张锐
- 作品数：12 被引量：24H指数：4
- 供职机构：成都生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 1、4、5、7F和23F型肺炎球菌多糖国家参考品的研制被引量：1
- 2020年
- 目的研制1、4、5、7F和23F型肺炎球菌多糖国家参考品。方法根据《欧洲药典》9.0版的要求对1、4、5、7F和23F型肺炎球菌多糖候选参考品的核酸、蛋白质、总氮、磷、分子大小、糖醛酸、氨基己糖、甲基戊糖、O-乙酰基及细菌内毒素含量进行检测;采用1H核磁共振法对候选参考品进行鉴别分析。以企业参考品为标定标准品,组织3个实验室采用速率比浊法对肺炎球菌多糖候选参考品进行协助标定。结果1、4、5、7F和23F型肺炎球菌多糖候选参考品的质量分析结果符合《欧洲药典》9.0版标准;1H核磁共振结果确定候选参考品为1、4、5、7F和23F型肺炎球菌多糖。3个实验室测得5种候选参考品的多糖含量结果RSD均<10%,均值分别为370、320、330、432和422μg/mL。结论该候选参考品符合国家参考品的各项要求,可用于23价肺炎球菌多糖疫苗中各型多糖含量的检测。
- 陈琼张锐刘菊韩菲尹珊珊石继春叶强
- 关键词：肺炎球菌多糖参考品
- 人肺炎链球菌参考血清BW09的制备及其24个血清型IgG抗体浓度的赋值
- 2019年
- 目的制备成都生物制品研究所有限责任公司人肺炎链球菌参考血清,并对24个血清型的抗荚膜多糖抗体IgG浓度进行赋值。方法用23价肺炎链球菌多糖疫苗免疫50名健康成人,采集免疫后血浆,制备人肺炎链球菌参考血清BW09。采用世界卫生组织推荐的人血清肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG定量酶联免疫吸附测定方法,以兰州生物制品研究所有限责任公司的09CS为参考血清,对24个血清型别(1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、33F)抗体的IgG浓度进行赋值;以赋值后的BW09为参考血清,检测09CS,比较09CS新值与原赋值之间的差异;分别以BW09和09CS为参考血清,检测质控血清QC02、QC03和8个血清样品,比较两种参考品测定抗体浓度的差异,对新制参考血清赋值的准确性进一步验证。结果制备了人肺炎链球菌参考血清BW09;确定了BW09中24个血清型IgG抗体浓度。以BW09为参考血清检测09CS的新值与原赋值比较,各血清型的误差百分率绝对值均在10%以内。分别以BW09和09CS为参考血清检测质控血清QC02、QC03和8个血清样品的24个血清型IgG抗体,测得的检测值间呈线性相关。结论成功制备了人肺炎链球菌参考血清BW09,并对其中的24个血清型抗体IgG浓度进行了准确赋值。
- 陈娟陈秋璟张建华刘威陈祥朱小广舒成林张锐何建琴兰芳
- 关键词：肺炎链球菌IGG酶联免疫吸附试验
- 疫苗制品中抑菌剂去除研究进展被引量：2
- 2022年
- 本文依托国家药典委员会药品标准制修订研究课题(2020S03),对中国药典已收载添加抑菌剂的单剂量液体疫苗去除抑菌剂的可行性开展了研究,根据研究结果评估去除抑菌剂的风险效益,为《中国药典》修订提供技术支持。
- 朱德武瞿明霞闫亚楠姜崴李景良付博张飞伟杨勇张锐王晓娟孟丽杨汇川吴永林潘海龙
- 关键词：抑菌剂硫柳汞苯酚单剂量疫苗
- 植物蛋白胨培养基在23价肺炎球菌多糖疫苗生产中的应用被引量：4
- 2016年
- 目的对植物蛋白胨培养基应用于23价肺炎球菌多糖疫苗规模化生产的效果进行初步评价。方法采用植物蛋白胨培养基,按生产规模进行肺炎球菌发酵培养和分离纯化多糖,检测大罐培养浓度、培养液多糖含量及精制多糖各项质量指标,并与现有23价肺炎球菌多糖疫苗生产用动物蛋白胨培养基相比较。结果与动物蛋白胨培养基相比较,使用植物蛋白胨培养基可提高肺炎球菌大罐培养浓度以及培养液多糖含量;精制多糖收率明显提高,各项质量指标均符合企业注册标准要求。结论在生产规模下,使用植物蛋白胨培养基生产的肺炎球菌精制多糖质量符合企业注册标准,且可较大幅度地提高精制多糖收率,为植物蛋白胨培养基应用于23价肺炎球菌多糖疫苗规模化生产奠定了基础。
- 罗勇于荣清兰芳田继钊张锐
- 一种肺炎球菌荚膜固定试剂及荚膜肿胀染色方法
- 本发明提供了一种肺炎球菌荚膜固定试剂及荚膜肿胀染色方法，属于生物技术领域。本发明肺炎球菌荚膜固定试剂是体积分数为0.8％～10％的甲醛溶液。本发明首先提供了一种肺炎球菌荚膜固定试剂，该固定试剂具有固定荚膜和染色时锁色的效...
- 陈娟雷云张锐兰芳
- 23价肺炎球菌多糖疫苗的规模化生产及质量控制被引量：6
- 2012年
- 目的:扩大肺炎球菌发酵的培养规模,增加肺炎球菌多糖的收量,降低成品疫苗内毒素的含量,以提高肺炎球菌多糖疫苗的产能和质量;制备和标定企业用肺炎多糖参考品,及定性定量检测23价肺炎球菌多糖疫苗用的血清。方法:调整肺炎球菌培养参数及培养过程中糖、碱的补料方式、补料时间,放大肺炎球菌的发酵培养规模;在分段乙醇沉淀过程中添加速度和温度控制、调整乙醇浓度,在酚提过程中调控各种技术参数等,提高精制多糖的收量;控制加入生产过程中主要原辅材料的内毒素含量,并规范操作人员的行为习惯,降低肺炎球菌多糖疫苗成品的内毒素含量。标定自制多糖参考品以及用多糖免疫兔、鼠制备血清参考品。结果:肺炎球菌的发酵体积从500 L提高到1 000 L;精制多糖平均收量提高15%以上;内毒素平均含量控制在20 EU.mL-1以内;制备出23种型别的符合23价肺炎球菌多糖疫苗质量标准的多糖;获得3个型单抗和6个型的多抗。结论:23价肺炎球菌多糖疫苗的产量增加,疫苗质量得到了提升,自主化标准参考品研究进展迅速。
- 宋绍忠廖磊蒋宁张云张建华黎云东黄剑徐萌萌张锐石晓丽
- 关键词：肺炎球菌发酵
- 酸沉淀法纯化14血清型肺炎链球菌荚膜多糖工艺的建立被引量：5
- 2016年
- 目的建立一种14血清型肺炎链球菌荚膜多糖的酸沉淀法纯化工艺,以替代传统的苯酚抽提法。方法对建立的14型肺炎链球菌荚膜多糖酸沉淀法中的氯化钙终浓度（0、50、100、200、400 mmol/L）、pH值（3.5、4.0、4.5、5.0及5.7）及反应时间（0、1、2、4、6、8 h及过夜）进行优化。采用优化后的方法纯化3批14型肺炎粗制多糖,制备精制多糖,并进行理化指标、抗原性检测及核磁分析,同时与苯酚抽提纯化工艺进行比较。结果酸沉淀法的最佳工艺为：氯化钙终浓度50-100 mmol/L,pH值3.5-4.0,作用时间为过夜。采用该方法制备的3批14型肺炎精制多糖的蛋白和核酸杂质含量均较低,总磷、总氮、氨基己糖含量、多糖分子质量均符合企业注册标准,抗原活性和核磁共振图谱的分析结果表明其多糖结构无异常。结论酸沉淀法具有操作简便、效果显著及不需使用有毒有害试剂等优点,可用于纯化14型肺炎链球菌荚膜多糖。
- 李小波张锐谢媛媛程尊平陈娟江山
- 关键词：纯化荚膜多糖
- 肺炎球菌无动物源性成分培养工艺及纯化新工艺探索被引量：7
- 2012年
- 目的:比较无动物源性成分培养基和动物源性培养基培养肺炎球菌的差异;摸索不使用有机溶剂的肺炎球菌多糖纯化新工艺。方法:用无动物源性的原料替代肺炎发酵培养基中动物源性的成分,考察菌体密度和多糖收量的变化;采用柱层析纯化工艺收获肺炎球菌多糖,测定各阶段核酸、蛋白、多糖含量。结果:与疫苗生产所采用动物源性发酵培养基相比,无动物源性发酵培养基收获的1,7F,19A型菌体密度分别提高了1倍左右;发酵液中多糖含量分别提高了48%,50%和200%;多糖收量提高了30%～90%。纯化新工艺收获的17F,18C,19F精糖,核酸和蛋白的含量均远远低于企业的注册标准,HPLC检测多糖纯度分别为99.24%,98.92%和99.02%。结论:无动物源性成分发酵培养基适合于肺炎球菌生长,不仅增加了多糖产量,也提高疫苗的安全性;纯化新工艺能够收获合格的肺炎精制多糖。
- 张锐李小波徐萌萌黎云东吕雪艳张建华蒋宁陈文敏石晓丽宋绍忠
- 关键词：肺炎球菌多糖纯化工艺柱层析
- 反复冻融对23价肺炎球菌荚膜多糖稳定性的影响被引量：1
- 2020年
- 目的:考察反复冻融对23种血清型(1,2,3,4,5,6B,7F,8,9N,9V,10A,11A,12F,14,15B,17F,18C,19A,19F,20,22F,23F和33F)肺炎球菌荚膜多糖的影响。方法:各型多糖由-20℃至室温(约25℃)反复冻融1~3次,每个时间点抽取样品进行多糖抗原性(速率比浊法)、分子大小(HPSEC-MALLS/RI分析法)和特异性基团含量(糖醛酸、甲基戊糖、氨基己糖和O-乙酰基含量等4项指标)的检测,将检测结果与正常使用水平数据(冻融1次)进行比较分析。结果:反复冻融1~3次,23种血清型肺炎球菌荚膜多糖的抗原性、分子量分布、特异性基团含量均未发生显著变化(P>0.05或含量与初始值相差<5%)。结论:反复冻融3次以内不会导致荚膜多糖的降解,各型多糖均表现出较高的稳定性。
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- 关键词：肺炎球菌荚膜多糖
- 植物蛋白胨在肺炎链球菌培养基中的应用被引量：2
- 2014年
- 目的 用植物蛋白胨替代目前肺炎链球菌（pneumococcus,Pn）培养基中的动物蛋白胨,以保证生物制品的安全性.方法 比较大豆蛋白胨与胰蛋白胨的各种成分含量.分别以大豆蛋白胨和胰蛋白胨制备培养基进行9个型Pn大罐培养,比较两种培养基培养对Pn生长和粗制多糖含量的影响.结果 大豆蛋白胨的总氮含量、氨氮含量和消化系数与胰蛋白胨相近,但大豆蛋白胨的总碳水化合物含量（336.20 μg/g）明显高于胰蛋白胨的总碳水化合物含量（10.56 μg/g）.植物源性培养基培养获得的各型Pn浓度（t=3.851,P＜0.05）和粗制多糖含量（t=3.853,P＜0.05）明显高于动物源性培养基培养.结论 植物蛋白胨可替代动物蛋白胨来制备Pn培养基.
- 邓雪莲颜熙熙张锐王静毕俊虹
- 关键词：培养基
