张泽敏 作品数:13 被引量:70 H指数:5 供职机构: 潍坊医学院 更多>> 发文基金: 山东省医药卫生科技发展计划项目 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
脂肪来源干细胞对扩张皮肤组织增殖的影响 被引量:6 2016年 脂肪来源干细胞(ADSCs)是从脂肪组织分离出来的多能干细胞,可以向骨、软骨、脂肪等间充质细胞甚至上皮细胞分化.我们通过在兔皮下注射ADSCs观察其对扩张皮肤组织的影响. 张泽敏 阎贺 姚永明 吴彩风 牛常英 杨彪炳关键词:脂肪来源干细胞 上皮细胞分化 多能干细胞 ADSCS 间充质细胞 脂肪间充质干细胞对兔皮肤软组织扩张效率影响的实验研究 背景:目前,皮肤软组织扩张技术已被广泛应用于烧伤整形与修复重建外科领域,逐渐发展成为临床中一项基本组织修复技术。但是,该技术也存在自身的缺点,如:获取软组织的扩张周期较长、扩张后即刻回缩率较高、皮肤质量变差等等。如若一味... 张泽敏关键词:脂肪间充质干细胞 皮肤扩张 血管生成 微血管密度 兔脂肪源性间充质干细胞对兔皮肤深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响 被引量:13 2016年 目的探讨创面局部注射兔脂肪源性间充质干细胞(ADSC)对兔皮肤深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响。方法取1只新西兰大白兔脂肪组织,分离ADSC,并进行传代培养,采用第3代细胞进行以下实验。将24只兔按照随机数字表法分为ADSC组12只和对照组12只,在兔背部近臀部两侧各造成1个直径约5cm深Ⅱ度烫伤创面。于伤后第2天起ADSC组兔创面皮下注射2mL经EdU标记的ADSC悬液(浓度为5×10^5个/mL),对照组兔创面同前注射2mL无血清DMEM培养液,至创面愈合。每日观察2组兔创面愈合情况,记录其愈合时间。伤后第7、14、21、28天,2组各取3只兔,测量创面面积并计算愈合率;切取创面愈合组织,HE染色观察组织形态,Masson染色观察胶原纤维表达。倒置荧光显微镜下观察EdU标记的ADSC在伤后第28天创面愈合组织中的分布,ELISA法检测伤后第7、14、21天创面愈合组织中血管内皮生长因子(VEGF)及EGF表达。对数据行析因设计方差分析、配对样本t检验。结果(1)ADSC组兔创面愈合时间为伤后(19.5±1.1)d,明显短于对照组的(23.3±1.5)d,t=d.50,P〈0.05。伤后第7天,2组兔创面均干燥,无明显渗出物,创周红肿逐渐消退;ADSC组兔创面愈合率为(15.1±2.4)%,与对照组的(13.7±3.1)%相近(t=1.20,P〉0.05)。伤后第14天,ADSC组兔创面干燥、结痂明显,创面愈合率为(73.1±5.7)%;对照组兔创面有少量分泌物、少量结痂,创面愈合率为(52.9±5.1)%,明显低于ADSC组(t=8.06,P〈0.01)。伤后第21天,ADSC组兔创面基本愈合,创面愈合率为(95.6±3.0)%;对照组兔仍有少量创面存在,创面愈合率为(78.6±3.7)%,明显低于ADSC组(t=9.73,P〈0.01)。伤后第28天,2组兔创面均完全愈合,愈合率100%,ADSC组兔创面愈合皮肤组织质地及微血管反应优� 姚永明 阎贺 张泽敏 吴彩风 张亮 杨彪炳关键词:烧伤 伤口愈合 间质干细胞移植 脂肪源性间充质干细胞 改良倒L形切口法矫正内眦赘皮 被引量:4 2015年 垂直或斜行的掩盖内眦角前方的半月形蹼状皮肤皱襞称为内眦赘皮,是蒙古人种群中常见的眼睑类型,因此又称为蒙古皱襞,其发生率约50%,单睑人群的发生率更高,可达70%以上。矫正内眦赘皮手术方式很多,主要包括横切纵缝法、Y—V法、Z成形术以及Z瓣改良、Mustarde法和倒L型下睑切口法等,但均存在不足。其中倒L形切口法的切口顺皮纹且较隐蔽,但存在下睑切口偏长等缺点,我们对此术式进行了改良,2012年6月至2014年6月对197例内眦赘皮患者行改良倒L形切口法内眦赘皮矫正术,效果理想。 吴彩风 牛常英 刘宗艳 张泽敏 杨彪炳关键词:内眦赘皮矫正术 L形切口 手术方式 Z成形术 发生率 改良Park法重睑成形术矫正轻度上睑下垂的疗效观察 被引量:26 2015年 目的探讨采用改良Park法重睑成形术矫正轻度上睑下垂的疗效。方法 2012年10月-2015年1月,采用改良Park法重睑成形术矫正23例单睑伴轻度上睑下垂患者。男14例,女9例;年龄16~35岁,平均25岁。单侧上睑下垂16例,双侧7例。患者上睑缘均位于瞳孔上缘,下垂量为1~2 mm,平均1.5 mm。结果术后切口均Ⅰ期愈合,无明显瘀血肿胀。患者均获随访,随访时间4~26个月,平均15个月。患者重睑线弧度自然流畅,上睑下垂完全矫正,原位注视以及运动时上睑形态、位置基本对称。术后2个月按中华医学会医学美容学会关于"切开法重睑术效果评定标准商榷"进行评定,均为优。结论采用改良Park法重睑成形术矫正单睑伴轻度上睑下垂,术中无需分离截除提上睑肌,即可达到重睑成形与抬高上睑共同修复的目的,手术创伤小,矫正幅度可操控性强。 牛常英 谭慎兴 吴彩风 刘宗艳 张泽敏 唐胜建 梁晓琴关键词:上睑下垂 重睑成形术 脂肪间充质干细胞对兔扩张皮肤血管增殖影响的实验研究 被引量:6 2015年 目的在皮肤软组织扩张过程中,扩张皮瓣的成活很大程度取决于新生毛细血管的数量,文中探究脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对扩张皮肤组织中新生毛细血管数量的影响。方法将20只新西兰大白兔随机数字表法分为实验组和对照组,每组10只。取兔的脂肪组织,体外分离、培养ADSCs,行免疫荧光细胞染色对其予以鉴定;在兔背部埋置一30 m L扩张器;在实验组扩张皮下注射lm L ADSCs悬液;对照组仅注射lm L等渗盐水作对照;4周后完成扩张;取扩张皮肤组织,行HE染色并观察毛细血管断面数量;用免疫组化染色检测血管内皮细胞标记物CD31和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达情况,并对其微血管密度进行统计分析。用Elisa检测皮肤组织中VEGF的表达情况。结果 HE染色显示,实验组中毛细血管断面明显多于对照组;免疫组化染色显示,实验组CD31表达量增多,微血管密度实验组[(10.70±1.89)个/视野)]较对照组[(5.20±1.48)个/视野]明显增加(P<0.05);Elisa结果显示,与对照组相比,实验组VEGF的表达量较对照组增高[(215.46±24.19)pg/m L vs(300.27±23.40)pg/m L,P<0.05]。结论脂肪间充质干细胞能够促进扩张皮肤中新生血管生成,从而增加了对扩张皮肤的血液供应作用。 张泽敏 姚永明 阎贺 吴彩风 牛常英 谭慎兴 唐胜建 杨彪炳关键词:脂肪间充质干细胞 皮肤扩张 血管生成 脂肪来源干细胞对兔皮肤组织扩张速率的影响 被引量:2 2016年 目的探讨在兔皮肤组织扩张过程中,通过局部皮下注射脂肪来源干细胞(ASCs)对皮肤组织扩张速率的影响。方法取新西兰大白兔脂肪,体外分离、培养ASCs,通过细胞免疫荧光表面标志物对其鉴定,并用EdU染色标记ASCs。采用随机数字表法将20只新西兰大白兔分为实验组(n=10)和对照组(n=10),于脊柱一侧文出1.5cm×1.5cm方形区域,并存其下置入30ml圆形扩张器1枚。实验组于扩张皮下注射ASCs悬液1ml;对照组仅注射无血清DMEM培养基1ml,恒压条件下定期注水并记录每次注水量,分别于第7、14、28天对扩张皮肤方形区域的面积进行测量,4周完成扩张。对2组扩张皮肤方形面积予以测量并进行统计学分析。切取扩张皮肤组织,行常规石蜡组织切片并对其行HE染色;采用免疫组织化学染色检测血管内皮细胞标记物CD31表达情况,并对其微血管密度进行判定;行ELIAS法检测其表皮生长因子(EGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达量;采用WesternBlot对其表皮细胞特异性因子(CK19)行定性检测。结果实验组扩张皮肤厚度增加明显,且其扩张速率明显快于对照组(P〈0.05);免疫组织化学染色显示,实验组CD31阳性区域表达量增多,微血管密度明显增加(P〈0.05);ELISA法测得实验组EGF和VEGF的表达增多(P〈0.05);Western Blot结果显示,相对于对照组,实验组CK19表达量明显增加。结论脂肪来源于细胞能够促进扩张皮肤新生血管生成及组织再生,在很大程度上提高了皮肤组织的扩张速率,可获得更大面积的皮肤组织。 张泽敏 阎贺 姚永明 吴彩风 牛常英 谭慎兴 杨彪炳关键词:脂肪组织 干细胞 软组织扩张术 新生血管化 脂肪干细胞联合几丁糖对兔扩张皮肤组织即时回缩率的影响 被引量:3 2015年 目的 探讨脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)联合几丁糖对兔扩张皮肤组织即时回缩率的影响。方法 取新西兰大白兔腹股沟脂肪,利用酶消化法体外分离培养ADSCs并传代。取第3代细胞鉴别其表面特异性标记物;行成软骨及成表皮诱导,鉴定其多向分化能力。取40只2~3月龄新西兰大白兔,随机分为4组(n=10),分别为空白对照组(A组)、ADSCs组(B组)、几丁糖组(C组)、ADSCs+几丁糖组(D组)。各组均建立背部皮肤扩张模型;扩张器埋置前,C、D组于扩张器表面涂抹5 m L 2%医用几丁糖,B、D组在埋置部位皮下多点注射1 m L浓度为5×10~6个/m L的第3代ADSCs细胞悬液。埋置后常规注射扩张,4周后达预期容量。原位维持1周后,取材测量扩张皮肤组织即时回缩率,HE染色测量皮肤全层和表皮以及纤维包膜厚度,Masson染色观察纤维包膜中胶原纤维情况,CD31免疫组织化学染色检测皮肤组织中微血管形成情况,并计算微血管密度(microvessel density,MVD)。结果 细胞鉴定示分离培养细胞为ADSCs,且具有多向分化能力。各组动物均存活至实验完成。D组扩张皮肤组织即时回缩率显著小于其他组,B、C组小于A组,B组小于C组,比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。组织学染色示A、B组成熟期成纤维细胞较多,胶原纤维粗大且排列规则;而C、D组幼稚期成纤维细胞较多,胶原纤维纤细且稀疏。B、D组皮肤全层及表皮厚度、MVD均显著高于A、C组,C、D组纤维包膜厚度显著低于A、B组,比较差异均有统计学意义(P〈0.05);其余组间以上指标比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论 ADSCs移植可促进兔扩张皮肤组织再生以及血管新生,但对于纤维包膜无显著影响,而几丁糖可抑制纤维包膜的生成,两者联合应用对于抑制扩张皮肤组织的即时回缩具有协同作用。 姚永明 张泽敏 阎贺 吴彩风 胡飞 杨彪炳关键词:脂肪干细胞 几丁糖 扩张皮肤 脂肪来源干细胞对兔扩张后皮肤质量的影响 2015年 目的 探讨皮下局部注射脂肪来源干细胞(ADSCs)对扩张皮肤胶原纤维含量、微血管含量及皮肤厚度等的影响.方法 取新西兰大白兔的腹股沟脂肪,体外分离,培养获取,鉴定ADSCs;随机将20只新西兰大白兔分为实验组(n=10)与对照组(n=10),每只兔背部皮下埋置1枚扩张器(30ml).实验组于局部皮下注射ADSCs悬液1ml;对照组注射无血清DMEM培养基1ml;完成扩张后,切取扩张皮肤组织,并对其进行HE染色,观察皮肤厚度及微血管密度;Masson三色染色,观察胶原纤维情况;采用Elisa检测皮肤组织中碱性成纤维生长因子(bFGF)的表达量.结果 实验组扩张后,皮肤厚度与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验组微血管密度明显高于对照组(P<0.05);Elisa检测结果示:实验组bFGF较对照组表达量增多(P<0.05);实验组胶原纤维较对照组数量多,且粗大.结论 ADSCs能够促进碱性成纤维细胞生长因子表达,提高扩张皮肤中胶原纤维含量及微血管密度,增加扩张后皮肤厚度,提高扩张皮肤质量. 吴彩风 张泽敏 姚永明 阎贺 牛常英 谭慎兴 杨彪炳关键词:脂肪来源干细胞 扩张皮肤 碱性成纤维细胞生长因子 胶原纤维 微血管密度 不同配比冻存液对兔脂肪干细胞液氮冻存效果的研究 被引量:2 2015年 目的:探究不同浓度配比冻存液对脂肪干细胞(Adipose-derived Stem Cells,ADSCs)冻存复苏后存活率及增殖活性的影响。方法:无菌条件下取新西兰大白兔的脂肪组织,体外分离、培养ADSCs并传代至第3代,行免疫细胞化学染色对其表面标志物进行鉴定,同时对其行成软骨及成表皮细胞诱导以证实其多项分化能力。将第3代ADSCs置于液氮(-196℃)中冻存,根据冻存液中培养基(DMEM)、胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)及二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)的配比不同分为8组:1含不同浓度FBS配比分组:A组(70%DMEM+20%FBS+10%DMSO)、B组(60%DMEM+30%FBS+10%DMSO)、C组(50%DMEM+40%FBS+10%DMSO)、D组(含有40%DMEM+50%FBS+10%DMSO);2含不同浓度DMSO配比分组:E组(55%DMEM+40%FBS+5%DMSO)、F组(50%DMEM+40%FBS+10%DMSO)、G组(45%DMEM+40%FBS+15%DMSO)、H组(40%DMEM+40%FBS+20%DMSO)。细胞冻存三个月后,对其进行复苏并观察细胞形态学变化;通过细胞计数计算细胞存活率;采用MTT法绘制复苏后细胞生长曲线,以测定其生长增殖情况。结果:细胞复苏后,通过细胞计数计算结果显示C、D组存活率明显高于A、B组(P<0.05),E、F、G、H四组之间有统计学意义(P<0.01);MTT法结果显示C、D、F组的增殖曲线与未冻存组无明显差异(P>0.05)。结论:从兔脂肪组织中成功分离出了ADSCs,并且能在体外培养过程中稳定生长,快速增殖;ADSCs冻存液比例选择以DMEM:FBS:DMSO=5:4∶1的冻存效果最好。 姚永明 张帆 张泽敏 阎贺 吴彩凤 胡飞 牛常英 杨彪炳关键词:脂肪来源干细胞 液氮