朱曼玲
- 作品数：43 被引量：25H指数：3
- 供职机构：山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 鸡三种天然免疫相关受体和配体荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：3
- 2016年
- 为建立检测鸡天然免疫相关受体(Ch-MDA5、Ch-TLR3和Ch-TLR7)及其相应配体(MAVS、TRIF和MyD88)的荧光定量PCR方法并评价其应用效果,设计和筛选特异性PCR引物,制备各基因的质粒标准品,绘制荧光定量PCR的标准曲线,并对方法的灵敏度、重复性和特异性进行检验。结果表明,所建立的检测方法敏感度高、特异性强、检测线性范围广、重复性好。应用建立的方法检测新城疫油乳剂灭活苗免疫SPF鸡后上述基因表达的变化,发现免疫后6h各基因的表达水平达到峰值,表明疫苗免疫迅速有效地激活了机体的天然免疫应答。建立了与鸡抗病毒感染天然免疫相关的3种细胞受体和相应配体的定量检测方法,可应用于病毒致病机制、鸡用新型疫苗、免疫增强剂以及抗病毒药物的研究与开发。
- 黄艳艳高丹丹许传田朱曼玲杨少华黄庆华张琳张秀美吴家强
- 关键词：天然免疫实时荧光定量PCR
- 鸡朊蛋白调节DF-1细胞活性的初步研究
- 【目的】本研究利用鸡朊蛋白过表达DF-1细胞系，与正常DF-1细胞在增殖、粘附、侵袭和凋亡方面的比较，初步探究禽朊蛋白对DF-1细胞的影响;通过检测朊蛋白过表达DF-1细胞与正常DF-1细胞增殖相关蛋白Akt的表达量，并...
- 朱曼玲
- 关键词：AKT基因
- 文献传递
- PI3K/Akt抑制剂对鸡朊蛋白过表达DF-1细胞增殖、侵袭和凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 为探讨PI3K/Akt信号通路在鸡细胞型朊蛋白(ChPrPC)过表达的DF-1细胞(DF-1-PrP)增殖、黏附、侵袭和凋亡过程中的作用及其与ChPrPC表达量的关系,以DF-1-PrP细胞为模型,空载体转染的DF-1-NC细胞和DF-1细胞为对照,分别用0、10、20、50、100、200nmol·L-1渥曼青霉素处理以抑制PI3K/Akt信号通路,检测细胞对鼠尾胶原的黏附能力,Transwell小室法检测细胞侵袭力,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法检测PRNP基因转录量。结果显示,随着渥曼青霉素浓度的增加,DF-1-PrP、DF-1-NC和DF-1细胞的PRNP基因转录量均减少,其增殖、黏附、侵袭能力相应下降,而总凋亡率均升高;但在低于100nmol·L-1的同一渥曼青霉素浓度下,DF-1-PrP细胞增殖、黏附、侵袭能力始终高于对照组,而总凋亡率均低于对照组。本研究表明ChPrPC的过量表达可促进DF-1细胞增殖、黏附和侵袭,抑制其凋亡,在以上过程中,PI3K/Akt信号通路可能具有重要的作用,渥曼青霉素能有效阻断这一通路,但PI3K/Akt信号通路并不是ChPrPC调节细胞凋亡的唯一途径。
- 万学瑞朱曼玲杨润霞刘桂林刘磊吴润
- 关键词：PI3K/AKT渥曼青霉素凋亡
- 一种噬菌体573裂解酶LysZB48、融合蛋白及应用
- 本发明涉及一种噬菌体573裂解酶LysZB48、融合蛋白及应用。本发明以S.aureus 573为宿主菌分离到S.aureus噬菌体Sau‑p573，分析得到S.aureus噬菌体Sau‑p573裂解酶LysZB48序列...
- 张亮朱曼玲于浩淼张雪丽解晓莉杨宏军杨少华陈玖
- 马冠状病毒一步法RT-PCR检测试剂盒及其应用
- 本发明属于试剂盒领域，本发明涉及一种检测试剂盒及这种检测试剂盒在非疾病检测的使用方法，具体涉及一种马冠状病毒一步法RT‑PCR检测试剂盒及其应用。通过设计引物采用RT‑PCR的方法，得到了一种特异、敏感、快速、使用方便、...
- 齐鹏飞张伟杨少华杨宏军朱曼玲张亮唐月新解晓莉高星熠张诗悦
- 文献传递
- 一种新的牛支原体膜蛋白p59的表达与鉴定被引量：5
- 2019年
- 目的寻找新的牛支原体(Mycoplasma bovis)抗原蛋白并进行原核表达,为牛支原体疫苗的制备奠定基础。方法采用生物信息学方法分析牛支原体PG45株基因组,发现一种新的膜蛋白p59,并对其理化性质、蛋白定位、是否存在信号肽及其互作蛋白进行分析预测。通过PCR扩增p59蛋白编码基因,经酶切连接表达载体pET-30a(+)后转化入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达并进行优化,利用不同浓度咪唑洗脱液来洗脱蛋白。通过Western blot进行鉴定。制备p59重组蛋白兔多抗,通过粘附试验和支原体生长抑制试验验证该重组蛋白的功能。结果生物信息学分析该蛋白可能为ABC转运系统的组成蛋白,其互作蛋白为糖、微量元素摄取的ABC转运系统相关蛋白,可能参与牛支原体摄入营养物质的过程。PCR扩增p59基因,双酶切及测序鉴定pET-30a(+)-p59原核表达载体构建正确,SDS-PAGE分析重组载体转化BL21表达p59重组蛋白,相对分子质量为66×10^3。Western blot鉴定该蛋白为膜蛋白,免疫新西兰兔可刺激产生特异性抗体,即具有抗原性。p59蛋白粘附MDBK细胞试验显示,用p59兔多抗作为一抗时的MDBK(Madin-Darby bovinekidney,牛肾细胞)细胞表面能够粘附更多的P59蛋白,表明p59重组蛋白具有一定的粘附能力。生长抑制试验表明,p59兔多抗能抑制牛支原体在固体培养基中的生长,生长抑制率为45.53%。结论新鉴定的牛支原体膜蛋白p59可能是一种粘附相关蛋白,且具有抗原性,该蛋白多抗血清能抑制支原体的生长,为研究支原体膜蛋白的功能奠定了基础,为牛支原体亚单位疫苗的研制提供了新的靶蛋白。
- 蒋仁新王基隆朱曼玲程凯慧解晓莉杨宏军丁家波刘磊张亮
- 关键词：牛支原体生物信息学分析
- 一株牛支原体强毒株及其应用
- 本发明提供牛支原体强毒株及其应用，属于微生物技术领域。本发明牛支原体强毒株，分类命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)16M株，中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Cultur...
- 张亮杨宏军王基隆朱曼玲程凯慧解晓莉张云飞刘来兴
- 文献传递
- 一种牛支原体的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法
- 本发明具体涉及一种牛支原体的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。牛支原体是一种严重威胁牛养殖业的病原体，目前尚没有有效的治疗药物及疫苗，提供高效精确的检测方法对于牛支原体的防治具有重要意义。本发明研究表明P5...
- 张亮杨宏军朱曼玲杨美楚会萌张云飞
- 皂苷在制备抗牛支原体产品中的应用
- 本发明涉及皂苷在制备抗牛支原体产品中的应用。牛支原体能够引发牛肺炎、关节炎及牛乳腺炎等多种疾病，本领域可用于防治牛支原体疾病的药物十分有限，且晚期治疗效果并不理想，主要通过加强饲养管理的方式进行防控。本发明提供了薯蓣皂苷...
- 张亮朱曼玲杨宏军陈九张云飞
- 驴乳溶菌酶原核表达及活性检测
- 2020年
- 为探究驴乳源溶菌酶特性,本研究人工合成了驴乳溶菌酶基因DKLYSC1,并连入原核表达载体pET32a(+)中经诱导、表达,通过SDS-PAGE、western blot及比浊法检测重组溶菌酶表达及活性。结果显示,重组溶菌酶主要以包涵体形式高效表达,分子质量约31 ku;纯化的重组蛋白可以与抗His标签抗体特异性结合,特异性较强;比浊法测定复性蛋白比酶活为124.74 U/mg。本研究在大肠杆菌中表达了驴乳溶菌酶,并获得具有活性的复性蛋白,为驴乳溶菌酶的基础研究和应用奠定了基础。
- 张伟罗时华王长法岳寿松岳寿松朱曼玲朱曼玲
- 关键词：原核表达酶活
