曹青
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛结核病PPD_B-P_(E-C)-IFN-γ诊断方法的建立
- 2014年
- 对结核分枝杆菌复合群致病菌株的特异性抗原ESAT-6(PE)和CFP-10(PC)分别进行原核表达并纯化。用PPDB、PE、PC和PE-C(PE、PC等量混合)作为4种刺激抗原(以PPDB作为参照),分别体外平行刺激56份已知的牛结核病阳性牛全血和460份阴性牛全血,孵育、收获血浆,采用间接ELISA检测产生的IFN-γ水平。经统计学分析,绘制ROC曲线,分别确定PPDB-IFN-γ、PE-IFN-γ、PC-IFN-γ和PE-C-IFN-γ的阳性判定最佳临界点及其敏感性和特异性;并据此进一步分析PPDB分别与PE、PC或PE-C联用(PPDB-PEIFN-γ、PPDB-PC-IFN-γ、PPDB-PE-C-IFN-γ,串联和并联)的敏感性和特异性。结果显示,PE、PC的分子质量分别为27.8ku和16.4ku;PPDB-IFN-γ的最佳临界点为0.02,其敏感性和特异性分别为94.6%和92.2%,PE、PC、PE-C的最佳临界点相同,均为0.01,其中PE-C-IFN-γ的敏感性和特异性最高,分别为92.9%和95.7%;联用时,PPDB-PE-C-IFN-γ的敏感性和特异性最高,其串联时敏感性和特异性分别为89.3%和96.5%,并联时分别为98.2%和91.3%。PE-C-IFN-γ的敏感性比PPDB-IFN-γ低1.7%,但特异性高3.5%;PPDB-PE-C-IFN-γ并联时,敏感性比PPDB-IFN-γ高3.6%,串联时特异性比PPDB-IFN-γ高4.3%。结果表明,本试验建立的PPDB-PE-C-IFN-γ诊断方法具有高敏感性和高特异性,具有极大的应用价值。
- 许芳曹青张喜悦田莉莉杜鹏飞呼西旦曾巧英范伟兴
- 关键词：IFN-Γ牛结核病ESAT-6CFP-10
- 前噬菌体lamdaSa04对鱼源无乳链球菌环境适应性及致病性的影响被引量：1
- 2022年
- [目的]本文旨在调查前噬菌体lamdaSa04对鱼源无乳链球菌GD201008-001环境适应性和毒力的影响。[方法]利用同源重组技术构建前噬菌体lamdaSa04基因缺失株,比较缺失株与野生株在体外生长、抗环境应激、抗巨噬细胞吞噬、胞内存活以及感染小鼠的存活率和组织细菌载量等方面的差异。[结果]lamdaSa04基因簇缺失不影响无乳链球菌GD201008-001的体外生长能力,但生物被膜形成能力下调38.57%;在10和20 mmol·L^(-1)H_(2)O_(2)的强氧化应激条件下,缺失株存活率较野生株分别下调22.86%及42.01%;小鼠巨噬细胞RAW264.7对缺失株的吞噬率比野生株上调76.12%。模拟巨噬细胞的内环境,在强氧化、一氧化氮、溶菌酶、强酸等多因素结合的应激条件下,检测菌株的存活率,结果表明lamdaSa04的存在有助于无乳链球菌在氧化应激和酸应激条件下的存活。动物试验结果显示,缺失lamdaSa04基因对小鼠致死率及组织细菌载量无明显影响。[结论]前噬菌体lamdaSa04的存在对无乳链球菌的环境适应性有显著影响,但并不影响细菌的致病性。
- 姬姝婷曹青聂蒙董雨豪刘广锦刘永杰
- 关键词：无乳链球菌前噬菌体环境适应性
- 鲫肠道乳酸菌的分离及益生特性被引量：9
- 2018年
- 为获得鱼源益生乳酸菌,本研究从健康鲫肠道内分离鉴定得到38株乳酸菌,并选择其中8株乳酸菌进行体外益生特性分析。结果显示,8株乳酸菌均能在p H=4.5和10%鲫胆汁环境中存活,对嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、无乳链球菌和副溶血弧菌均有较强的抑菌能力,但菌体表面疏水性和自凝集能力具有菌株特异性。选择5株疏水性较高(63%~89%)、自凝集能力强(37%~45%)的乳酸乳球菌进行体外黏附能力测定,结果显示,黏附能力在菌株间具有差异性(4.5%~7.9%),但均能显著降低嗜水气单胞菌NJ-35的体外黏附率,黏附抑制率达30%~35%;最后对筛选出的3株高黏附力的乳酸乳球菌进行安全性评价,发现3株菌对鲫均无致病力。鱼源乳酸菌的筛选,为鲫养殖生产中益生菌的实际应用提供了理论依据。
- 杨媛媛王楠楠曹青陆承平刘永杰
- 关键词：乳酸菌益生特性
- 鱼源无乳链球菌N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NalA的鉴定及生物学功能分析
- 2021年
- 为了探究N-乙酰氨基葡萄糖苷酶在无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)中的生物学功能,本试验通过生物信息学技术从鱼源无乳链球菌GD201008-001基因组中预测到一个可能的N-乙酰氨基葡萄糖苷酶编码基因A964;097(命名为nalA),利用同源重组技术构建该基因缺失株ΔnalA及互补株CΔnalA,并对野生株、缺失株及互补株的细菌形态、生长能力、自溶能力以及对斑马鱼的致病力进行检测。结果显示,与野生株相比,ΔnalA的细菌链增长约10倍;对数生长期的生长速率明显下降;在第24 h时,自溶能力降低69.36%;对斑马鱼的半数致死量(50%lethal dose, LD_(50))为5.87×10^(2)CFU,比野生株升高约4倍。互补株CΔnalA的各项指标均恢复至野生株水平。本研究结果为进一步探究N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NalA在无乳链球菌致病过程中的作用机制奠定基础。
- 董雨豪徐艳楠聂蒙曹青姬姝婷刘广锦刘永杰
- 关键词：无乳链球菌基因缺失生物学功能
- 南京地区某渔场嗜水气单胞菌流行菌株的鉴定及分子分型被引量：10
- 2017年
- 为确定南京地区某渔场异育银鲫出血性败血症的病原体,采集该渔场3个饲养塘口患病鱼脏器进行细菌分离培养,基于气单胞菌DNA促旋酶B亚单位(gyr B)基因序列设计引物,PCR扩增后测序进行细菌鉴定;同时,对病原菌生物学特性如溶血性、蛋白酶活性、生物被膜形成能力、运动能力以及对斑马鱼的毒力等进行分析,并进行多位点序列分型(MLST)。结果在3个饲养塘口均分离到嗜水气单胞菌,分别命名为GL-15、GL-17和GL-18;MLST分型显示三株分离菌均为ST251型;生物学特性实验表明,均有溶血性、蛋白酶活性以及运动性,生物被膜形成能力较强,OD595均超过0.5,对斑马鱼的LD50在1.4×103~3.9×103 CFU/尾,属强毒株。本研究为有效防控南京地区嗜水气单胞菌引发的出血性败血症的暴发流行提供了依据。
- 曹青张向阳庞茂达王楠楠FURQAN Awan陆承平刘永杰
- 关键词：嗜水气单胞菌生物学特性
