该方法可用于同步鉴别主要流行的禽流感病毒亚型。
- 孙涛王超徐彪魏波王宏华岳志芹
- 关键词：禽流感病毒
- 次氯酸钠、酒精及穿串用竹签对鸡肉产品中呋喃西林代谢物检测结果的影响研究被引量：4
- 2011年
- 本研究对从屠宰到加工过程中与鸡肉产品密切接触的次氯酸钠、酒精及穿串用竹签进行相关试验。结果表明,次氯酸钠消毒剂的使用会使次氯酸钠消毒剂残留在肉鸡皮肤中,从而对呋喃西林代谢物的检测造成干扰;经过后池的冲洗之后,对呋喃西林代谢物检测的干扰大大降低。加工过程中使用的酒精和竹签,不是检出呋喃西林代谢物的干扰因素。
- 袁涛田国华吴伟宋殿亮张太翔王超宫小明管恩平
- 关键词：次氯酸钠酒精竹签呋喃西林
