邓盾
- 作品数：27 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国科学院南海海洋研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院战略性先导科技专项中国科学院重点部署项目更多>>
- 相关领域：生物学理学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 南海深海新颖低温脂肪酶的克隆、表达及酶学性质鉴定被引量：2
- 2016年
- 从南海深海放线菌Pseudonocardia antitumoralis SCSIO 01299中克隆一个脂肪酶基因lipase B5。lipase B5基因片段大小为972bp,编码的蛋白质具有323个氨基酸残基并与Pseudonocardia sp.HH130629-09中假定脂肪酶有98%的同源性。以p ET28a（＋）为载体,将重组质粒转化到E.coli BL21（DE3）中,实现lipase B5高效表达,并利用Ni-NTA亲和层析纯化lipase B5。Lipase B5最适反应底物为对硝基苯酚癸酸酯（p-NPD）,最适温度为30℃,最适反应p H为7.5。Lipase B5催化p-NPD水解反应的活性达到140.14U/mg,Vmax和Km分别为109.8μmol/min、0.976mmol/L,催化橄榄油的活力为32.019 7U/mg。Lipase B5在p H7.5~8.5保持良好的p H稳定性;在10～20℃低温下保持较高的酶活力,在10~40℃内具有温度稳定性。Lipase B5对大部分金属离子有很好的耐受性,低浓度的Li^＋、Mg^2＋对该酶活性有促进作用。Lipase B5对高浓度的Na Cl有很好的耐受性,在100mmol/L的Na Cl存在下,酶活性大约保持在103%。Lipase B5对多种短链醇类有机溶剂和表面活性剂有很好的耐受性,Triton X-100、Tween-80和Tween-20对lipase B5酶有激活作用。
- 曹莹莹邓盾张云孙爱君夏方亮胡云峰
- 关键词：有机溶剂耐受性
- 一种耐多种纯有机溶剂的脂肪酶及其编码基因和在多种高产酯类化合物合成中的应用
- 本发明公开一种耐多种纯有机溶剂的脂肪酶及其编码基因和在多种高产酯类化合物合成中的应用。本发明的脂肪酶SSL1970，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码所述的脂肪酶SSL1970的基因，其核苷酸序列如SEQ I...
- 胡云峰梁甲元张云孙爱君邓盾
- 文献传递
- 一个新颖南极微生物酯酶EST112-2的功能鉴定和在手性叔醇(S)-芳樟醇制备中的应用（英文）被引量：4
- 2018年
- 手性叔醇是合成药物和一些香料产品的非常重要中间体.芳樟醇是叔醇的一种,不同构型的芳樟醇具有不同的香气.因此如何研发合适的制备方法以获得高光学纯度的芳樟醇等叔醇是急需解决的技术问题.生物酶催化合成符合绿色化学的理念,但是由于叔醇化学结构中的空间位阻影响,使用生物酶催化的拆分反应制备高光学纯度的叔醇比较困难.对来自南极微生物的一个新的酯酶EST112-2进行了功能鉴定,并将其作为合成手性芳樟醇的生物催化剂.EST112-2可以通过不对称水解乙酸芳樟酯获得(S)-芳樟醇.对反应的p H、温度、共溶剂、底物浓度、催化剂用量以及反应时间等参数进行优化,EST112-2制备的(S)-芳樟醇的光学纯度大于66%,得率超过72%.EST112-2制备的(S)-芳樟醇的光学纯度要远远高于以往报道.
- 邓盾张云张云孙爱君赛克
- 关键词：生物催化动力学拆分
- 一种酯酶拆分(±)-扁桃酸甲酯的方法
- 本发明公开了一种酯酶拆分(±)-扁桃酸甲酯的方法。它是在酯酶EST04211存在的情况下，对(±)-扁桃酸甲酯进行水解，酯酶EST04211催化S-扁桃酸甲酯生成S-扁桃酸，然后再对R-扁桃酸甲酯和S-扁桃酸进行分离，所...
- 胡云峰梁甲元孙爱君张云邓盾
- 文献传递
- Bacillus sp.SCSIO 15029中一种耐高温Mn-超氧化物歧化酶的克隆、表达及鉴定被引量：2
- 2016年
- 本研究从南海沉积物中分离到一株耐高温菌Bacillus sp.SCSIO 15029,从其基因组中克隆了一个编码超氧化物歧化酶的基因BaSOD,并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了可溶性异源表达。随后,对重组BaSOD进行了酶学性质鉴定,BaSOD的最适p H为7.5,最适反应温度为40℃,酶活为5511.46U·mg–1。经鉴定,BaSOD是一种锰离子特异的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),该酶具有良好的热稳定性,在60℃处理30min酶活基本没有变化,在70℃下处理30min剩余酶活为71%,具有较好的工业应用前景。
- 邓盾张云孙爱君胡云峰
- 关键词：枯草芽孢杆菌超氧化物歧化酶
- 一种脂肪酶LIPASE6及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶LIPASE6及其编码基因和应用。本发明从海洋放线菌(Marinactinospora？thermotolerans)中克隆到了一个脂肪酶基因lipase6，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO.1的第...
- 胡云峰邓盾张云孙爱君梁甲元
- 文献传递
- 一种脂肪酶LIPASE6及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶LIPASE6及其编码基因和应用。本发明从海洋放线菌(Marinactinospora thermotolerans)中克隆到了一个脂肪酶基因lipase6，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第...
- 胡云峰邓盾张云孙爱君梁甲元
- 文献传递
- 一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用。本发明从海洋放线菌(Pseudonocardia antitumoralis)SCSIO 01299中克隆得到一个新的脂肪酶基因——脂肪酶基因lipase7，其核苷...
- 胡云峰曹莹莹邓盾孙爱君张云
- 文献传递
- 一个具有相反光学选择性的新颖海洋GDSL脂肪酶MT6用于(S)-1-苯基乙醇制备（英文）被引量：4
- 2016年
- 1-苯乙醇是一种重要的手性药物中间体,并且(S)-1-苯乙醇和(R)-1-苯乙醇均具有应用价值.怎样获得光学醇的1-苯乙醇是药物合成中的重要问题.传统的化学合成手段不仅反应过程复杂,而且反应条件剧烈,对环境污染严重,因此生物催化方法越来越受到重视.脂肪酶和酯酶以其出色的立体选择性和温和的反应条件而被广泛用于手性药物的拆分制备.但是之前的一些研究发现脂肪酶和酯酶大都对(R)-1-苯乙醇及其衍生物有选择性,而我们发现并鉴定的脂肪酶MT6的立体选择性则与这些脂肪酶/酯酶完全相反,具体体现在以下两个方面:(1)MT6能够特异地催化(S)-1-苯乙醇和乙酸异丙烯酯的转酯反应,生成(R)-1-苯乙醇;(2)MT6能够选择性地水解(S)-乙酸苏合香酯,生成(S)-1-苯乙醇.可见,利用MT6催化的转酯反应和水解反应可以巧妙地进行(S)-1-苯乙醇和(R)-1-苯乙醇的制备.MT6来源于深海放线菌Marinactinospora thermotolerans SCSIO 00652,属于GDSL家族脂肪酶第II类群,这一类群的脂肪酶绝大多数来自微生物.有关GDSL家族脂肪酶在手性拆分中的应用研究非常少.我们之前报道了MT6的克隆、表达、纯化及转酯拆分反应,本文重点考察了MT6通过水解反应制备(S)-1-苯乙醇的条件,优化了酶促水解拆分反应温度、有机共溶剂、pH、离子强度、酶用量、底物浓度、反应时间以及底物侧链长度等参数.研究发现,在反应体系中加入一定量的有机共溶剂能够大大提高产物(S)-1-苯乙醇的光学纯度,其中添加二氯甲烷获得的结果最为理想,可以将产物光学纯度从43%提高到89%,E值从2.84提高至22.82.经过优化,最佳反应温度为40°C,共溶剂二氯甲烷浓度为5%(体积分数),反应缓冲液为0.1 mol/L Tris-HCl(p H=7.0),酶用量为150 mg/m L,底物为15 mmol/L乙酸苏合香酯,反应时间控制在12 h.在此条件下,制备的(S)-1-苯乙醇的光学纯度可达97%,转化率可达28.5%,E�
- 邓盾张云孙爱君胡云峰
- 关键词：生物催化动力学拆分
- 一种新的酯酶及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种新的酯酶及其编码基因和应用。酯酶EST04211，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。酯酶EST04211的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明从来源于印度洋深海的芽孢杆菌SCSI...
- 胡云峰梁甲元孙爱君张云吴正超邓盾李洁田新朋
- 文献传递
