张巧丽
- 作品数：10 被引量：8H指数：2
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”中国博士后科学基金更多>>
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- 一种结核分枝杆菌生物被膜检测方法
- 本发明提供了一种结核分枝杆菌生物被膜检测方法，采用Sytox green/Sytox orange荧光染色，用酶标仪检测悬液，进行结核分枝杆菌生物被膜检测，检测方法步骤简单，对仪器的要求低；能在短时间内，检测结核分枝杆菌...
- 于录杨志强宾文范君文庞旭东汪杨申凤鸽张巧丽王超安雅男
- 文献传递
- 巨噬细胞通过产生胞外陷阱捕获并杀伤单增性李斯特菌被引量：3
- 2015年
- 为了研究产单核细胞增生性李斯特菌(Lm)能否引起巨噬细胞产生胞外陷阱,并初步探讨巨噬细胞胞外陷阱(METs)对其杀伤作用。本文通过荧光显微镜、菌落计数和免疫印记等技术分析单增李斯特菌侵袭的2种巨噬细胞胞外陷阱形态、产量及抑菌效果。结果显示,小鼠巨噬细胞系RAW 264.7以及人巨噬细胞系Thp-1均可在单增李斯特菌的诱导下产生胞外陷阱;Lm在侵袭巨噬细胞15min后已有METs产生,1~3h产量明显增大,然后随时间的推移逐渐减弱;METs可以有效抑制Lm的生长。另外,本试验还发现Lm诱导胞外陷阱的产生与细胞外信号调节激酶相关。
- 程威施晓晨王超安雅男张巧丽金琨琪杨志强于录
- 关键词：单增李斯特菌巨噬细胞细胞外信号调节激酶
- 一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法
- 本发明公开了一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法，它包括：1）提取结核分枝杆菌总RNA，反转录成cDNA；2）以cDNA为模板，用内参基因16SrRNA引物，检测基因Rv3519引物荧光定量PCR检测；最后由公式：...
- 于录王超杨志强郭娜汪杨唐旭东孟日增安雅男张巧丽施晓晨
- 文献传递
- 三氯生通过诱导巨噬细胞非mTOR途径自噬加强胞内菌杀伤被引量：1
- 2016年
- 为了研究三氯生能否引起细胞自噬并探讨其可能的诱导通路,揭示三氯生作为抗菌药物的新作用机制,利用免疫荧光、菌落计数、免疫印迹等技术检测经三氯生处理过细胞的自噬水平、相关蛋白表达量的变化及杀菌能力的改变。结果表明:三氯生能引起Hela细胞和Raw264.7细胞的自噬,并且该自噬为完全自噬。三氯生诱导的小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞自噬依赖的是胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase,ERK)途径,而非经典的雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,m TOR)途径。此外,三氯生通过该作用机制加强了巨噬细胞对胞内菌的杀伤作用。研究表明,三氯生诱导自噬的现象在细胞中普遍存在,自噬在对抗病原微生物中起到重要作用,诱导自噬是三氯生作为抗菌药物的新作用机制。
- 施晓晨孙青松安雅男张巧丽郭娜于录
- 关键词：三氯生巨噬细胞MTORERK
- 结核分枝杆菌Rv3519表达与其生物被膜形成能力的研究被引量：3
- 2015年
- 采用结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜的形成能力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测生物被膜态的不同结核分枝杆菌Rv3519表达水平,分析Rv3519基因表达与结核分枝杆菌生物被膜形成能力的关系。结果表明:临床分离株产膜能力较H37Rv明显偏低,差异显著(P<0.01);临床分离株之间生物被膜产量差异不显著(P>0.05);生物被膜态的分离株较标准株Rv3519基因表达量偏低,差异显著(P<0.01)。说明结核分枝杆菌生物被膜形成能力与Rv3519基因表达水平相关,Rv3519基因可以作为结核分枝杆菌生物被膜形成能力的潜在分子诊断标志。
- 杨志强张巧丽安雅男王超孙青松唐旭东孟日增施晓晨程威金琨琪于录郭娜
- 关键词：结核分枝杆菌生物被膜实时荧光定量PCR
- 胞外DNA是耻垢分枝杆菌生物被膜的主要成分
- 2016年
- 目的本实验以无致病性的耻垢分枝杆菌Mc^2 155为结核分枝杆菌模型菌进行生物被膜成分研究。方法利用24孔细胞培养板建立体外耻垢分枝杆菌生物被膜培养模型；借助DNaseⅠ作为eDNA抑制剂分析其在生物被膜的存在情况，通过结晶紫染色对生物被膜进行定量；早期加入外源基因组DNA对生物被膜的影响进行评估；利用荧光显微镜考察SYTOX orange标记生物被膜的主要成分胞外DNA（eDNA）。结果体外培养的耻垢分枝杆菌Mc^2 155能形成典型生物被膜；早期加入DNaseⅠ明显抑制了生物被膜的产量；早期加入基因组DNA有利于提高生物被膜产量。特异染料SYTOX orange能对耻垢分枝杆菌生物被膜染色，说明eDNA是耻垢生物被膜的主要成分。结论本研究首次证明eDNA是耻垢生物被膜的主要成分，这为治疗分枝杆菌感染和耐药控制提供了新的思路。
- 张巧丽李树林安雅男王超李燕于录
- 关键词：分枝杆菌生物被膜
- 一种利用结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜方法
- 本发明公开了一种结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜方法，它包括：洗涤生物被膜；50摄氏度干燥，在0.5-1.5%结晶紫溶液中孵育；洗涤后，50摄氏度干燥；加95%乙醇孵育，涡旋震荡，制备悬液；分光光度计测悬液A570nm...
- 于录杨志强孟日增唐旭东范君文汪杨宋宇郭娜张巧丽王超
- 文献传递
- 耻垢分枝杆菌MSMEG_6935基因的敲除对其生物被膜产量的影响被引量：1
- 2015年
- 探索出一套分枝杆菌基因敲除的可靠方案,并研究耻垢分枝杆菌MSMEG_6935基因对其生物被膜产量的影响,结核分枝杆菌相关基因的敲除对其致病机理的深入研究有重要意义。利用融合PCR方法将MSMEG_6935基因的上、下游基因以及替代目的基因的kan基因融合,并将产物克隆到温敏型穿梭质粒pPR27,再电转入耻垢分枝杆菌mc2155中,筛选获得MSMEG_6935基因缺失株mc2155-6935。进一步研究MSMEG_6935基因的敲除对细菌生长曲线和生物被膜产量的研究。成功构建了MSMEG_6935基因的缺失株,并研究证明耻垢分枝杆菌MSMEG_6935基因的缺失对耻垢分枝杆菌的生长曲线没有影响,但会对其生物被膜的产量产生较大影响。
- 金琨琪施晓晨张巧丽安雅男王超程威杨志强于录
- 关键词：基因敲除穿梭载体生物被膜
- 结核分枝杆菌生物被膜体外培养的培养基及培养方法
- 本发明公开了结核分枝杆菌生物被膜体外培养的培养基，它包括：天冬酰胺4g、枸橼酸2g、三水合磷酸氢二钾0.3-1g、七水合硫酸镁0.5-1g、无水柠檬酸铁铵0.05-1g、甘油60ml、加去离子水、氨水调节pH至7.0，定...
- 于录杨志强郭娜唐旭东范君文汪杨孟日增宋宇张巧丽王超
- 文献传递
- CwlM对结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌自溶能力以及生物被膜形成的影响
- 结核病(Tuberculosis,TB)是一种高发病率和高传染性的疾病,主要是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起。2013结核患病人数900万有150万人死于此病。2015...
- 张巧丽
- 关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌自溶生物被膜
- 文献传递
