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侧链前体3,3-二甲基丙烯酸对梅岭霉素生物合成的影响被引量：1: 2005年; 研究梅岭霉素发酵过程中添加其主要组分M B 1所拥有的侧链前体-3,3-二甲基丙烯酸,使M B 1效价及其在总组分中的比例得到大幅度提高,达到提高产量并控制组分的目的。本文还对侧链前体的添加方式、添加时间以及添加浓度进行了优化。结果显示,0h时添加6mm ol/L的侧链前体其产量最高,M B 1效价比对照高出43%,其在总组分中的比例达到了52.7%。; 王平庄英萍储炬张嗣良; 关键词：梅岭霉素

铵离子对梅岭霉素生物合成的调控效应被引量：8: 2005年; 通过考察不同浓度的硫酸铵对梅岭霉素生物合成的影响,证实在低浓度下,硫酸铵可以促进梅岭霉素的生物合成,当其浓度大于5mmol L时,菌丝生长和产物合成均受到抑制,而耗糖速率却随着铵离子的浓度增大而增大。在此基础上,进一步测定了与梅岭霉素生物合成和糖代谢过程密切相关的6种酶的活性变化,结果表明较高浓度的铵离子对6_磷酸葡萄糖脱氢酶、柠檬酸合成酶、琥珀酸脱氢酶以及脂肪酸合成酶的活性均表现出一定的促进作用,而对缬氨酸脱氢酶和甲基丙二酰CoA羧基转移酶的活性进行抑制,由此产生的结果一方面是HMP途径和TCA循环得到了加强,促进了菌体的初级代谢,另一方面则是梅岭霉素生物合成所需前体的来源受到限制。; 王平庄英萍储炬张嗣良; 关键词：梅岭霉素铵离子生物合成酶活性

利用类弹性蛋白可逆相变和内含肽自切割功能高效制备TmSm抗肿瘤蛋白: 2013年; 目标蛋白TmSm是研发出的一种能够较强抑制肿瘤细胞生长和促进其凋亡的基因工程抗肿瘤蛋白,其由介导目的蛋白进入细胞的转导肽HIV-TAT突变体(Tm)和Survivin突变体(Sm)融合而成。原先的TmSm制备工艺以包涵体表达、变性和复性为主,其过程不仅复杂、收率低成本高,而且所得蛋白活性较低。通过将TmSm基因与编码类弹性蛋白(elastin-like polypeptides,ELPs)和内含肽(intein)的标签序列(EI)进行融合,利用ELPs的可逆相变特性和intein的自切割功能,经简单的温度及pH调控,获得了纯度为99.00%的TmSm蛋白。将纯化后的蛋白作用于肺癌细胞A549,24 h后MTT结果显示,63.21μg/ml的目的蛋白对A549的抑制率为57.83%;流式细胞仪检测结果表明,当TmSm浓度为40μg/ml时,24 h后细胞凋亡率为41.72%。因此,这种新型的以类弹性蛋白和内含肽介导的表达纯化技术不仅成本低廉,而且对抗肿瘤蛋白药物的质量提高具有重要应用价值。; 石磊唐莉莉马兴元王天文马飞王平; 关键词：内含肽肺癌细胞A549

梅岭霉素菌种选育与发酵过程优化研究: 梅岭霉素是由南昌链霉菌产生的一种具有十六元大环内酯结构的新型农用抗生素,具有广谱、高效、低毒等特点.本研究利用化学诱变剂EMS处理孢子并用链霉素进行抗性筛选,获得了产量较出发菌株提高20％以上的突变株.经50L发酵罐验证...; 王平; 关键词：梅岭霉素菌种选育酶活性发酵过程生物合成; 文献传递网络资源链接

由乙肝病毒核心蛋白(HBc-VLP)递载的流感通用疫苗Flu@uV设计构建、表征及初步活性研究被引量：1: 2016年; 目的:构建以HBc为载体的甲型流感病毒HA和M2e流感通用疫苗(Flu@u V),利用大肠杆菌BL21(DE3)表达系统,进行初步的蛋白表达及纯化。在此基础上,构建DNA流感通用疫苗。方法:利用全基因合成的序列为模板,成功构建HA-M2e-HBc、M2e-HBc、HBc、3M2e-HBc和3HA-3M2e-HBc基因的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE、Western blot和电镜检测其表达。将纯化的蛋白与弗氏佐剂共同免疫小鼠,取小鼠外周血进行流式细胞分析。通过荧光分析和Western blot初步验证DNA流感通用疫苗在人源胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达情况。结果:成功表达纯化了HA-M2e-HBc、M2e-HBc、HBc和3M2e-HBc四种蛋白,经电镜观察到30nm左右的蛋白纳米颗粒样结构。小鼠外周血流式细胞分析显示HBc和3M2e-HBc可以增加小鼠的免疫力,而HA-M2e-HBc和M2e-HBc对小鼠免疫力的提高没有影响。通过荧光检测和Western blot检测说明DNA流感通用疫苗在真核细胞中成功表达。结论:成功构建HBc与甲型流感病毒HA和M2e的病毒样颗粒,为流感通用疫苗的研制奠定了重要基础。; 张旭凡胡发彪马兴元王天文王平王晓丽; 关键词：免疫活性

用于超灵敏检测过氧化氢的新型生物探针: 活性氧(ROS)在细胞代谢中扮演着举足轻重的角色,不论是以调控还是靶向的方式产生,它们能够作为信号传导、繁殖、分化和凋亡的信使分子。ROS的一个主要成分HO,作为一个重要的信号分子,主要通过氧化不同蛋白质重要的巯基基团来...; 阳瑜红周胜敏王平; 关键词：细胞代谢活性氧生物探针; 文献传递

由乙肝病毒核心蛋白(HBc-VLP)递载的流感通用疫苗Flu@uV设计构建、表征及初步活性研究: 目的构建以HBc为载体的甲型流感病毒HA和M2e流感通用疫苗(Flu@uV)，利用大肠杆菌BL21(DE3)表达系统，进行初步的蛋白表达及纯化。在此基础上，构建DNA流感通用疫苗。方法利用全基因合成的序列为模板，成功...; 张旭凡胡发彪马兴元王天文王平王晓丽; 关键词：免疫活性; 文献传递

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王平