王璐璐
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市科技发展计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- CD2相关蛋白剪接异构体启动子区及其缺失体的构建和活性分析
- 2016年
- 目的:构建CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)剪接异构体启动子区及其缺失体,转染HEK293及He La细胞,评价其启动子活性。方法:取稳定生长的He La细胞,常规方法提取总RNA,逆转录为c DNA并以此为模板,PCR扩增CD2AP剪接异构体之一CD2AP002转录起始位点上游2 200 bp的启动子区域片段,亚克隆这些片段至p GL-3基本载体上的多个克隆位点,构建含CD2AP002启动子的重组质粒。CD2AP002质粒构建成功后,以此质粒为模板重复上述步骤构建一系列CD2AP002启动子5′侧翼区缺失体。重组质粒及其缺失体转染人胚肾HEK293细胞及人宫颈癌He La细胞,双荧光素酶报告基因检测各片段的活性。结果:酶切、核酸序列分析证实,成功构建含CD2AP002启动子的重组质粒及其缺失体。经双荧光素酶活性检测证实不同片段大小的5′侧翼区序列缺失体均具有与片段长度相应的活性。结论:成功构建出在HEK293及He La细胞中具有活性的重组质粒及其缺失体。
- 李楠楠王璐璐张慧文金蕊周国平
- 关键词：CD2相关蛋白启动子剪接异构体
- 干扰素调节因子3与巨细胞病毒感染
- 2015年
- 固有免疫系统是人体抵抗病毒入侵的第一道防线，固有免疫系统中的多种效应细胞能快速识别病原体并产生Ⅰ型干扰素（ interferon， IFN）及细胞因子，抑制病毒复制和传播。干扰素调节因子3（interferon regulatory factor 3，IRF3）作为干扰素调节因子家族中的一员，主要负责诱导Ⅰ型IFN、干扰素刺激基因（ interferon-stimulated gene，ISG）和促炎性细胞因子的生成，在固有免疫中发挥了重要的作用。人巨细胞病毒（ human cytomegalovirus，HCMV）属于β疱疹病毒家族亚科，是有包膜的线性双链DNA（ double-stranded，dsDNA）病毒，它的基因组约有250 kb，可以编码超过200个蛋白发挥逃避免疫应答的作用［1］。成人免疫力正常者初次感染HCMV后呈潜伏感染状态并且持续终身，但当免疫力低下如艾滋病或者移植手术后，病毒会大量复制，引起HCMV原发感染。此外， HCMV感染还会导致新生儿的出生缺陷，引起听力下降、脑瘫、小头畸形和智力低下等后遗症。
- 王璐璐周国平
- 关键词：干扰素调节因子3巨细胞病毒感染促炎性细胞因子抑制病毒复制免疫力低下
