徐涛
- 作品数：44 被引量：148H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 重组SRH融合蛋白工程菌发酵的工艺研究被引量：1
- 2012年
- 目的通过对影响表达SRH融合蛋白工程菌发酵的主要因素的研究,建立适宜SRH融合蛋白工程菌的发酵工艺。方法通过对发酵过程中的pH、溶氧调控、诱导温度、诱导时机及诱导时间进行优化建立SRH蛋白的发酵工艺,利用SDS-PAGE电泳分析表达情况。进一步利用离子交换和凝胶过滤层析对目的蛋白进行纯化,并对纯化后目的蛋白的溶栓活性和抗凝活性进行检测。结果优化后发酵条件为:发酵pH为7.0、溶氧为45%、菌体浓度达到OD600=8时开始诱导,诱导温度为41℃,诱导时间为4.5h。该发酵条件下得菌量为25g/L。SRH蛋白表达量为45%,并且90%以上为可溶性表达,纯化后蛋白纯度达95%以上,纯品SRH蛋白溶栓活性为1.80×104AU/mg,抗凝活性为100AU/mg。结论建立了SRH融合蛋白工程菌稳定的发酵工艺,该条件下SRH工程菌发酵蛋白表达量较高,多为可溶性表达,且杂蛋白较少,发酵产物具有生物学活性。
- 徐涛邹民吉王旻付文亮王圆圆刘深徐东刚
- 一种作为拮抗剂的血管生成素突变体及制备方法
- 本发明公开了属于结构分子生物学及生物抗癌技术领域的。利用生物信息学对Ang晶体结构进行了重新模建，在Ang晶体结构解析的基础上，模建了Ang的三维结构，并在其指导下构建了Ang分子N端缺失5个和C端缺失12个氨基酸的缺失...
- 徐东刚邹民吉冯健男王颖徐涛王嘉玺
- 文献传递
- CHD4在染色体重塑中的作用被引量：1
- 2014年
- 染色质作为真核细胞遗传信息,体内外各种因素的作用致使不断的产生损伤,但是细胞仍能保持正常的生长、分裂和繁殖,这与基因组稳定性和完整性保持,并且通过自身的损伤修复有着密切的联系。ATP依赖的染色质重塑是染色质重塑的最重要的方式之一,主要是利用ATP水解释放的能量,将凝聚的异染色质打开,协调损伤修复蛋白与DNA损伤位点的作用,通过对组蛋白的共价键修饰或ATP依赖的染色质重塑复合物开启了DNA的损伤修复的大门。CHD4/Mi-2β的类SWI2/SNF2 ATP酶/解螺旋酶域结构域保守性最强,这一结构域存在与多种依赖于ATP的核小体重构复合物。Mi-2蛋白复合物称为核小体重塑及去乙酰化酶NuRd(nucleoside remodeling and deacetylase,NuRD),是个多亚基蛋白复合物,Mi2β/CHD4是该复合物的核心成员。近来的研究发现,CHD4具有染色质重塑功能,并且参与DNA损伤修复的调控。CHD4羧基端的PHD通过乙酰化或甲基化识别组蛋白H3氨基端Lys9(H3K9ac和H3K9me),并且通过Lys4甲基化(H3K4me)或Ala1乙酰化(H3A Lac)抑制与H3、H4的结合,为染色质重塑提供了保障。Mi-2β/CHD4参与DNA损伤反应,定位于DNA损伤γ-H2AX的foci。沉默Mi-2β/CHD4基因,细胞自发性DNA损伤增多和辐射敏感性增强。表明CHD4在染色质重塑中具有重要的作用。
- 徐涛万传君王建校李珊珊顾永清
- 关键词：染色质重塑DNA损伤修复
- 一种IL-1RA-PEP融合蛋白及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种IL‑1RA‑PEP融合蛋白及其制备方法和用途。该融合蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO1所示。利用基因体外重组技术将细胞渗透肽PEP序列与抗炎分子IL‑1RA基因相融合，构建了融合蛋白表达载体，...
- 徐东刚张冬冬邹民吉付文亮徐涛
- 文献传递
- 新型低抗原性葡激酶的构建、表达及功能分析被引量：4
- 2007年
- 目的：降低野生型葡激酶（wild-type staphylokinase，wt-SAK）的抗原性，获得新型溶栓剂。方法：利用生物信息学分析野生型SAK抗原表位，将其分子内主要的抗原决定簇编码序列定点突变为丙氨酸密码子，将其N端抗原性较强的前10位氨基酸缺失。经过筛选从系列突变体中得到突变体NSAKV。结果：生物信息学分析突变后分子抗原性，结果表明其主要抗原表位消失。该突变体（NSAKV）与原核表达载体pET17b重组后，转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导获得高效表达，NSAKV占全茵总蛋白的40％-50％，以可溶性形式存在。经进一步纯化，纯度达98％以上，分子量与理论值相符。比活性2．616×10^4 AU／mg。经ELISA法和溶圈法测定，NSAKV与wt-SAK制备的兔抗wt-SAK抗血清的免疫反应性显著降低，经抗血清温育后wt-SAK活性下降程度远高于NSAKV。结论：突变体（NSAKV）保持了野生型SAK的活性，同时抗原性下降。
- 王旻王圆圆邹民吉徐涛刘深吴琛王嘉玺徐东刚
- 关键词：葡激酶抗原性突变纯化
- 兔动脉粥样硬化动物模型的建立和评价被引量：67
- 2008年
- 目的探索短时间内快速建立动脉粥样硬化家兔模型的方法和评价指标。方法用高胆固醇饲料喂养法与免疫反应损伤法结合建立兔动脉粥样硬化动物模型。分别于高脂饲养前、第4周和第8周测定血甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL)的含量、丙二醛的含量(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP),并于第8周后作形态学观察。结果饲养4周后,模型组血清中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量、丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP)(P<0.01)等显著性升高。饲养8周后模型肉眼及光镜下均可见典型动脉粥样斑块。结论此法能短时间内建立兔动脉粥样硬化模型。
- 王园园龙民慧周磊磊邹民吉徐涛刘深王嘉玺徐东刚
- 关键词：动脉粥样硬化家兔动物模型
- 一种重组人角质细胞生长因子-2突变体的活性稳定剂
- 本发明公开了属于生物技术领域的一种重组人角质细胞生长因子-2突变体(rhKGF-2M)的活性稳定剂。本发明通过对保护剂的组合方式进行筛选，将乳糖、右旋糖酐40和甘氨酸作为保护剂，将其溶于缓冲溶液中得到rhKGF-2M的活...
- 陈惠华邹民吉徐东刚徐涛
- 文献传递
- 重组人血管生成素的生物学功能研究被引量：1
- 2004年
- 为深入了解血管生成素的生物学作用,探讨其在免疫、造血、血管新生和神经方面可能的生物学功能,我们选择了多种细胞和组织进行实验分析ANG研究。结果表明:其对ECV304和COS7细胞具有促增殖作用,并可观察到明显的促ECV304细胞贴壁的作用;Ang具有明显地促KG-1a增殖的作用,其具体的分子机制有待于进一步的深入研究;Ang对造血干细胞形成集落没有作用,同时发现亦不存在与GM—CSF的协同作用;Ang缺乏直接对鸡胚背根神经节的作用,但可能对胶质细胞的生长有一定的影响。
- 邹民吉徐东刚马百坤彭善云蔡欣苏航徐涛刘深王嘉玺
- 关键词：血管生成素生物学功能促增殖作用集落ECV304细胞
- 角质细胞生长因子2突变体对小鼠放射性肠黏膜损伤的治疗研究被引量：1
- 2016年
- 目的研究角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)突变体对放射性肠黏膜损伤的治疗作用。方法将无特定病原体(specific pathogen free,SPF)C57BL/6J雌性小鼠随机分为模型组(A组)、静脉注射KGF-2突变体组(B组)、KGF-2突变体加骨髓移植组(C组)和单纯骨髓移植组(D组),用γ射线放射源60Co对小鼠进行单次全身照射,总剂量为12 Gy,另设正常对照组(E组)。通过分析小鼠照射后30 d存活率,照射后72 h小肠组织病理变化、凋亡与自噬情况,阐述KGF-2突变体对放射性肠黏膜损伤的治疗效果。结果 A组照射后9 d内小鼠全部死亡,C组30 d仍有70%存活。HE染色显示,C组小肠组织各级结构最为完整,免疫组化发现C组小肠隐窝处自噬水平升高,凋亡水平降低。结论 KGF-2突变体对放射性肠黏膜损伤有显著的治疗作用。
- 王艳峰邹民吉徐涛王园园徐东刚陈惠华苏航
- 关键词：骨髓移植
- 一种作为拮抗剂的血管生成素突变体及制备方法
- 本发明公开了属于结构分子生物学及生物抗癌技术领域的。利用生物信息学对Ang晶体结构进行了重新模建，在Ang晶体结构解析的基础上，模建了Ang的三维结构，并在其指导下构建了Ang分子N端缺失5个和C端缺失12个氨基酸的缺失...
- 徐东刚邹民吉冯健男王颖徐涛王嘉玺
- 文献传递
