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携带人HCN4与Tbx3基因慢病毒的构建被引量：1: 2015年; 目的:构建携带人环核苷酸门控离子通道基因(HCN4)、发育调控相关转录因子基因(Tbx3)及增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为进一步研究Tbx3对HCN4异位表达及细胞起搏功能的影响提供高效的慢病毒转基因平台。方法:应用聚合酶链反应(PCR)方法,扩增HCN4及Tbx3基因,利用Gateway技术分别构建出HCN4-Tbx3-EGFP、HCN4-EGFP、Tbx3-EGFP、EGFP 4种慢病毒表达载体。经PCR及基因测序鉴定后,脂质体法转染293FT包装细胞,产生相应慢病毒,测定其滴度,荧光显微镜下观察EGFP的表达。结果:PCR和测序证实,构建出携带有HCN4-Tbx3-EGFP、HCN4-EGFP、Tbx3-EGFP及EGFP基因的慢病毒表达载体。分别转染293FT细胞后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,病毒滴度测定结果分别为4.7×107TU/ml、5.2×107TU/ml、4.5×107TU/ml、6.65×107TU/ml。结论:成功构建同时携带HCN4、Tbx3基因及EGFP基因的慢病毒载体并包装出具高效感染力的慢病毒颗粒,为通过HCN4联合Tbx3基因长期稳定的表达来构建窦房结细胞的实验研究提供高效稳定的转基因技术平台。; 董皓王丽君程晓曙李萍; 关键词：HCN4 慢病毒

人HCN4与Tbx3基因联合EGFP基因共表达慢病毒载体的构建: 目的构建携带人环核苷酸门控离子通道基因（HCN4）、发育调控相关转录因子基因（Tbx3）及增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）的慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为进一步研究Tbx3对HCN4异位表达及细胞起搏功能的影响提供...; 董皓李萍王丽君; 文献传递

人HCN4与Tbx3基因联合EGFP基因共表达慢病毒载体的构建: 目的构建携带人环核苷酸门控离子通道基因(HCN4)、发育调控相关转录因子基因(Tbx3)及增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为进一步研究Tbx3对HCN4异位表达及细胞起搏功能的影响提供...; 董皓李萍王丽君; 文献传递

携带人HCN4与Tbx3基因慢病毒共转染对胚胎干细胞生物学活性的影响: 目的 Tbx3（T-box3）基因是T-box（Tbx）基因家族的成员之一,该家族属发育调控相关转录因子基因家族,研究显示Tbx3可使心脏移植部位的窦房结标记基因大量表达;环核苷酸门控离子通道基因4（HCN4）是窦房结H...; 董皓李萍王丽君; 文献传递

人HCN4与Tbx3基因联合EGFP基因共表达慢病毒载体的构建: 构建携带人环核苷酸门控离子通道基因(HCN4)、发育调控相关转录因子基因(Tbx3)及增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的慢病毒载体，获得可供转染的滴度，为进一步研究Tbx3对HCN4异位表达及细胞起搏功能的影响提供高效...; 董皓李萍王丽君; 关键词：慢病毒载体荧光蛋白

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王丽君