王兵 作品数:11 被引量:27 H指数:3 供职机构: 济南市医学科学研究所 更多>> 发文基金: 济南市科技局立项课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
丁酸钠对结肠癌细胞生长曲线及细胞周期的影响 被引量:1 2005年 采用M TT试验比较了不同浓度的丁酸钠干预后,结肠癌HT-29细胞和结肠癌Lovo细胞的生长曲线变化,并采用流式细胞术研究了丁酸钠对结肠癌细胞周期的影响。结果与对照组相比,1.25mm o l/L浓度组在各观察时间点均未显示出对Lovo细胞的抑制;2.5mm o l/L以上浓度(2.5、5、10mm o l/L)在各观察点显示出明显的生长抑制作用,各组之间差异有显著性(P<0.01);随着丁酸钠浓度的升高,越来越多的HT-29细胞被阻滞在G0/G1期,越来越多的Lovo细胞处于G2/M期。证实丁酸钠对肿瘤细胞增殖的抑制作用具有浓度、时间依赖性,这种作用是通过G2/M期或G0/G1期阻滞实现的。 黄丽华 刘成霞 张孝卫 王兵 李铁军 张静 张尚忠关键词:LOVO细胞 HT-29细胞 流式细胞术 丁酸钠 细胞周期 二甲基肼诱发小鼠结直肠癌形成过程中增殖与凋亡的研究 被引量:2 2006年 目的研究增殖-凋亡失衡在结直肠癌发生过程中的作用,并探讨其动态变化的分子机制。方法以二甲基肼诱发昆明小鼠结直肠癌。分别于给药后第1 2,1 8,2 4周处死动物,观察各时点模型组及对照组小鼠结直肠黏膜的病理变化。多阶段动态观察增殖细胞和凋亡细胞的分布和程度;并分别应用RT-PCR,免疫组化和W estern blot检测小鼠结直肠黏膜组织中p 2 1waf1,GADD 4 5和Bax的表达。结果诱癌过程中,模型组小鼠结直肠黏膜上皮依次出现轻、中、重度不典型增生、腺瘤和腺癌。模型组结直肠非癌黏膜各时点的PCNA表达明显高于对照组(P<0.0 1);从正常黏膜→不典型增生→腺瘤→癌,PCNA表达逐渐增高,至癌阶段PCNA表达明显增强,各组间比较差异均有显著性(P<0.0 1)。模型组结直肠在从正常黏膜至癌的演变过程中,增殖与凋亡的比值逐渐增高,差异有显著性(P<0.0 1);模型组结直肠黏膜在从正常黏膜至腺瘤的过程中,p 2 1waf1,GADD 4 5和BaxmRNA表达和蛋白表达均逐渐增强;而癌组织中,3种基因的表达水平明显减弱。结论在二甲基肼诱发的昆明小鼠结直肠癌的发生过程中,结直肠黏膜存在着增殖与凋亡的失衡;p 2 1waf1,GADD 4 5和Bax 3种抑癌基因与结直肠癌的发生有关。 刘成霞 张尚忠 张孝卫 李铁军 黄丽华 张静 王兵关键词:基因表达 肿瘤免疫治疗的实验研究 2001年 肿瘤抗原是多年来的研究热点,近年随着基因转移技术逐渐成熟,已可将多种外源基因转入肿瘤细胞,利用这种经外源性基因修饰的肿瘤细胞作为疫苗,以期能有效地激活或增强机体的抗肿瘤免疫应答。但目前该项技术还不完善,有许多困难有待解决。 曲东平 耿秀兰 史世娟 黄丽华 王兵 杜德田关键词:肿瘤 免疫 丁酸钠对结肠癌细胞凋亡活性的影响 被引量:2 2007年 目的观察丁酸钠对结肠癌细胞凋亡活性的影响。方法采用流式细胞术(FCM)和DNA末端原位标记染色法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果实验48小时检测,对照组和2.5mM、5mM和10mM各浓度丁酸钠作用后的Lovo细胞凋亡率分别为11.71%、21.62%、34.40%和47.83%,各组之间有显著性差异(P<0.01);对照组和5mM丁酸钠组的HT-29细胞,培养24、48、72小时,其凋亡率分别为6.22%、12.00%、14.31%和30.68%、34.60%、41.88%,差异有显著性(P<0.01);本研究中用二倍体的人胚肾293细胞作了对照研究,未发现丁酸钠对293细胞的生长抑制和凋亡有影响。结论一定浓度的丁酸钠可以选择性抑制两种结肠癌细胞增生,诱导凋亡,显示出浓度、时间依赖性。在预防肿瘤发生的过程中发挥重要的作用。 张孝卫 刘成霞 王兵 李铁军 黄丽华 王丽珍 张尚忠关键词:丁酸盐 抗肿瘤 凋亡 HT-29 丁酸钠抑制二甲基肼诱发小鼠大肠癌的实验研究 被引量:2 2005年 背景与目的:体外研究证实丁酸钠能促进多种肿瘤细胞分化,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。本研究给予小鼠直肠内灌注丁酸钠,旨在观察丁酸钠对二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)诱发的昆明种小鼠大肠癌的预防作用。方法:选择昆明种小鼠为实验对象,模型组以DMH30mg/kg,皮下注射,每周一次,连续给药11周。实验组分别以1.25×10-3mol/kg、2.5×10-3mol/kg丁酸钠溶液,直肠灌注,每天一次,连续24周。分别于给药后第12周、18周和24周分3个阶段处死小鼠。观察肿瘤的发生率,以及2.5×10-3mol/kg丁酸钠灌肠组小鼠的一般状态、体重增长、肝肾功能、以及肝、肾、肺、胰腺等病理变化。结果:实验12周各组小鼠未见肿瘤发生;18周时,模型组小鼠肿瘤发生率为58.3%(7/12),1.25×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率为25.0%(3/12),2.5×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率为0(0/12),各组相比差异有显著性(P<0.01);实验24周结果,模型组小鼠肿瘤发生率为95.0%(19/20),1.25×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率45.0%(9/20),2.5×10-3mol/kg丁酸钠组肿瘤发生率为15.0%(3/20),各组间有显著性差异(P<0.01)。单纯2.5×10-3mol/kg丁酸钠灌肠组和生理盐水对照组均未发现肿瘤。单纯2.5×10-3mol/kg丁酸钠灌肠组小鼠一般状态良好,体重增长及肝、肾功能均与生理盐水灌肠组无显著性差异(P>0.05),肝脏、肾脏、胰腺等重要脏器未见病理性改变。结论:丁酸钠能够抑制DMH诱发的实验性小鼠大肠癌的发生和发展,并且无明显毒副作用发生。 刘成霞 张尚忠 张孝卫 耿秀兰 李铁军 黄丽华 王兵关键词:小鼠 丁酸钠诱导HT-29结肠癌细胞凋亡及其对p53靶基因的调控 被引量:3 2006年 目的:分析丁酸钠对HT-29结肠癌细胞p53三个主要靶基因(p21waf1,bax和gadd45)的调控,并探讨其作用机制。方法:HT-29细胞常规培养在含有和不含有丁酸钠的培养液中。分别用MTT和流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞增殖和细胞周期分布,通过形态学观察、亚G1峰的检测和AnnexinV-FITC双标记观察细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot分别检测丁酸钠对p21waf1,bax和gadd45三种基因mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:丁酸钠以剂量和时间依赖的方式抑制HT-29细胞增殖和诱导凋亡,并阻滞细胞于G1期。RT-PCR和Western blot结果显示丁酸钠可以促进p21waf1和bax基因mRNA和蛋白的表达,而对gadd45基因的表达无明显影响。结论:2.5mmol/L以上浓度的丁酸钠可以抑制HT-29细胞增殖并诱导凋亡,该作用可能通过上调p21waf1和bax基因表达而实现。 刘成霞 张尚忠 张孝卫 黄丽华 李铁军 张静 王兵关键词:丁酸钠 结肠癌细胞 细胞凋亡 P53基因 BAX 补充无花果水提物对小鼠游泳运动后糖代谢的影响 被引量:4 2005年 张孝卫 黄丽华 李铁军 王兵 耿秀兰关键词:水提物 无花果 糖代谢 运动后 游泳 小鼠 二甲基肼诱导昆明小鼠大肠癌的研究 被引量:5 2005年 随着大肠肿瘤发病率的逐年升高,大肠癌的化学预防已成为目前肿瘤学领域的研究热点.在防治研究中,常常应用动物模型进行具体防治措施的效果验证.本研究应用二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)诱发昆明小鼠大肠癌实验,旨在探索一种比较经济实用的用于大肠癌研究的动物模型. 刘成霞 张尚忠 李铁军 黄丽华 王兵 张孝卫 耿秀兰关键词:小鼠大肠癌 二甲基肼 大肠肿瘤 肿瘤学 丁酸钠对大肠癌HT-29细胞形态及其生长曲线的影响 被引量:7 2005年 目的观察体外培养的HT-29细胞在丁酸钠作用后形态学及生长曲线的变化。初步探讨丁酸钠对结肠癌细胞的凋亡诱导作用。方法利用相差显微镜、可变投射显微镜、电镜观察细胞形态学变化,MTT法检测HT-29细胞生长情况。结果丁酸钠作用后的HT-29细胞形态发生改变,表现为细胞体积变小、形状变圆,细胞核固缩,脱壁细胞逐渐增多,细胞膜突起减少,核内染色质呈团块状积聚于核膜下,并可见凋亡小体。丁酸钠2.5、5和10mM对HT-29细胞生长均有抑制作用,并呈浓度、时间依赖性。结论细胞形态学的变化初步显示了丁酸钠对结肠癌细胞具有凋亡诱导作用。 李铁军 刘成霞 张静 黄丽华 王兵 张孝卫 张尚忠关键词:丁酸钠 HT-29细胞 MTT法 干血分析法快速筛查前列腺疾病的临床研究 2005年 目的探讨一种前列腺疾病快速、简便的筛查方法。方法对1045例男性,按年龄分为三组,采集末梢血置载玻片,应用可变投射显微镜进行干血分析(Heitan Lagarc1e Bradford HLB),观察凝固血滴氧自由基损伤(Re-active Oxygen Toxic Species,ROTS)的形态学改变,并与临床表现、B型超声、实验室检查等作对比分析。结果前列腺疾病在血滴中心部位出现ROTS。前列腺良性增生、前列腺炎、前列腺癌HLB筛查的阳性检出率分别为98.48%、100.00%和2/2。与其他临床指标的检查结果完全符合。结论HLB检查可作为前列腺疾病普查的筛查指标,也可作为早期诊断、判断病情、制定治疗方案及随访的一项客观参考指标,方法快速简便。 鞠全荣 李铁军 曹吉烈 王兵 刘宗印关键词:前列腺疾病