程晓丽
- 作品数：15 被引量：51H指数：5
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一个FGG杂合缺失突变导致异常纤维蛋白原血症家系分析被引量：7
- 2018年
- 目的对一个新的FGG基因杂合缺失突变导致异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因突变分析，探讨其分子发病机制。方法收集2016年4月来温州医科大学附属第一医院就诊的先证者临床资料及其家系成员（共3代5人），采用凝固法检测血浆纤维蛋白原活性（Fg：C）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）；免疫比浊法检测纤维蛋白原抗原（Fg：Ag）、D-二聚体（D-D）和纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）含量；抽提先证者及其家系成员外周血的基因组DNA，采用PCR扩增先证者纤维蛋白原的FGA、FGB及FGG基因所有外显子和侧翼序列，以及家系成员相应的突变位点区域，产物纯化后直接测序，同时采用克隆测序及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染色进一步验证；用ClustalX-2.1-win软件分析突变位点基因的保守性，并采用Pymol软件分析突变前后蛋白质空间结构及分子间作用力的改变。结果先证者Fg：C明显下降，而Fg：Ag含量正常，分别为0.30 g/L和2.00 g/L（参考范围均为2.00～4.00 g/L）；母亲及外婆Fg：C和Fg：Ag分别为0.42 g/L、2.09 g/L及0.47 g/L和2.42 g/L。基因分析发现先证者FGG基因8号外显子存在c.944_c.952 delCCTTTGATG杂合缺失突变，导致氨基酸289_291delAla，Phe，Asp，其母亲和外婆同样携带此突变，父亲和外公为正常野生型。同源性分析表明Ala289，Phe290，Asp291残基在同源物种间高度保守；蛋白模型分析发现在野生型FGG蛋白质中，Ala289分别与Gly287、Gly292及Thr371形成3个氢键，Phe290分别与Tyr262、Tyr278、His307及Asn308形成4个氢键，Asp291分别与Asp288及Lys302形成2个氢键，当Ala289、Phe290和Asp291发生缺失突变后，原有的氢键连接全部消失。结论本研究发现了纤维蛋白原γ链289_291delAla，Phe，Asp杂合缺失突变会引起Fg分子空间结构重排，降低了结构稳定性，其
- 谢耀盛季伟丹李阳阳金艳慧杨丽红程晓丽王明山
- 关键词：系谱杂合子丢失纤维蛋白原突变
- 两例遗传性抗凝血酶缺陷症家系表型与基因分析
- 目的:对两个遗传性抗凝血酶(antithrombin,AT)缺陷症家系进行表型诊断和基因分析,探讨其分子发病机制。方法:检测凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、抗凝血酶活性(antithrombi...
- 郝秀萍金艳慧程晓丽杨丽红朱丽青王明山
- 关键词：基因突变血栓形成
- 文献传递
- FⅫ基因多态性对肺血栓栓塞的影响被引量：9
- 2015年
- 目的探讨凝血因子Ⅻ基因(FⅫ)多态性与肺血栓栓塞(PTE)形成的相关性及其影响。方法采用直接测序法检测56例PTE患者和40例对照组的FⅫ基因启动区第46位碱基多态性,并采用一期凝固法、发色底物法及免疫比浊法等测定血浆凝血因子Ⅻ活性(FⅫ∶C)、抗凝血酶活性(AT∶A)、纤溶酶原活性(PLG∶A)及血浆D-二聚体(D-D)含量等各项指标。结果 FⅫ基因多态性46TT型在PTE患者所占比例较对照组明显增高,其多态性在分布上差异有统计学意义(P<0.05)。46TT型血浆FⅫ∶C、AT∶A均明显低于其他型及对照组(P<0.05),但在46CT型及46CC型与对照组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,46TT型的D-D含量明显升高(P<0.05)。PLG∶A在各型患者及对照人群之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论肺血栓栓塞患者的FⅫ基因46TT型增多并导致FⅫ活性明显下降,该多态性是引起肺血栓栓塞的潜在因素。
- 谢耀盛林杰程晓丽谢海啸王明山
- 关键词：肺血栓栓塞多态性纤溶抗凝
- 一个遗传性纤溶酶原缺陷症和一个遗传性纤维蛋白原缺陷症家系的表型与基因突变分析
- 纤溶系统和凝血系统在维持人体健康的生理功能中都有着重要的作用，它们在机体内保持着既矛盾又统一的动态平衡关系。纤溶系统的主要作用是溶解沉积在人体血管内和血管间质中的纤维蛋白（fibrin，Fb），使血管以及各腺体管道保持通...
- 程晓丽
- 关键词：细胞病理学
- 文献传递
- 两个遗传性抗凝血酶缺陷症家系的表型与基因突变分析被引量：4
- 2016年
- 目的对两个遗传性抗凝血酶（antithrombin，AT）缺陷症家系进行表型诊断和基因分析，探讨其分子发病机制。方法检测2例先证者及其家系成员凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、抗凝血酶活性（antithrombinactivity，AT：A）、抗凝血酶抗原（antithrombinantigen，AT：Ag）、蛋白C活性及蛋白S活性等指标以明确诊断。提取外周血基因组DNA，PCR扩增AT基因全部外显子、侧翼及5′、3′非编码区，PCR产物经纯化后直接测序，寻找基因异常位点，并通过反向测序及银染色进行验证。借助生物信息学软件辅助分析突变对蛋白的影响。结果先证者1的AT：Ag正常但AT：A降低至30％，其大儿子、小儿子、小女儿AT：A在正常值的50％左右;AT基因第2外显子和第5外显子分别存在杂合错义突变c．235C〉T（P．Arg47Cys）和两个多态性位点（c．981G〉A、c．1011G〉A），同样突变也见于其大儿子、小儿子和小女儿。先证者2的AT：A、AT：Ag分别为39％和103mg／L，其父亲为57％和114mg／L，均明显低于正常对照；AT基因第3外显子发生杂合缺失突变g．5890—5892delctt，导致P．Phe121丢失，其父亲亦携带该突变位点。SIFT和PolyPhen-2程序对C．235C〉T分析表明，错义突变Arg47Cys会对AT蛋白功能产生影响；spdbv软件和PIC程序对g．5890—5892delCTT分析显示，缺失突变导致Phe121与Ala124、Lys125的氢键连接以及与Lys125、Arg47的阳离子-π作用力消失，从而影响蛋白稳定性。结论先证者1表现为Ⅱ型AT缺陷，先证者2表现为Ⅰ型AT缺陷；两例先证者抗凝血酶水平可能与错义突变P．Arg47Cys及缺失突变g．5890-5892delCTT有关。
- 郝秀萍金艳慧程晓丽杨丽红朱丽青王明山
- 关键词：基因突变血栓形成
- 一例Αα链Arg16His突变引起的遗传性异常纤维蛋白原血症家系表型和基因型分析被引量：2
- 2017年
- 目的对1例遗传性异常纤维蛋白原(Fg)血症家系进行表型诊断和基因分析,探讨其分子发病机制。方法采集先证者及家系(共3代6人)外周血,上层血浆在全自动血凝仪上检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原活性(Fg:C)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D-二聚体(D-D)、抗凝血酶活性(AT:A)和纤溶酶原活性(PLG:A);采用免疫比浊法检测纤维蛋白原抗原(Fg:Ag)含量。采用常规血栓弹力图(TEG)和功能性Fg TEG进行凝血功能综合评价及功能性Fg评估;利用下层血细胞提取DNA,采用PCR扩增Fg 3个基因FGA、FGB、FGG的所有外显子和侧翼序列、5,和3,非翻译区,扩增产物经纯化后直接测序分析,寻找基因突变。采用生物信息学软件(Poly Phen-2、Mutation Taster和SIFT)分析突变位点对蛋白质的影响;同时采用Clustal X软件分析突变位点的物种保守性。结果先证者以及小女儿Fg:C、TT、PT明显异常,分别为0.88g/L、31.7s、16.0s和1.01g/L、26.6s、15.3s,而Fg:Ag均在正常参考范围,分别为3.54g/L和3.29g/L;家系其他成员凝血指标均在正常参考范围内。功能性Fg TEG结果显示先证者及其小女儿存在Fg功能缺陷。先证者以及小女儿FGA基因2号外显子发生了c.104G>A杂合错义突变,即CGT→CAT,导致p.Arg16His杂合突变。生物信息学软件预测结果表明,该突变可影响蛋白质功能并导致相应疾病的发生。结论该遗传性异常纤维蛋白原血症患者的FGA基因存在c.104G>A杂合错义突变,此突变与患者的Fg:C下降有关。
- 毕晓洁苏正仙张慧斐程晓丽王明山沈波
- 关键词：表型基因型突变
- 纯合子Cys329Gly导致的遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系基因突变分析被引量：5
- 2016年
- 目的对1个姨表近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷症家系进行表型和F7基因突变分析,探讨其分子发病机制。方法检测先证者及其家系成员(共4代9人)凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、血浆FⅦ活性(FⅦ:C)等来明确诊断。PCR扩增先证者全部外显子及其侧翼序列、5′和3′非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,PCR产物纯化后直接测序,寻找突变位点,以反向测序验证所发生的突变;使用生物信息学软件(Poly Phen-2和Mutation Taster)预测突变位点对蛋白质功能的影响,利用Py MOL软件构建正常FⅦ蛋白空间模型,进行定点突变观察构型改变。结果先证者PT(36.1s)和FⅦ:C(2%)明显异常,家系中其余8位成员PT均略高于正常对照组和FⅦ:C均略低于正常对照组;基因分析显示先证者F7基因第8外显子存在c.1165 T>G纯合型突变,即TGT→GGT(Cys329Gly),8位家系成员的F7基因分析均显示c.1165有杂合型突变;两种生物信息学软件都提示此突变会引起蛋白功能变化,有致病性;F7基因蛋白构型显示突变后329位点与310位点之间二硫键消失,周边静电磁场发生改变。结论该家系F7基因存在Cys329Gly突变,是引起FⅦ缺陷症的主要分子机制,推测先证者纯合Cys329Gly突变基因分别遗传自近亲结婚的杂合子父母。
- 苏正仙张慧斐金艳慧程晓丽王明山沈波
- 关键词：基因突变血液凝固障碍
- 一个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系的临床特征和基因分析被引量：2
- 2015年
- 遗传性凝血因子Ⅶ（FⅦ）缺陷症是由位于人类染色体13q34的F7基因突变所致的罕见常染色体隐性遗传性疾病,临床表现为不同程度的出血倾向.遗传性FⅦ缺陷症患者的临床表现与FⅦ活性（FⅦ：C）并不相关,其出血严重程度主要取决于基因突变的数量、突变位点对FⅦ功能的影响程度和基因多态性.
- 金艳慧郝秀萍程晓丽杨丽红刘欢乐王明山
- 关键词：基因分析常染色体隐性遗传性疾病家系基因突变
- FIO基因Va1298Met纯合突变导致的重型遗传性凝血因子X缺陷症家系分析被引量：1
- 2016年
- 目的对1个姑表近亲婚配的遗传性凝血因子X（coagulation factor X，FX）缺陷症家系进行基因突变检测，探讨F10基因突变与表型的关系。方法应用ELISA法检测先证者及家系成员的FX抗原（FX antigen，FX：Ag），一期凝固法检测其凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）、血浆FX活性（FX activity，FX：C）等指标以明确诊断；用DNA测序法分析先证者F10基因的全部外显子及侧翼序列、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域；用CLC Genomics Workbench 7．5软件分析基因突变位点的物种保守性和蛋白质二级结构改变。结果先证者PT、APTT、FX：C和FX：Ag均明显异常，分别为67．2s、102．9s、1％、8％；先证者父亲、母亲和弟弟PT稍延长，分别为14．5s、14．4s和14．4s，其FX：C（54％、48％和56％）和FX：Ag（52％、54％和54％）均较正常对照水平降低；其他家系成员的凝血表型指标均在正常范围。先证者F／0基因第8外显子的g．27881G〉A纯合突变导致p．Va1298Met，其父亲、母亲和弟弟均为g．27881G〉A杂合子，先证者的g．27881G〉A纯合突变分别遗传自近亲婚配的父母，先证者妹妹F10基因为正常野生型。蛋白质生物学特性分析发现，p．Va1298Met导致FX蛋白二级结构发生改变。结论该遗传性FX缺陷症家系先证者的F10基因存在g．27881G〉A（p．Va1298Met）纯合错义突变，且与该家系FX水平降低有关。
- 金艳慧郝秀萍程晓丽杨丽红陈怡谢海啸王莹宇王明山
- 关键词：近亲结婚基因突变
- 纯合子Gly542Ser导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析被引量：5
- 2018年
- 目的探讨姨表近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系的发病机制。方法家系调查。2015年2月于温州医科大学温州市第三临床学院收治1例遗传性FⅫ缺陷症患者。经用活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血因子Ⅷ活性（FⅧ：C）、凝血因子Ⅸ活性（FⅨ：C）、凝血因子Ⅺ活性（FⅪ：C）、FⅫ活性（FⅫ：C）和FⅫ抗原（FⅫ：Ag）测定进行表型诊断。用DNA直接测序法分析先证者F12基因所有14个外显子、侧翼、5′和3′非翻译区及家系成员相应的突变位点区域，用反向测序证实所发生的突变。采用ClustalX－2.1－win软件分析突变氨基酸的保守性，同时采用四个生物信息学评分软件（PolyPhen－2，PROVEAN，SIFT和MutationTaster）分析突变对蛋白质功能的影响。结果先证者及其弟弟APTT明显延长，分别为116.4 s和101.3 s；先证者父亲APTT略延长，为48.8 s，家系其他成员APTT无明显延长；先证者及其弟弟、父亲的FⅫ：C明显减低，分别为2.0%、2.0%和18.0%，FⅫ：Ag含量分别为1.0%、1.0%、和13.0%，表现为交叉反应物质（CRM）阴性。基因测序发现先证者及其弟弟的F12基因启动子区为46T/T型及14号外显子存在c.1681G〉A（p.Gly542Ser）纯合突变；先证者父亲、母亲及儿子均存在c.1681G〉A杂合突变，其中先证者父亲表现为46T/T型，其余二者均为46C/T型；先证者丈夫启动子区为C/C型，且无上述基因突变。ClustalX－2.1－win软件保守性分析结果表明，Gly542在同源物种间高度保守。四个生物信息学软件对该突变的预测结果一致：Polyphen－2评分（1.000分）、PROVEAN评分（－4.975分）均预示为有害突变；SIFT评分（0.00分）预示可影响蛋白质功能；Mutation Taster评分（0.999分）预示可引起相应疾病。结论c．1681G〉A（p.Gly542Ser）和46T/T与该遗传性FⅫ缺陷症家系FⅫ水平明显降低有关�
- 戴利亚许锴赵秘胜程晓丽童郁李君王明山
- 关键词：系谱纯合子突变
