张琼
- 作品数：49 被引量：136H指数：7
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市医药卫生科技项目湖南省自然科学基金更多>>
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- 过滤式微流控芯片上的循环肿瘤细胞分选被引量：3
- 2012年
- 目的本研究加工了一种封接有多孔聚碳酸酯薄膜的过滤式微流控芯片用于循环肿瘤细胞分选。方法依据肿瘤细胞与血细胞在粒径和变形能力方面的差别,这种微过滤式芯片可以选择性截留肿瘤细胞。循环肿瘤细胞分析整个过程,包括细胞过滤、固定、标记和计数,均在芯片上完成。使用8μm孔径滤膜,可以选择性截留Hela细胞。以Hela细胞为模型,实验优化了肿瘤细胞的分选条件并考查了分选效果。结果在500μL/min流速下,Hela细胞的回收率可以达到85%,而血细胞残留可以控制在3000个以下。截留细胞使用微小染色体维持蛋白7抗体标记,可以有效辨别肿瘤细胞与血细胞。结论基于过滤式微流控芯片上的循环肿瘤细胞分选方法简单、快速、廉价,有望成为一种实用的循环肿瘤细胞检测技术。
- 刘大渔严伟张琼马薇梁广铁Yi-Kuen Lee
- 关键词：循环肿瘤细胞微流控芯片多孔薄膜
- NF-κB介导的EBV-LMP1在Rat-1细胞转化和成瘤中的作用被引量：10
- 2007年
- 背景与目的:EB病毒潜伏性膜蛋白1(latent membrane protein1,LMP1)是病毒基因组编码的致瘤蛋白。本研究拟探讨LMP1在细胞转化和致瘤过程中的作用机制。方法:采用基因重组方法构建LMP1和显性负突变IκBα逆转录病毒质粒pLNSX-LMP1和pBabe-IκBα,分别与含有转录因子NF-κB启动子的荧光素酶表达质粒共转染293细胞,单光子检测仪测定LMP1对NF-κB的活化作用及IκBα对NF-κB的抑制作用;同时将2种重组病毒载体分别导入PA317细胞包装,获取2种逆转录病毒(retrovirus,RV),单独(RV-LMP1)或先后(先RV-LMP1后RV-IκBα)感染体外培养的Rat1细胞,检测转导细胞的集落形成能力及裸鼠成瘤能力。结果:当pBabe-IκBα与pLNSX-LMP1以1∶1共转染,IκBα能使LMP1活化NF-κB的作用降低75%;当以3∶1共转染,LMP1的活化作用几乎全部被抑制。IκBα能明显抑制RV-LMP1感染细胞的恶性表型:平皿克隆形成数从368±7和287±17分别降至59±6和8±2(n=3,P<0.001);软琼脂集落形成数从477±13和347±10分别降至61±15和95±7(n=3,P<0.001);裸鼠成瘤能力显著降低,瘤体积自(1.61+0.23)cm3降至(0.20±0.08)cm3(n=5,P<0.001)。结论:EB病毒LMP1促Rat1细胞恶性转化作用主要依赖NF-κB的活化。
- 张志伟贺智敏周敏张琼余艳辉陈主初
- 关键词：NF-ΚBIΚBΑ细胞转化
- EB病毒LMP1-CTAR3对NP69细胞增殖和蛋白质表达的影响被引量：14
- 2009年
- 为了探讨EB病毒潜伏性膜蛋白1(LMP1)第三个功能活性区域(CTAR3)在鼻咽上皮细胞NP69中的转化作用机制,采用逆病毒感染的方法,将浓缩的逆病毒RV-LMP1和RV-LMP1△232～351分别感染鼻咽上皮细胞NP69,建立NP69-LMP1与NP69-LMP1△232～351稳定表达细胞系.通过绘制生长曲线、平皿克隆形成试验和软琼脂集落形成试验比较野生型和突变型LMP1对NP69细胞增殖的影响,运用蛋白质组学方法鉴定NP69-LMP1与NP69-LMP1△232～351细胞间的差异表达蛋白,选用实时荧光定量RT-PCR与Western blot对其中部分蛋白质点差异表达进行验证.结果发现:a.突变型LMP1△232～351促NP69细胞增殖的能力较野生型LMP1明显降低(n=3,P<0.05);b.鉴定了LMP1-CTAR3在NP69细胞中参与调节的16个蛋白质(表达上调的蛋白质8个,下调的8个).c.实时荧光定量RT-PCR和Westernblot证实了部分上述蛋白质的差异表达.以上结果说明,LMP1-CTAR3是其发挥促细胞增殖的重要活性部位,可能通过参与调节G蛋白和异柠檬酸脱氢酶等蛋白质的表达而起作用.
- 张志伟张琼余艳辉欧阳咏梅贺智敏
- 关键词：EB病毒差异表达蛋白
- 一种温度可控的毛细管DNA快速提取方法的实验研究
- 目的优化一种基于毛细管的简便快速DNA磁珠法提取条件。方法以磁珠法原理在温度可控的毛细管中提取样品DNA,考察样品与裂解液的裂解时间、DNA与磁珠的结合时间、洗脱时间与洗脱温度对核酸提取的影响,采用正交试验对提取条件进一...
- 雷秀霞周小棉张琼梁广铁王秋平刘紫娟刘大渔
- 文献传递
- 外周血CEA和CA19—9在进展期胃癌新辅助化疗中的指导价值被引量：6
- 2012年
- 目的探讨外周血CEA和CA19-9等肿瘤标志物在胃癌侵袭转移、预后及新辅助化疗中的指导价值。方法回顾性分析广州医学院附属肿瘤医院322例进展期胃癌患者的临床资料（其中54例接受新辅助化疗）．采用电化学发光免疫分析检测外周血CEA和CA19—9等肿瘤标志物的表达．采用免疫组织化学方法检测新辅助化疗前后肿瘤组织CEA和CA19—9的表达。结果外周血CEA和CA19—9表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及肿瘤分期有关（均P〈0．05）。外周血CEA表达阳性和阴性患者5年总体生存率分别为17．0％和34．6％．外周血CA19—9表达阳性和阴性患者5年总体生存率分别为11．9％和34．8％，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。新辅助化疗可明显降低胃癌组织中CEA和CA19-9蛋白的表达水平（P〈0．05）．但对外周血CEA和CA19—9水平则无明显影响（P〉0．05）。结论外周血CEA和CA19—9表达水平与进展期胃癌的侵袭转移和预后有关：但对新辅助化疗患者筛选的价值有待进一步研究。
- 王佳泓麦聪洪健张琼唐鸿生唐云强崔书中
- 关键词：癌胚抗原外周血新辅助化疗
- 联合检测血hMAM、CK19、CEA、SBEM mRNA表达对乳腺癌早期微转移的诊断价值被引量：4
- 2012年
- 目的研究乳腺癌患者外周血hMAM、CK19、CEA和SBEM的表达及临床意义。方法应用荧光定量PCR技术检测100例乳腺癌患者外周血hMAM、CK19、CEA、SBEM mRNA的表达,并用乳腺纤维腺瘤患者70例及健康志愿者10例作为对照。结果乳腺癌组外周血hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA的阳性表达率分别为43%、36%、31%和46%,与对照组相比有显著差异。4种标记物联合检测比单项检测有更高的敏感度和准确性。结论乳腺癌患者外周血中的hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA联合检测显著提高了乳腺癌微转移检测的敏感度和准确性,对指导乳腺癌患者的治疗和预后判断具有重要意义。
- 张琼谭小军高蔚樱
- 关键词：乳腺癌HMAMCK19CEASBEM微转移
- 3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的比较被引量：3
- 2011年
- 目的比较3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的灵敏度和特异度,初步探讨其用于HBV DNA检测的临床价值。方法用3种免核酸提取PCR试剂盒分别检测30例慢性乙型肝炎患者及30例阴性参比血清标本中的HBV DNA,以荧光定量PCR结果为标准,比较3种试剂检测灵敏度和特异度。结果 3种试剂盒的HBV DNA阳性检出率分别为93.3%(28/30)、96.7%(29/30)、100%(30/30);3种试剂检测HBV阴性的特异度均为100%;3种试剂检测灵敏度A公司为103 IU/mL,B、C公司均为102 IU/mL。结论使用免核酸提取PCR试剂检测HBV快速、简便、高效,可用于临床HBV DNA快速检测。
- 王秋平陈斌张琼雷秀霞周小棉匡艳华
- 关键词：乙型肝炎HBV
- 弓形虫新基因wx2黄色荧光蛋白标记质粒的构建与鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的构建弓形虫新基因wx2黄色荧光蛋白标记的黄色荧光超表达质粒,为进一步研究弓形虫新基因WX2的功能提供工具。方法采用PCR扩增出编码wx2目的基因,用BglII,AvrII分别对PCR扩增产物和ptubYFP-YFP/sagCAT进行双酶切。将wx2定向克隆到tubYFP-YFP/sag-CAT;对重组质粒进行PCR,双酶切初步鉴定后做序列测定。结果特异扩增出预计wx2目的基因片段,大小为558bp;扩增产物成功连接到ptubYFP-YFP/sagCAT中,经PCR,双酶切及序列测定结果表明重组质粒中含有基因wx2读框。结论成功构建弓形虫新基因wx2黄色荧光超表达质粒wx2-tub-YFP sag/CAT。
- 吴翔谭逵张琼谢荣华官剑武舒衡平
- 关键词：弓形虫重组质粒
- PDMS-纸复合微流控芯片上的肝癌细胞三维培养
- 张琼刘大渔严伟梁广铁张其超周小棉
- 阿托伐他汀肝毒性机制的研究进展
- 阿托伐他汀为羟甲基戊二酰辅酶A (HMG-CoA)还原酶抑制剂,降脂效果良好,在冠心病的治疗中占据重要的地位.但阿托伐他汀的肝毒性是医学界普遍担心的问题,并且目前的机制不能很好的解释阿托伐他汀引起的肝毒性,但研究报道的几...
- 曾含清张琼彭文兴
- 关键词：心血管药物阿托伐他汀合理用药
- 文献传递
