唐嘉婕
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 甘露聚糖酶manB基因克隆以及在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的表达
- 甘露聚糖酶可以将甘露聚糖分解,得到甘露寡糖。如果将它和其它糖苷水解酶联合.作用,还可以得到甘露糖。目前,它已广泛地应用于饲料,食品,医药,造纸和脱胶等工业中。本论文从臭豆腐卤液中分离得到了一株短小芽孢杆菌Nsic-2,并...
- 唐嘉婕
- 关键词：甘露聚糖酶基因克隆酶学性质
- 一种用于在枯草芽孢杆菌中分泌表达外源蛋白的表达设备
- 本发明公开了一种用于在枯草芽孢杆菌内分泌表达外源蛋白的表达设备，依次包括以下元件：（1）P43启动子；（2）SD序列；（3）信号肽；（4）多克隆位点；（5）蛋白纯化标签。本发明提供的枯草芽胞杆菌表达设备可实现异源蛋白在枯...
- 魏巍魏东芝郭苏唐嘉婕马静
- 文献传递
- 一种用于在枯草芽孢杆菌中分泌表达外源蛋白的表达设备
- 本发明公开了一种用于在枯草芽孢杆菌内分泌表达外源蛋白的表达设备，依次包括以下元件：（1）P43启动子；（2）SD序列；（3）信号肽；（4）多克隆位点；（5）蛋白纯化标签。本发明提供的枯草芽胞杆菌表达设备可实现异源蛋白在枯...
- 魏巍魏东芝郭苏唐嘉婕马静
- 文献传递
- 短小芽孢杆菌耐碱性β-甘露聚糖酶基因的异源表达及其酶学特性被引量：10
- 2015年
- 【目的】本研究报道了一种新颖的耐碱性β-甘露聚糖酶基因的异源表达并研究其酶学特性,为其工业应用奠定基础。【方法】通过基因同源性分析以及染色体步移技术,从短小芽孢杆菌Nsic-2中克隆得到甘露聚糖酶基因(manB)。然后分别将manB基因在大肠杆菌BL21(DE3)和枯草芽胞杆菌WB800N中进行表达,并研究其酶学特性。【结果】克隆得到的manB基因序列有一个含1104 bp的开放阅读框,编码一种含有367个氨基酸的甘露聚糖酶(ManB)。经预测其蛋白序列N末端有一个含有31个氨基酸的信号肽。将ManB的氨基酸序列进行同源性分析,发现其与来源于短小芽孢杆菌CCAM080065的甘露聚糖酶具有很高的一致性,可以推测ManB属于糖苷水解酶家族26。manB基因在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达,得到甘露聚糖酶最高酶活为11021.3 U/m L。与其它甘露聚糖酶比较,ManB在碱性条件下表现出较高的稳定性,在p H6.0-9.0之间酶活相对稳定。纯化后的ManB比活可达4191±107 U/mg。酶反应动力学参数Km和Vmax分别为35.7 mg/m L和14.9μmol/(m L·min)。同时,在枯草芽胞杆菌WB800N中也成功地实现了重组蛋白ManB的分泌表达。【结论】β-甘露聚糖酶基因成功实现异源表达,并得到其酶学性质。本文是首次报道从臭豆腐卤液中分离菌株,克隆表达甘露聚糖酶,并描述其酶学特性。ManB在碱性条件下的酶活稳定性,使得其在工业应用中具备较高的潜在应用价值。
- 唐嘉婕郭苏王伟王伟魏巍
- 关键词：短小芽孢杆菌Β-甘露聚糖酶酶学特性
