闫志平
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术更多>>
- 初探流体切应力在肝癌细胞迁移中的作用
- 2019年
- 目的:探讨流体切应力在肝癌细胞迁移中的作用。方法:利用平行平板流动腔对培养的肝癌HepG2细胞施加1.4dyn·(cm2)-1稳定层流切应力,作用2h、4h、8h等不同时间后,采用划痕法观察细胞迁移的变化,同时以免疫荧光法观察细胞骨架F-actin变化,采用Westernblot测定相关蛋白的表达,采用透射电镜观察细胞间紧密连接的变化。在此基础上,分析在流体切应力作用下,肝癌细胞上皮标志物(E-Cadherin)和间充质标志物(N-Cadherin、Vimentin、Twist等)的表达和分布,及其对细胞紧密连接的影响。结果:流体切应力可促进HepG2细胞迁移,且呈时间依赖性(P<0.05);随着流体切应力加载时间的延长,肝癌HepG2细胞E-Cadherin表达下调,而N-Cadherin、Vimentin、Twist表达上调(P<0.05)。同时,HepG2细胞间紧密连接被打开;当撤除流体切应力,上述诱导作用则发生不同程度的逆转(P<0.05)。结论:流体切应力通过诱导肝癌细胞上皮-间充质转化引起细胞间紧密连接降低,进而促进细胞迁移。
- 刘子逸戴征伟王利娟闫志平徐彬
- 关键词：流体切应力肝癌细胞上皮-间充质转化细胞迁移
- 细胞骨架在自噬中的作用
- 2018年
- 细胞自噬主要通过清除细胞中异常或多余的结构,起到维持饥饿过程中物质和能量的代谢稳定的功能,而细胞骨架调控涉及膜重排和囊泡转运等多种细胞进程。细胞自噬受到微管和肌动蛋白丝的调控:微管促进自噬体的合成,与自噬体的移动密切相关;肌动蛋白丝支撑自噬泡的扩张,促进自噬体的移动以及与溶酶体的融合;非肌性肌球蛋白ⅡA参与调控自噬体形成初期的膜传递,肌球蛋白Ⅵ和肌球蛋白1C分别影响自噬体的成熟以及自噬体与溶酶体的融合。本文综述了细胞骨架系统对细胞自噬的多重调节,重点介绍肌动蛋白和肌球蛋白对自噬进程的调控,以期为研究自噬相关疾病的发病机制以及开创新的疗法提供一些新的思路。
- 闫志平曾烨沈阳刘肖珩
- 关键词：自噬细胞骨架微管肌动蛋白肌球蛋白
- 表面化学修饰纳米金粒子对肝癌细胞增殖和迁移的影响被引量：2
- 2015年
- 由于具有高强度的靶向性与优良的生物相容性等优势,纳米载药颗粒已被广泛应用于癌症的诊断和治疗中。然而当纳米颗粒被癌细胞识别并内吞后,其对癌细胞迁移行为的影响却鲜有报道。在本研究中,我们采用自组装技术(SAMs)成功制备了具有不同化学官能团(CH3、OH、COOH和NH2)的纳米金颗粒(Au NPs),通过透射电镜观察Au NPs在人肝癌细胞株HepG2细胞内的分布情况,采用MTT法检测其对该细胞增殖的影响,同时利用划痕损伤实验模型和Transwell小室模型法观察Au NPs对该细胞迁移的影响。结果显示,不同化学官能团修饰的纳米金颗粒被细胞内吞后主要分布在囊泡边缘或胞间连接处。此外,我们发现不同化学官能团修饰的纳米金均会对HepG2细胞的活性起到一定的抑制作用,且随着纳米金粒子浓度的升高,其细胞增殖能力逐渐降低。划痕模型和Transwell模型结果证实不同表面化学官能团修饰的纳米金颗粒对细胞迁移的影响均有差异,与对照组比较,NH2-NPs、OH-NPs组显著抑制了人肝癌细胞株HepG2的迁移行为。
- 洪锦勇尹红梅沈阳闫志平刘静霞周法庭夏庆刘肖珩
- 关键词：表面化学纳米金人肝癌细胞
- 肝癌肿瘤微环境对血管内皮细胞增殖及血管生成能力的影响被引量：6
- 2015年
- 研究间接共培养条件下肝癌细胞培养基对血管内皮细胞增殖及血管生成能力的影响,初步探讨肿瘤微环境下血管新生的分子机制。体外培养人脐静脉内皮细胞株EA.hy926,与肝癌细胞株HepG2条件培养基进行共培养;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测肝癌细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖的影响;血管管腔形成实验检测血管内皮细胞的血管生成能力。Western blot测定肝癌细胞条件培养基对血管内皮EA.hy926细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flk-1表达的影响。结果表明,EA.hy926细胞经HepG2条件培养基处理后,其增殖能力明显增加。接种于Matrigel胶的EA.hy926细胞经HepG2条件培养基刺激后,形成管腔数目增加,成血管能力明显增强;同时,其胞内VEGF及其受体Flk-1的表达呈时间依赖性上调。肿瘤微环境下肝癌细胞作用于血管内皮细胞,可促进血管内皮细胞的增殖并提高其血管生成能力。
- 夏庆尹红梅沈阳刘静霞闫志平洪锦勇周法庭刘肖珩
- 关键词：肝癌细胞血管内皮细胞细胞增殖血管生成
- 流体剪切力调节血管内皮细胞自噬的研究进展被引量：2
- 2016年
- 细胞自噬作为细胞的一种防御和应激调控机制,参与维持细胞的代谢平衡。在血管内皮细胞中,自噬是影响内皮细胞功能的一个重要因素。流体剪切力也是影响血管内皮细胞形态和功能的重要因素之一。而血管内皮细胞生理功能的维持在整个心血管系统的正常运转中起着重要的作用。我们主要对血管内皮细胞的功能,细胞自噬和流体剪切力对血管内皮细胞功能的调节作用,以及流体剪切力对血管内皮细胞自噬的调节作用等方面进行综述。
- 张莹莹曾烨刘静霞闫志平刘肖珩
- 关键词：流体剪切力血管内皮细胞自噬
- 力学刺激诱导细胞自噬的研究进展
- 2019年
- 自噬是细胞重要的自我保护机制,多种伤害性刺激激活的自噬具有维持细胞稳态和正常功能的作用.此外,自噬还参与调控恶性肿瘤、动脉粥样硬化等多种疾病的发生发展过程.体内细胞处于复杂的力学微环境中,力学刺激参与调控细胞自噬,如压力可诱导心肌细胞的自噬、牵张力调控运动系统多种细胞的自噬、流体剪切力可激活血管内皮细胞和肿瘤细胞的自噬.力学刺激诱导的细胞自噬依赖众多信号通路.细胞骨架作为重要的调节因子,不仅参与细胞力学信号转导,同时可参与调控细胞自噬.因此,细胞骨架与力学刺激诱导的细胞自噬密切相关.本文结合最新的研究成果,综述力学刺激对细胞自噬的影响及其分子机制,以期为研究力学刺激对细胞生物学行为的影响提供新的视角,进而为相关疾病的治疗提供新思路和分子靶点.
- 周芳闫志平马伦杰刘肖珩
- 关键词：自噬恶性肿瘤细胞骨架力学信号转导
- 流体剪切力诱导喉鳞癌Hep2细胞上皮-间充质转化被引量：3
- 2016年
- 目的探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对喉鳞癌Hep2细胞发生上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法对Hep2细胞加载140 m Pa的FSS,观察不同时间点细胞的形态学变化;划痕实验检测力学加载后Hep2细胞迁移能力的变化;共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F-actin的分布;Western blotting检测EMT相关蛋白的表达。结果 FSS力学加载后,Hep2细胞形态由多边形向梭形转变,撤销FSS后,细胞恢复初始的多边形;Hep2细胞迁移能力的增加依赖于FSS加载时间。FSS促使细胞骨架蛋白F-actin重排,从而增强Hep2细胞的迁移行为。FSS使Hep2细胞EMT标志蛋白发生了时序性变化。结论 FSS是诱导Hep2细胞发生EMT的一个重要物理因素。
- 张莹莹冯唐沈阳刘静霞闫志平刘双凤刘肖珩
- 关键词：流体剪切力喉鳞癌细胞细胞迁移上皮-间充质转化
- RhoA调控流体剪切力诱导的肝癌细胞自噬
- 2019年
- 目的自噬是细胞内形成自噬体,包裹受损的细胞器和蛋白质,进而与溶酶体融合,将自噬底物降解成小分子以重新利用的生物学过程。研究表明,力学刺激能够诱导哺乳动物细胞自噬,但其具体分子机制并不清楚。本研究的目的是探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对肝癌细胞自噬的影响及分子机制。方法采用蠕动泵和流动腔系统结合,在体外对肝癌细胞HepG2精确地加载FSS。利用透射电镜、免疫荧光和Western blot技术检测自噬体形成和自噬分子标志物LC3B和p62的表达,明确FSS诱导肝癌细胞自噬。构建RhoA干扰和过表达的肝癌细胞株,在此基础上研究RhoA在FSS诱导肝癌细胞自噬中的作用。结果肝癌细胞加载FSS(1 dyn/cm^2,0.5 h)后,具有典型双层膜结构的自噬体的数目和LC3B的荧光聚集点相对于静态培养组明显增多,同时细胞自噬的分子标志物LC3BⅡ/Ⅰ比值明显升高,p62表达降低,说明FSS诱导肝癌细胞自噬。通过生物学信息学分析,发现临床样本的肝癌组织RhoA蛋白表达明显高于癌旁组织,分子功能富集分析发现RhoA蛋白表达与自噬相关分子聚类呈正相关。成功构建RhoA敲减和过表达的细胞株,敲减RhoA后,FSS诱导的自噬分子标志物LC3BⅡ/Ⅰ比值降低,LC3B的荧光聚集点和自噬体数目明显减少;过表达RhoA后,FSS诱导的自噬分子标志物LC3BⅡ/Ⅰ比值进一步升高,LC3B的荧光聚集点和自噬体数目进一步增多,说明RhoA介导FSS诱导的肝癌细胞自噬。结论 RhoA调控FSS诱导的肝癌细胞自噬。
- 闫志平苏冠月冯唐沈阳曾烨刘肖珩
- 关键词：剪切力肝细胞肝癌自噬RHOA
- 血管内皮糖萼在炎症中的作用被引量：2
- 2015年
- 血管内皮糖萼是血管内皮细胞腔侧面的多糖蛋白复合物层。在生理状态下，其主要功能是调节血管内皮通透性及血细胞与内皮细胞间相互作用，介导血流剪切力诱导一氧化氮的释放等。炎症条件下，多种炎症介质导致血管内皮糖萼脱落，削弱了其血管保护功能；同时血管内皮糖萼的组分硫酸乙酰肝素可调控炎症发展，包括作为L-选择素的配体调节白细胞的滚动，形成趋化因子浓度梯度调节白细胞在血管腔侧面的移行及其与内皮细胞的紧密黏附，调控趋化因子由组织向血管腔的转运等。动脉粥样硬化作为一种炎症性疾病，其多种危险因子与血管内皮糖萼联系密切。综述了血管内皮糖萼在炎症和动脉粥样硬化中的作用。
- 闫志平刘静霞刘肖珩尹红梅曾烨
- 关键词：炎症硫酸乙酰肝素动脉粥样硬化
- 整合素信号通路参与低剪切力诱导HepG2肝癌细胞侵袭和迁移的分子机制研究
- (引言)肝细胞肝癌是最主要的肝部恶性肿瘤，全球每年有50 万人因肝细胞肝癌而死亡。由肝癌细胞的迁移和侵袭引起的肝癌转移是引起患者死亡的首要因素。然而，调控肝癌细胞迁移和侵袭的分子机制还不明确。最新的研究结果表明肿瘤微环境...
- 苏冠月汪小力冯唐余泓池闫志平沈阳刘肖珩
- 关键词：整合素HEPG2迁移
