何海
- 作品数：6 被引量：38H指数：3
- 供职机构：华中农业大学植物科技学院药用植物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学一般工业技术更多>>
- 茯苓转录组SSR序列特征及其基因功能分析被引量：23
- 2015年
- 目的分析茯苓转录组中简单重复序列(SSR)信息,以及含SSR的基因功能,为开发茯苓新型分子标记奠定基础。方法利用MISA软件搜索转录组Unigene及基因组scaffold中SSR,对含SSR的Unigene使用Blast X比对nr及KEGG数据库,注释其功能,并聚类分析。结果在转录组序列中发现4.57%的Unigene序列含有2 075个SSR,平均17 010条Unigene出现1个SSR,SSR的平均长度19.59 bp;而基因组中SSR的平均密度54.00个/Mb,平均长度20.74 bp。在转录组中发现的241种碱基重复模式中,以(CG/CG)n比例最高(10.97%);以六核苷酸类重复数量最多(35.64%),以(ACCACG/CGTGGT)14最长(84 bp)。在1 887条含SSR的Unigene中,115条能被基因本体(GO)分类注释到细胞代谢进程、核酸结合等;1 223条Unigene能被注释到219个KEGG通路图中,其中314条注释到新陈代谢,297条注释到遗传信息处理。结论茯苓转录组SSR的类型丰富、多态性潜能较高,关联功能相关基因的SSR开发对茯苓目的性状的分子标记辅助育种具有巨大潜力。
- 何海郭继云马毅平周梦春王沫舒少华
- 关键词：茯苓SSR转录组生物信息
- 茯苓细胞色素P450还原酶基因的克隆与生物信息学分析被引量：3
- 2016年
- 目的从茯苓Poria cocos中克隆出细胞色素P450还原酶（CPR）基因,并对其进行生物信息学分析。方法利用茯苓转录组注释信息,通过RACE扩增得到茯苓CPR基因（Pc CPR）全长,并PCR得到对应基因组DNA序列。通过生物信息学方法,对该基因编码蛋白的特征进行分析,I-TASSER模拟出蛋白三级结构,MEGA构建蛋白系统进化树。结果获得含有完整开放阅读框（ORF）的c DNA全长2 514 bp（Gen Bank号为KP768251）,Pc CPR的基因组DNA 5 292bp（Gen Bank号为KP896487）,含4个外显子、3个内含子。基因编码732个氨基酸的蛋白,相对分子质量81 147,等电点（p I）为5.39,为不稳定性亲水蛋白,非分泌蛋白,且不具有信号识别功能。蛋白定位于内质网上,第7~22位氨基酸为跨膜区;具有2个黄素结合的保守结构域,FAD、NADP的结合位点各自在蛋白三级结构空间上相邻近。同源性分析显示,Pc CPR与担子菌CPR的相似性明显高于子囊菌CPR。结论成功从茯苓中克隆得到Pc CPR基因,为进一步研究Pc CPR及相关代谢提供基础。
- 何海郭继云舒少华王沫
- 关键词：茯苓基因克隆生物信息学分析RACE
- 分子印迹-液相色谱法测定土壤中毒死蜱及代谢物3,5,6-TCP残留量
- 以沉淀印迹聚合方法合成了毒死蜱分子印迹聚合物,该聚合物对毒死蜱有特异性吸附,对其结构相似物3,5,6-TCP,也具有一定的吸附性能,采用该印迹聚合材料作为固相分散萃取剂进行土壤中毒死蜱及3,5,6-TCP的残留测定,...
- 周梦春何海舒耀皋李春雨王沫
- 关键词：分子印迹毒死蜱
- 文献传递
- 菊薯中3种硫代磷酸酯类有机磷农药残留量的快速测定被引量：6
- 2015年
- 应用超分子印迹微球与逆基质固相分散加速溶剂萃取,采用气相色谱质谱（GC-MS）检测方法测定菊薯中3种硫代磷酸酯类有机磷农药（毒死蜱、喹硫磷和甲基立枯磷）残留量。以甲基立枯磷为模板分子制备对3种农药有特异性识别的分子印迹微球聚合物,然后作为固相分散剂进行加速溶剂萃取,再以气相色谱质谱法测定菊薯中3种农药的残留量,质谱条件为电子轰击离子源正离子选择离子监测模式。结果表明：3种农药的线性范围均为0.01~2.50μg/mL,相关系数为0.998 7~0.999 6;3种农药的检出限范围为0.174~0.526μg/kg,相对标准偏差为2.3%~9.9%,回收率为79.8%~104.5%。
- 周梦春何海舒耀皋王帆林舒少华王沫
- 关键词：有机磷农药
- 茅苍术提取物及其活性成分的杀蚊虫作用
- 2017年
- 用乙醇超声提取法提取茅苍术根茎物质,并进行杀蚊有效活性成分分离,采用幼虫浸渍法测定其对敏感型淡色库蚊、野生型地下家蚊和白纹伊蚊3龄幼虫的活性。结果发现:乙醇粗提物对淡色库蚊、地下家蚊和白纹伊蚊的24h LC_(50)值分别为22.71、36.30、23.51μg/mL。不同溶剂萃取物对白纹伊蚊生物活性测定结果表明,活性成分主要在正己烷相中,其LC_(50)为16.87μg/mL;而乙酸乙酯相和水相成分基本无活性。进一步对正己烷萃取物以硅胶柱层析分离的不同成分进行生物活性测定,活性成分主要为H2和H6;白纹伊蚊3龄幼虫在其25μg/mL质量浓度下24h死亡率均达100%。结果表明茅苍术的杀虫活性成分对敏感型淡色库蚊、野生型地下家蚊和白纹伊蚊的幼虫均具有较强生物活性,具有新型杀蚊剂开发潜力。
- 何海张香梅王璋倩AHN Youngjoon王沫
- 关键词：茅苍术淡色库蚊白纹伊蚊活性成分
- 分子印迹-基质固相分散萃取-高效液相色谱法测定土壤中4种硫代磷酸酯类农药残留量被引量：7
- 2015年
- 建立了一种高效、选择性强的分子印迹-基质固相分散萃取结合高效液相色谱测定土壤中4种硫代磷酸酯类农药(毒死蜱、甲基立枯磷、甲基毒死蜱、甲基对硫磷)残留量的方法;并以甲基立枯磷为模板分子,以甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,且n(模板分子)∶n(功能单体)=1∶4,以乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,以偶氮二异丁腈为引发剂,采用沉淀印迹聚合方法,合成了甲基立枯磷高分子印迹聚合微球(MIPs);以MIPs作为土壤样品提取液的基质固相分散吸附剂,采用HPLC检测处理后的样品,流动相为V(乙睛)∶V(0.1%乙酸水溶液)=3∶1,流速0.8 m L/min,进样量20μL,检测波长210 nm,采用Agilent Eclipse XDB-C8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃。结果显示:MIPs对甲基立枯磷有特异性吸附,对其结构相似物毒死蜱、甲基对硫磷和甲基毒死蜱也具有一定的吸附性能;在0.01~5.0 mg/kg范围内,各药剂的质量浓度与相应的峰面积间呈良好的线性关系,相关系数r为0.997 5~0.999 8;4种硫代磷酸酯类有机磷杀虫剂的检出限(LOD)为0.452~1.226μg/kg;添加回收率为76%~96%,相对标准偏差(RSD)为2.8%~7.3%。该方法可用于土壤中硫代磷酸酯类有机磷杀虫剂残留量的测定。
- 周梦春何海舒耀皋舒少华王沫
- 关键词：分子印迹聚合物固相分散萃取土壤
