张在鹏
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：集美大学水产学院鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心更多>>
- 发文基金：福建省海洋与渔业局重点项目国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- Caspase细胞凋亡通路在鱼类中的研究进展
- 2016年
- 介绍了Caspase概念与分类及其在哺乳动物中的研究情况,综述了鱼类Caspases基因的组织表达、在胚胎发育中的表达、在应激状态下的表达变化及鱼类Caspases分子的蛋白功能研究进展,并展望了鱼类Caspases今后的研究方向。
- 张在鹏冯建军
- 关键词：细胞凋亡半胱氨酸蛋白酶硬骨鱼类
- 大黄鱼酪氨酸激酶基因克隆及原核表达分析
- 2016年
- 为了研究大黄鱼(Larimichthys crocea)T淋巴细胞酪氨酸激酶(lymphocyte cell kinase,LCK)的基因结构和功能,通过RT-PCR和RACE技术克隆了大黄鱼LCK(Lc LCK)基因c DNA全长序列,并利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术对该基因在大黄鱼各组织器官和胚胎发育各时期的表达情况进行了检测与分析,同时构建了Lc LCK基因的原核表达载体,在大肠杆菌中进行了高效表达。结果表明,获得的Lc LCK基因全长为2 334 bp,开放阅读框为1 503 bp,编码501个氨基酸。该蛋白具有非受体酪氨酸激酶Src家族典型的SH3、SH2和Tyr Kc三个结构域,其N端含有GCXCS和CXXC基序,C末端出现2个与人类LCK基因中的Tyr394和Tyr505相一致的保守酪氨酸位点。系统发育树表明Lc LCK与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)LCK聚为一支;Lc LCK基因在雌雄大黄鱼各组织器官中均有表达,其中在主要免疫器官脾脏、头肾和鳃有高丰度表达,雌性个体的表达量要高于雄性个体;胚胎发育过程中,Lc LCK基因表达水平在多细胞期、囊胚期和原肠期较高,囊胚期达到峰值,卵黄栓形成期显著降低,眼泡出现期至孵出期持续下降,而初孵仔鱼期则有所回升;构建的原核表达载体p GEX-4T-2-LCK在大肠杆菌中成功表达,其新增Lc LCK重组蛋白条带在SDS-PAGE电泳检测中约为84 k D,与预期表达的分子量相符。大黄鱼Lc LCK在雌雄成熟个体的细胞免疫应答以及胚胎发育过程中T淋巴细胞免疫器官的形成密切相关。
- 张在鹏林鹏郭松林王艺磊张子平冯建军
- 关键词：大黄鱼胚胎发育原核表达
- 欧洲鳗鲡MyD88基因的克隆及其免疫功能分析被引量：7
- 2015年
- 髓样分化因子（myeloid differentiation factor88，MyD88）是TLR（toll-like receptor）信号通路的关键接头蛋白，在先天性免疫中发挥重要作用。实验首次克隆了欧洲鳗鲡MyD88基因cDNA全长序列，命名为AaMyD88，其全长为1539bp，开放阅读框为846bp，编码282个氨基酸。该蛋白三维丝带空间结构图与人类的MyD88十分相似，具有MyD88家族典型的死亡结构域和TIR（toll-1ike／IL-1receptor）结构域，其中TIR结构域中含有3个序列高度保守的boxl、box2和box3。同源性分析显示，欧洲鳗鲡MyD88氨基酸序列与斑点叉尾鲴相似性最高，为76．3％，与其他鱼类相似性为67．5％～73．2％，与哺乳动物相似性较低，为61．6％～62．6％。欧洲鳗鲡MyD88在系统进化树中与其他鱼类MyD88聚为一支，哺乳类以及两栖类MyD88分别聚为一支。实时荧光定量PCR检测发现，AaMyD88基因在欧洲鳗鲡各组织器官中均有表达，其中在肝脏中的表达量最高，心脏、肠、脾脏以及肾脏中也有较高的表达，而肌肉和鳃中的表达水平较低；欧洲鳗鲡经山羊IgG肌肉注射后，肾脏AaMyD88基因在第7天表达量有显著性提高，14d后恢复至正常水平，而脾脏AaMyD88基因表达水平从第7～21天持续显著上调，于第7天达到峰值，其表达量为肾脏的1．7倍；欧洲鳗鲡鳍细胞系经polyI：C处理后，AaMyD88基因表达水平在3h显著降低，6-48h均有显著升高，于12h达到峰值。LPS处理后的欧洲鳗鲡鳍细胞系AaMyD88基因表达水平在3h显著降低，6和12h显著升高，于12h达到峰值，24h后恢复至正常水平。polyI：C处理组MyD88基因表达水平在12～48h均显著高于LPS处理组。研究表明，MyD88在欧洲鳗鲡抵御外源微生物的免疫应答反应中发挥重要作用。
- 姚志刚冯建军王艺磊郭松林林鹏张子平张在鹏
- 关键词：欧洲鳗鲡基因克隆荧光定量免疫功能
