周昱 作品数:12 被引量:110 H指数:5 供职机构: 中国医科大学药学院 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 国家重大科学仪器设备开发专项 辽宁省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 农业科学 更多>>
SULT1A3与芹菜素的磺酸化结合反应的动力学特征研究 2015年 目的:研究人重组酶SULT1A3与芹菜素的磺酸化结合反应的动力学特征。方法采用高效液相色谱法,测定芹菜素的消除量及其磺酸化结合反应代谢产物的生成量,并应用LC-MS/MS液质联用技术鉴定其结构。建立芹菜素与重组酶SULT1 A3体外反应体系,测定SULT1A3催化不同浓度芹菜素的磺酸化结合反应代谢速率,采用GraphPad Prism 5软件对其进行酶动力学分析。结果芹菜素在0.15625~30μM范围内线性关系良好,平均回收率大于80%,日内和日间的RSD均小于15%。芹菜素与SULT1A3孵育体系中的代谢产物为单磺酸化结合产物。芹菜素与人重组酶SULT1A3的反应呈底物抑制动力学特征。芹菜素与SULT1A3酶反应的动力学参数Km和Ksi分别为(0.355±1.04)、(23.62±0.06)μM,Vmax为(65.71±1.30) nmol/(min· mg),Vmax/Km为185.10 mL/(min· mg)。结论人重组酶SULT1A3可介导芹菜素的磺酸化结合反应,且其酶动力学特征呈现底物抑制效应。推测由SULT1A3介导的磺酸化结合反应可能在芹菜素的体内II相代谢中发挥重要的作用。 蒋昆谕 吕晓玥 周昱 周一平 马颖林 孟胜男关键词:芹菜素 动力学特征 食品中氨基糖苷类残留前处理及分析方法研究进展 被引量:8 2016年 氨基糖苷类兽药残留是目前重要的动物源性食品安全问题之一,检测食品中氨基糖苷类残留对人体健康具有重要的意义。检测食物基质中痕量兽药残留依赖于有效的前处理方法和精密的分析仪器。阐述了氨基糖苷类兽药的研究背景和现状,并对国内外食品中氨基糖苷类兽药残留的液-液萃取、固相萃取等前处理方法及液相色谱质谱法、液相色谱法、毛细管电泳分析方法及免疫分析测定法等检测方法进行了综述,拟为动物源性食品中氨基糖苷类药物的残留监控提供参考。综述指出SPE为最有前景的前处理方法,而质谱技术的发展和仪器的小型化为检测仪器的发展趋势。 张元 周昱 周伟娥 李绍辉 郑阳 张峰关键词:动物源性食品 前处理技术 氨基糖苷类 食品中磺胺类药物前处理及检测方法研究进展 被引量:38 2015年 磺胺类兽药残留是目前重要的动物源性食品安全问题,检测食品中磺胺类兽药残留对人体健康具有重要的意义。检测食品基质中痕量兽药残留依赖于有效的前处理方法和精密的分析仪器。本文论述磺胺类兽药分析检测的研究背景和现状,并对国内外食品中磺胺类兽药残留的传统提取技术和新型提取技术等前处理方法及检测方法进行综述,为食品中磺胺类药物的残留监控提供参考。 张元 李伟青 周伟娥 任志芹 张峰 冯雪松 周昱 李绍辉 郑阳关键词:食品 前处理技术 miR-373通过靶向调控SULT1A3表达影响芹菜素磺酸化代谢反应特性 2016年 目的:探讨微小RNA-373(microRNA-373,miR-373)通过调控SULT1A3的表达对芹菜素磺酸化代谢反应速率的影响。方法:通过在人结肠腺癌细胞Caco-2 TC7中转染miR-373 mimic构建miR-373高表达细胞模型;应用qRT-PCR方法检测miR-373高表达后细胞中SULT1A3 mRNA的表达水平;建立细胞裂解液与芹菜素反应体系,应用HPLC法测定各转染组中不同浓度(2.5,10和30μmol·L-1)芹菜素的代谢速率,并结合LC-MS/MS鉴定芹菜素及其代谢产物结构。结果:在miR-373高表达的Caco-2 TC7细胞中,SULT1A3的mRNA表达受到抑制;与阴性转染组(mimic negative control组,mimic NC组)相比,miR-373转染组(miR-373 mimic组)中不同浓度芹菜素的代谢速率下降(P<0.05);LC-MS/MS显示芹菜素代谢产物为单磺酸化结合产物。结论:miR-373通过靶向抑制SULT1A3,降低芹菜素的磺酸化代谢反应速率。 周昱 周一平 张元 马颖林 孟胜男关键词:芹菜素 MIRNA 白杨素在雌雄小鼠肝肠S9中磺酸化结合反应的性别差异 2016年 目的:研究性别差异对FVB小鼠肝肠S9介导的白杨素磺酸化结合反应的影响。方法:分别建立雌雄小鼠与白杨素肝肠S9的体外孵育体系,通过超高效液相色谱法(UPLC)与LC-MS/MS液质联用技术测定其代谢产物。采用Graph Pad Prism 5软件对检测结果进行处理与分析。结果:肝肠中代谢产物均为单磺酸化结合产物且均呈底物抑制的动力学特征,反应速率均存在显著的性别差异(P<0.05)。肝中雌鼠的代谢速率整体趋势高于雄鼠,而小肠中雌鼠的代谢速率明显低于雄鼠。结论:性别差异对白杨素的肝肠代谢动力学有显著性影响,这也许与雌雄小鼠代谢酶mRNA的表达有关。 周一平 周昱 马颖林 蒋昆谕 孟胜男关键词:白杨素 性别差异 肝脏 小肠 姜黄素类化合物SULTs代谢指纹图谱构建方法及应用 本发明提供了姜黄素类化合物SULTs代谢指纹图谱构建方法及应用。本发明方法步骤为:选择重组SULTs,借助其体外孵育体系催化姜黄素类化合物的磺酸化结合反应。通过定量检测单位时间内结合产物的生成量或底物消除量获得其生物活性... 孟胜男 吕晓玥 蒋昆谕 张懋璠 周一平 周昱 马颖林 王欣文献传递 7,4’-二羟基黄酮在Caco-2细胞模型中的代谢及转运 被引量:3 2017年 目的研究不同转运体对7,4’-二羟基黄酮(7,4’-DHF)及其代谢产物(7,4’-DHF-S)在Caco-2细胞模型中转运的影响。方法采用超高效液相色谱法测定Caco-2细胞孵育液中7,4’-DHF及7,4’-DHF-S的含量,采用液相色谱-质谱串联(LC-MS/MS)鉴定其结构。采用Caco-2细胞模型双向转运实验分别考察乳腺癌耐药蛋白(BCRP)抑制剂ko143和多药耐药相关蛋白2(MRP2)抑制剂MK571对7,4’-DHF及7,4’-DHF-S表观渗透率(PDR)的影响。结果7,4’-DHF可被Caco-2细胞代谢产生单磺酸化结合产物;7,4’-DHF的PDR为(1.43±0.11),ko143和MK571对7,4’-DHF的PDR分别为(1.59±0.04),(1.48±0.07),差异无统计学意义(P>0.05);7,4’-DHF-S的PDR为(1.60±0.06),ko143可显著降低7,4’-DHF-S的PDR(0.23±0.03)(P<0.01),MK571对7,4’-DHF-S的PDR无显著影响,为(1.51±0.04)(P>0.05)。结论 Caco-2细胞可介导7,4’-DHF的磺酸化代谢反应,7,4’-DHF-S可能是BCRP的底物。 马颖林 周一平 周昱 蒋昆谕 孟胜男关键词:多药耐药相关蛋白2 乳腺癌耐药蛋白 白杨素在人小肠S9中磺酸化结合反应的代谢特性 2015年 目的研究白杨素分别与人重组酶SULT1A3和人小肠S9(human small intestine S9,HSI S9)孵育体系磺酸化结合反应的代谢特性。方法采用高效液相色谱法,测定白杨素及其代谢产物,并应用LC-MS/MS液质联用技术鉴定其结构。分别建立白杨素与重组酶SULT1A3及与人小肠S9的反应体系,测定不同浓度的白杨素在不同酶反应中的代谢速率。结果白杨素与SULT1A3及人小肠S9孵育体系反应的代谢产物均为单磺酸化结合产物。白杨素与重组酶SULT1A3及人小肠S9的酶反应均呈双相动力学特征。白杨素与SULT1A3酶反应的动力学参数Km为(3.06±1.04)、(0.41±0.06)μM,Vmax为(12.13±1.30)、(6.72±1.61)nmol/(min·mg),Vmax/Km为3.96、16.39 mL/(min·mg)。白杨素与人小肠S9的酶反应的动力学参数Km为(1.92±0.35)、(0.01±0.00)μM,Vmax为(0.52±0.02)、(0.08±0.02)nmol/(min·mg),Vmax/Km为0.27、8.00 mL/(min·mg)。重组酶SULT1A3和人小肠S9分别介导的白杨素磺酸化结合反应的代谢呈现显著的相关性(R2=0.985)。结论 SULT1A3在白杨素的肠道代谢中发挥主导作用,小肠可能是白杨素的主要代谢器官。 蒋昆谕 周一平 马颖林 周昱 张懋璠 孟胜男关键词:白杨素 动物源性食品中喹诺酮类残留前处理及分析方法的研究进展 被引量:27 2016年 喹诺酮类兽药残留是目前重要的动物源性食品安全问题之一,检测食物基质中痕量兽药残留依赖于有效的前处理方法和精密的分析仪器。本文阐述了喹诺酮类兽药的研究背景和现状,并对国内外食品中喹诺酮类兽药残留的液液萃取(Liquid-Liquid Extraction,LLE)、固相萃取(Solid-Phase Extraction,SPE)、基质辅助固相分散萃取(Matrix Solid-Phase Dispersion,MSPD)、Qu ECHERs(Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged,Safe,Qu ECHERs)、超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction,SFE)和免疫亲和色谱(Immunoaffinity Chromatography,IAC)等前处理方法及液相色谱质谱法、液相色谱法、毛细管电泳分析方法及免疫分析测定法等检测方法进行了综述,拟为动物源性食品中喹诺酮类药物的残留监控提供理论参考,综述指出SPE和Qu ECHERs为最有前景的前处理方法,而质谱技术的发展和仪器的小型化为检测仪器的发展趋势。 张元 周伟娥 李绍辉 郑阳 周昱 张峰 冯雪松关键词:动物源性食品 前处理技术 食品中四环素类药物残留检测前处理及分析方法研究进展 被引量:17 2016年 四环素类兽药残留是目前重要的动物源性食品安全问题,检测食品中四环素类残留对人体健康具有重要的意义。检测食物基质中痕量兽药残留依赖于有效的前处理方法和精密的分析仪器。本文阐述了四环素类兽药的研究背景和现状,并对国内外食品中四环素类兽药残留的传统提取技术和新型提取技术等前处理方法及检测方法进行了综述,为动物源性食品中四环素类药物的残留监控提供参考。 张元 张峰 周昱 周伟娥 李绍辉 郑阳 李伟青 冯雪松 袁明美关键词:动物源性食品安全 四环素类抗生素 兽药残留监控 前处理技术