程洁
- 作品数：11 被引量：54H指数：5
- 供职机构：安徽医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽高校省级自然科学研究基金安徽省科技厅年度重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 缺氧预处理诱导大鼠心肌细胞差异表达microRNA的芯片筛选与生物信息学分析被引量：4
- 2015年
- 目的筛选缺氧预处理(hypoxia preconditioning,HPC)诱导成年大鼠心肌细胞差异表达的microRNA(miRNA),并预测分析miRNA调控的靶基因与功能。方法体外分离培养成年大鼠心室肌细胞,分为对照组(CON)和缺氧预处理组(HPC),CON组细胞正常培养,HPC组细胞经历10 min缺氧和30 min再给氧,提取心肌细胞总RNA,行miRNA芯片筛选,qRT-PCR验证芯片结果。利用软件预测差异表达miRNA调控的靶基因,分析靶基因富集的基因功能(gene ontology,GO)和信号通路(pathway)。结果与CON组相比,HPC可诱导大鼠心肌细胞miRNA表达谱发生明显改变,共有12个miRNA上调,14个miRNA下调(P<0.01,FDR<0.05);选择其中荧光信号值>500的7个miRNA,用于生物信息学分析。qRT-PCR检测miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216水平,变化趋势与芯片结果一致。生物信息学分析显示差异表达miRNA所调控的靶基因功能明显富集于27个GO和6条信号通路。结论 HPC可诱导成年大鼠心肌细胞miRNA表达谱明显改变,这些差异表达miRNA可能通过调控靶基因参与HPC介导的心肌细胞保护作用。
- 何淑芳朱海娟程洁许士进杨婉张野
- 关键词：心肌细胞成年大鼠缺氧预处理MICRORNA
- MicroRNA-133b-5p通过靶向调控Fas基因影响H9c2心肌细胞凋亡被引量：6
- 2016年
- 目的研究microRNA(miR)-133b-5p在H9c2心肌细胞凋亡中发挥的作用及其靶向调控Fas基因的机制。方法取对数生长期大鼠H9c2胚胎心肌细胞,分为空白对照组、miR-133b-5p抑制剂组、抑制剂阴性对照组。分别转染48 h后收集细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-133b-5p表达,微板法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,Annexin V-FITC联合PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶报告基因系统验证miR-133b-5p与Fas mRNA的3'UTR区的靶向结合。最后运用qRT-PCR和Westernblot分别检测各组Fas mRNA与Fas蛋白表达水平。结果miR-133b-5p抑制剂组细胞内miR-133b-5p表达水平下调至空白对照组的33%(P<0.05);LDH活性升高,细胞凋亡率增加,均明显高于空白对照组与抑制剂阴性对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因证明Fas是miR-133b-5p的一个靶基因;miR-133b-5p inhibitor显著上调Fas mRNA和Fas蛋白水平(P<0.05)。结论利用化学合成miR-133b-5p inhibitor抑制大鼠H9c2心肌细胞中miR-133b-5p表达,可诱导心肌细胞损伤和凋亡,其机制可能与调控靶基因Fas表达有关。
- 程洁何淑芳韩正怡朱海娟张野
- 关键词：心肌细胞微小RNAS凋亡FAS
- 吗啡预处理对H9c2心肌细胞缺氧/复氧时microRNA表达的影响被引量：10
- 2015年
- 目的探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)时microRNA(miRNA)表达的影响,为明确其机制提供参考。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为3组(n=4):1正常对照组(CON):H9c2心肌细胞置于DMEM/F12细胞培养液常规培养;2缺氧/复氧组(H/R):对心肌细胞行缺氧5h/复氧1h处理;3吗啡预处理组(MPC+H/R):在H/R前,应用1μmol·L^(-1)吗啡预处理10 min。处理结束后,采用CCK-8法检测细胞增殖、化学比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡、Western blot法检测细胞内Fas蛋白表达、荧光定量RT-PCR法检测细胞miRNA表达水平。结果与CON组比,H/R组细胞活力降低,LDH活性升高,细胞凋亡率增加,Fas蛋白水平升高(P<0.01);MPC可明显提高细胞活力,降低LDH活性,抑制细胞凋亡,降低Fas蛋白水平(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,与CON组相比,H/R组miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let-7e-5p表达明显下调,而MPC能明显地抑制H/R对这些miRNA表达的下调作用(P<0.01)。结论吗啡预处理减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤可能与调控miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let7e-5p等miRNA表达有关。
- 韩正怡何淑芳程洁许士进杨婉张野
- 关键词：吗啡预处理H9C2心肌细胞FAS
- Fas/caspase-8/3和ERK信号通路在Fas siRNA减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用被引量：5
- 2018年
- 目的评价Fas/caspase-8/3和细胞外信号调节激酶(extracellular signaling-regulated kinase,ERK)信号通路在Fas siRNA减轻心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为4组(n=3):(1)正常对照组:H9c2细胞置于DMEM/F12细胞培养液中培养;(2)H/R组:将H9c2细胞进行5 h缺氧和1 h复氧处理;(3)Fas siRNA组(H/R+Fas-siRNA):H9c2细胞转染Fas siRNA 24 h后进行H/R损伤;(4)siRNA阴性对照组(H/R+siRNA-NC):H9c2细胞转染Fas siRNA-NC 24 h后进行H/R损伤。处理结束后,采用CCK-8法检测细胞活力;微量酶标法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性;AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;荧光定量RT-PCR法检测细胞Fas mRNA表达水平;Western blot法检测细胞内Fas、caspase-8/3、ERK和GSK-3β蛋白表达。结果与对照组相比,H/R组细胞活力降低,LDH活性和细胞凋亡增加,Fas mRNA及蛋白水平升高,cleaved caspase-8/3、p-ERK、p-GSK-3β蛋白表达升高(P<0.05);与H/R组相比,H/R+FassiRNA组细胞活力明显提高,LDH活性和细胞凋亡率降低,Fas mRNA及蛋白表达水平降低,cleaved caspase-8/3蛋白表达降低,p-ERK、p-GSK-3β蛋白表达增高(P<0.05),而H/R+siRNA-NC组上述指标差异无统计学意义。结论 Fas/caspase-8/3和ERK信号通路在Fas siRNA减轻心肌细胞H/R损伤中发挥着重要作用。
- 潘永露何淑芳韩正怡窦梦云杨婉程洁陈志武张野
- 关键词：FAS细胞外信号调节激酶心肌细胞
- 缺氧预处理诱导大鼠心肌细胞差异表达microRNA的芯片筛选与生物信息学分析
- 目的筛选缺氧预处理(hypoxia preconditioning,HPC)诱导成年大鼠心肌细胞差异表达的microRNA(miRNA),并预测分析miRNA调控的靶基因与功能。方法体外分离培养成年大鼠心室肌细胞,分为对...
- 何淑芳朱海娟程洁许士进杨婉张野
- 关键词：心肌细胞成年大鼠缺氧预处理MICRORNA
- 文献传递
- miRNA在缺血预处理保护心肌缺血／再灌注损伤中的研究进展被引量：6
- 2017年
- 背景 microRNAs（miRNAs）是一类由动物、植物和病毒基因组编码的约由22 个核苷酸组成的小分子单链RNA。近年来发现它在缺血预处理（ischemic preconditioning, IPC）中发挥着重要作用，有望成为研究治疗心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury， I/RI）的新靶点。 目的 阐述不同miRNA在IPC保护心肌I/RI中的作用及其可能机制。 内容 IPC是经典的保护心肌I/RI的方法，IPC后心肌中miRNA表达谱发生改变，其中miR-1、miR-21、miR-133b-5p、miR-199a、miR-144/451可能通过不同的基因调节机制影响IPC保护心肌I/RI。 趋向 将miRNA与靶基因、信号调节通路相结合将是未来研究miRNA调节IPC保护心肌I/RI的重要趋势。
- 程洁何淑芳韩正怡张野
- 关键词：微小RNA缺血预处理心肌
- 右美托咪定对腹腔镜全子宫切除术患者氧化应激反应的影响被引量：23
- 2015年
- 目的观察并评价右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对腹腔镜全子宫切除术患者氧化应激反应的影响。方法择期全麻行腹腔镜全子宫切除术患者40例,随机分为两组:D组(Dex组,n=20),Dex静脉泵注负荷剂量为1μg·kg-1(15 min内输注完),然后以0.5μg·kg-1·h-1持续泵注至手术结束前30 min。C组(对照组,n=20),同样方式输注生理盐水。于麻醉前(T0)、气腹结束即刻(T1)、气腹结束后30 min(T2)和术后24 h(T3)4个时间点记录平均动脉压(MAP)、心率(HR)并抽取静脉血,测定血清过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)和总抗氧化态(TAS)浓度。结果与T0相比,C组MAP在T1、T2时间点差异有显著性(P<0.05)。与T0相比,T1、T2时间点C组、D组H2O2、MDA增高,TAS降低(P<0.05)。T3时D组H2O2、MDA与T0比较差异无显著性(P>0.05),而C组仍较高(P<0.05);与C组相比,D组T2、T3时间点H2O2、MDA浓度低,TAS浓度高(P<0.05)。两组在T1时间点H2O2、MDA差异无显著性(P>0.05),但D组较C组TAS浓度高(P<0.05)。结论右美托咪定可减轻腹腔镜全子宫切除术患者氧化应激反应。
- 王勇蒋玲玲程洁张野
- 关键词：腹腔镜全子宫切除术氧化应激
- 微小RNA-133b-5p对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤和凋亡的影响
- 目的评价微小RNA-133b-5p(miR-133b-5p)对H9C2大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤和凋亡的影响。方法大鼠H9C2胚胎心肌细胞在含10%胎牛血清DMEM/F12培养基中培养、传代。细胞接种于6孔细胞培养板,采用...
- 韩正怡何淑芳朱海娟程洁许士进张野
- 关键词：微小RNA心肌细胞缺氧复氧凋亡
- 文献传递
- 吗啡预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧时miR-133b-5p与Fas表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 评价吗啡预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧时微小RNA-133b-5p（miR-133b-5p）与Fas表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠心室肌细胞,接种于24孔板或60 mm培养皿培养,采用随机数字表法分为3组（n=24）：对照组（C组）、缺氧复氧组（H/R组）和吗啡预处理组（MPC组）.C组细胞正常培养,H/R和MPC组细胞缺氧90 min后复氧,MPC组于缺氧前采用含lμmol/L吗啡的无血清DMEM培养10 min,再换为无吗啡培养液培养30 min.于复氧120 min时采用MTT法测定心肌细胞活力,检测培养液乳酸脱氢酶（LDH）活性,采用Hoechst 33234染色法检测心肌细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;实时定量PCR法检测miR-133b-5p与Fas mRNA的表达,Western blot法检测Fas蛋白的表达.结果 与C组比较,H/R组心肌细胞活力降低,培养液LDH活性和细胞凋亡率升高,miR-133b-5p表达下调,Fas mRNA及蛋白表达上调（P＜0.05）;与H/R组比较,MPC组心肌细胞活力升高,培养液LDH活性和细胞凋亡率降低,miR-133b-5p表达上调,Fas mRNA及蛋白表达下调（P＜0.05）.结论 吗啡预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的机制与上调miR-133b-5p表达,下调Fas表达有关.
- 何淑芳朱海娟程洁许士进韩正怡杨婉张野
- 关键词：吗啡细胞低氧微RNASCD95
- 微小RNA-133b-5p在缺氧复氧诱发大鼠心肌细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2015年
- 目的 探讨微小RNA-133b-Sp（miR-133b-5p）在缺氧复氧诱发大鼠心肌细胞凋亡中的作用.方法 大鼠H9c2胚胎心肌细胞在含10％胎牛血清DMEM/F12培养基中培养、传代.将细胞接种于96孔和6孔细胞培养板,采用随机数宁表法分为4组（n=64）：空白对照组（C组）正常培养24 h;缺氧复氧组（H/R）置于缺氧小室,通入95％N2-5％CO2,37℃培养箱中缺氧5h后,用含10％胎牛血清的DMEM/F12复氧1 h;miR-133b-5p模拟物＋缺氧复氧组（M＋H/R组）和阴性转染＋缺氧复氧组（NC＋H/R）分别用miR-133b-5p模拟物（终浓度为30 nmol/L）或miR-133b-5p模拟物错义链（终浓度为30 nmol/L）孵育24 h后制备缺氧复氧损伤模型.各组处理结束后,采用实时荧光定量PCR法检测miR-133b-5p的表达水平,采用CCK-8法测定细胞活力;采用微量酶标法测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 与C组比较,H/R组、M＋H/R组和NC＋H/R组心肌细胞活力降低,培养液LDH活性升高,细胞凋亡率升高,H/R组和NC＋H/R组miR-133b-5p表达下调,M＋H/R组miR-133b-5p表达上调（P＜0.05）;与H/R组比较,M＋H/R组心肌细胞活力升高,培养液LDH活性降低,细胞凋亡率降低,miR-133b-5p表达上调（P＜0.05）,NC＋H/R组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 大鼠心肌细胞缺氧复氧可能通过下调miR-133b-5p表达,诱发细胞凋亡.
- 韩正怡何淑芳朱海娟程洁许士进张野
- 关键词：微RNAS肌细胞细胞凋亡心肌再灌注损伤
