马喆
- 作品数：22 被引量：14H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 马链球菌兽疫亚种烯醇化酶对小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响被引量：2
- 2020年
- 旨在研究马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)烯醇化酶(enolase,Eno)对小鼠肺泡巨噬细胞(RAW264.7)吞噬能力的影响。通过构建原核表达质粒获得重组烯醇化酶(rEno),采用台盼蓝活细胞计数法,判定在不同处理浓度和时间下rEno蛋白对RAW264.7细胞的细胞毒性。将rEno蛋白与RAW264.7细胞共孵育后,用SEZ作用于细胞并检测细胞吞菌数量,判断RAW264.7细胞对SEZ的吞噬活性。进一步通过活细胞稳定同位素标记技术(SILAC)和蛋白质谱分析技术(LC-MS/MS),筛选到RAW264.7细胞中可能与SEZ Eno存在相互作用的候选蛋白。结果发现,10μg·mL^-1 rEno蛋白处理对RAW264.7细胞有明显的细胞毒性,且10μg·mL^-1 rEno蛋白处理RAW264.7细胞2和4 h可显著抑制其对SEZ的吞噬作用(P<0.01、P<0.05)。初步筛选到RAW264.7细胞中动力蛋白激活蛋白亚单位蛋白(dynactin subunit protein 2,Dctn)、整合素α-M蛋白(integrin alpha-M)等17种可能与Eno发生互作的蛋白。本研究获得了rEno重组表达蛋白,发现rEno可减少RAW264.7细胞对SEZ的吞噬,互作蛋白的初步筛选也为进一步揭示Eno在SEZ抗吞噬中的作用机制奠定了基础。
- 陈楷文华承薇袁宸潘飞蔺辉星范红结马喆
- 关键词：马链球菌兽疫亚种烯醇化酶RAW264.7细胞
- 一种沙门菌灭活疫苗的制备方法及应用
- 本发明公开了一种沙门菌基因突变株灭活疫苗的制备方法及应用，利用λ‑Red系统制备获得鸡白痢沙门菌pagC基因缺失突变株ΔPagC。取过夜培养的ΔPagC菌液，1:100接种到50ml液体LB培养基中，37℃、180rpm...
- 马喆左庚亮
- 文献传递
- 马链球菌兽疫亚种类M蛋白抗巨噬细胞吞噬机理研究
- 马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp. zooepidemicus,SEZ)属于兰氏分群的C群链球菌,可感染马,奶牛,猪,羊以及犬等,主要引起败血症、关节炎、心内膜炎以及脑膜炎等。在我国,该菌是...
- 马喆
- 关键词：马链球菌兽疫亚种类M蛋白硫氧还蛋白基因芯片
- 文献传递
- 一种沙门菌菌蜕疫苗的制备方法及应用
- 本发明公开了一种沙门菌菌蜕疫苗的制备方法及应用，利用λ‑Red系统制备获得鸡白痢沙门菌pagC基因缺失突变株ΔPagC；取过夜培养的ΔPagC菌液，1:100接种到50ml液体LB培养基中，37℃、180rpm振荡培养至...
- 马喆左庚亮
- 文献传递
- 一种沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备方法及筛选方法
- 本发明公开了一种沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备方法及筛选方法，通过使用纯化的PagC蛋白免疫Balb/c小鼠，按照杂交瘤细胞制备技术，得到6株产抗PagC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞；合成属间特异的含有线性表位的氨基酸...
- 马喆范红结郭晓
- 文献传递
- 信号肽对溶血素在大肠杆菌中跨膜转运的影响被引量：1
- 2018年
- 信号肽在引导外源蛋白的跨膜转运过程中具有重要作用。本试验通过PCR方法获得带有信号肽序列和不带有信号肽序列的溶血素基因,构建表达载体在大肠杆菌中进行诱导表达。经过溶血试验和免疫印迹试验证明缺失了信号肽的重组溶血素不能被跨膜转运至细胞外;带有信号肽的重组溶血素能够跨膜转运大肠杆菌细胞外。本试验为猪链球菌2型基因缺失弱毒疫苗的研究、细菌信号肽以及基因工程重组蛋白的可溶性表达进行了有益探索。
- 齐安生张秀娟宫枫举张兴进马喆潘子豪孙学强
- 关键词：溶血素信号肽大肠杆菌跨膜转运
- 沙门菌噬菌体混合制剂研制及体外杀菌效果评价被引量：1
- 2021年
- 为开发一种可用于体内或体外沙门菌防控的噬菌体混合制剂,使用丝裂霉素C从不同血清型沙门菌中诱导并纯化获得沙门菌噬菌体,初步分析其裂解谱和理化条件适应性。为拓展噬菌体制剂的裂解谱并综合发挥温和噬菌体pP14及烈性噬菌体pSQC73的优势,制成噬菌体混合制剂并评价其体外杀菌抑菌效果。结果表明:沙门菌噬菌体pP14可耐受50℃高温,在pH值4~12范围内活性均较稳定,和pSQC73混合制成的制剂在3 h内可有效减少鼠伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌的数量,在1 h内可使细菌数量降低90%以上,针对低浓度的细菌时,稳定杀菌抑菌时间可维持3~6 h。该制剂对体外畜禽养殖环境中常见沙门菌血清型具有较好的杀灭和抑制效果,有望作为环境杀菌剂甚至体内杀菌药物的开发潜力。
- 范亚娟袁宸马喆
- 关键词：沙门菌噬菌体
- 鼠伤寒沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析
- 2018年
- [目的]本试验旨在制备抗鼠伤寒沙门菌Pag C蛋白的单克隆抗体并初步分析其特异性和识别的抗原表位,为沙门菌抗体阻断ELISA检测方法的建立奠定基础。[方法]原核表达并纯化Pag C蛋白,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体;用生物信息学分析法获得Pag C蛋白在沙门菌属内保守的区段,合成相应多肽P1及P2用于单克隆抗体筛选和结合表位鉴定;最后采用免疫印迹方法对单克隆抗体与肠杆菌科其他细菌的交叉反应进行检测,评价其特异性。[结果]纯化后的Pag C蛋白相对分子质量约23×103;免疫小鼠后经2次亚克隆最终得到稳定分泌抗体的细胞株6株,标记为A、B、C、D、I、J;单克隆抗体的反应性试验结果显示6株单克隆抗体均能够识别Pag C蛋白;单克隆抗体的结合表位分析显示,J细胞株分泌的单克隆抗体可特异性识别P1序列;采用免疫印迹方法对J细胞株上清液进行特异性检测,证实该株单克隆抗体与变形杆菌、大肠杆菌O1和宋内志贺菌Pag C蛋白均无结合反应。[结论]成功获得1株与Pag C蛋白有良好结合活性且具有高度特异性的单克隆抗体,该株单克隆抗体的识别表位位于Pag C中沙门菌属内保守区段,可作为建立沙门菌抗体阻断ELISA检测方法的候选单克隆抗体。
- 郭晓汪远范红结马喆
- 关键词：沙门菌单克隆抗体合成肽特异性
- 马链球菌兽疫亚种毒力因子Fic结构域蛋白(FicSEZ)在细菌突破血脑屏障过程中的功能研究
- <正>马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp.zooepidemicus,SEZ)是引起猪链球菌病的主要病原之一,1975年曾在四川引起猪链球菌病爆发,导致百万头猪发病,死亡30多万头。猪群在感染...
- 马喆彭婕范红结
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型实时荧光RAA检测方法的建立及初步应用
- 2023年
- 根据猪圆环病毒2型(PCV2)Rep基因序列,设计引物及探针,建立了PCV2实时荧光重组酶介导等温扩增(recombinase-aid amplification, RAA)检测方法。该方法能在40℃恒温条件下20 min内对病原进行快速检测,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪传染性胃肠炎病毒、繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒3型和口蹄疫病毒均无交叉反应;对病毒核酸的最低检测限为21.2 copies/μL。用荧光PCR检测方法与建立的荧光RAA检测方法对66份临床样品进行检测,两种方法符合率为90.09%。结果表明,建立的PCV2实时荧光RAA方法适用于PCV2的快速检测。
- 崔进费佳宇张锋张慧尼博董雅琴房琳琳沙洲马喆魏荣
- 关键词：猪圆环病毒2型
