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斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢组织石蜡切片自发荧光的研究: 2015年; [目的]利用卵巢组织石蜡切片自发荧光观察斑节对虾卵母细胞发育。[方法]研究采用普通石蜡切片技术获得斑节对虾发育各期卵巢组织切片,采用苏木青/伊红染色后利用3种自发荧光对卵巢组织切片进行观察,探讨绿色自发荧光下观察卵母细胞不同发育阶段需要的最适曝光时间。[结果]卵巢组织切片直接自发荧光观察卵母细胞的发育较HE染色后观察更为方便、有效,且切片可以继续用于后续试验。3种自发荧光中,绿色自发荧光的观察效果最好。[结论]该研究可为快速观察斑节对虾卵母细胞发育和高效利用试验材料提供了新思路和新方法。; 郭松赵超傅明骏江世贵杨其彬邱丽华; 关键词：斑节对虾卵母细胞发育组织切片自发荧光

斑节对虾cyclinH基因的原核表达和蛋白纯化被引量：1: 2015年; cyclin H是细胞分裂周期调控中的重要因子,研究斑节对虾cyclin H对阐明斑节对虾卵巢发育机制有重要意义。构建了斑节对虾cyclin H的重组表达质粒p ET21a/cyclin H,利用原核表达技术进行诱导表达获得目的蛋白,并用亲和层析技术进行纯化,用SDS-PAGE、Western blot和质谱联用分析诱导和纯化结果。结果表明,斑节对虾cyclin H重组蛋白获得了表达,纯化的蛋白经鉴定为cyclin H重组蛋白;在22℃和37℃培养条件下,重组蛋白在LA和YTGA两种培养基上均能被诱导表达;22℃条件下,部分融合蛋白为可溶性表达;在37℃培养条件下LA培养基获得较好的效果,且均以包涵体形式存在。; 郭松傅明骏赵超江世贵杨其彬彭超李伟杰邱丽华; 关键词：斑节对虾原核表达

斑节对虾细胞周期蛋白Y基因克隆与原核表达被引量：4: 2015年; 为了研究细胞周期蛋白Y（cyclin Y）在斑节对虾（Penaeus monodon）卵巢发育中的作用,从斑节对虾转录组数据中筛选获得cyclin Y基因部分序列,采用SMART-RACE方法克隆得到斑节对虾细胞周期蛋白Y （Pm-cyclin Y）基因cDNA全序列。Pm-cyclin Y基因cDNA全长1576 bp,其中包含108 bp的5′非编码区（5′UTR）和439 bp的3′非编码区（3′UTR）以及1029 bp的开放阅读框（ORF）,可编码342个氨基酸。生物信息学分析显示,其编码的氨基酸序列有1个保守的周期蛋白框（cyclin box）同源结构域（172~257 aa）,预测的分子量约为37.6 kD,理论等电点6.64。实时定量 PCR 显示其 mRNA 在卵巢的表达量显著高于其他组织（P〈0.05）；并且在卵巢5个不同发育期都有表达,在III期卵巢中的表达量最高。本研究通过原核表达方法对Pm-cyclin Y进行重组表达,为其蛋白质功能方面的研究奠定了基础。; 李伟杰傅明骏赵超郭松江世贵周发林杨其彬邱丽华; 关键词：斑节对虾 CYCLIN 分子克隆实时荧光定量PCR 原核表达

斑节对虾细胞周期蛋白依赖性激酶 8 基因及其编码的蛋白: 本发明公开了斑节对虾细胞周期蛋白依赖性激酶8基因及其编码的蛋白，本发明提供的基因不仅为研究斑节对虾细胞周期蛋白依赖性激酶8在卵巢发育中的作用奠定基础，而且可以为斑节对虾养殖过程中所出现的性腺发育参差不齐的情况从分子层面提...; 邱丽华傅明骏赵超郭松江世贵周发林

斑节对虾细胞周期蛋白依赖性激酶8基因及其编码的蛋白: 本发明公开了斑节对虾细胞周期蛋白依赖性激酶8基因及其编码的蛋白，本发明提供的基因不仅为研究斑节对虾细胞周期蛋白依赖性激酶8在卵巢发育中的作用奠定基础，而且可以为斑节对虾养殖过程中所出现的性腺发育参差不齐的情况从分子层面提...; 邱丽华傅明骏赵超郭松江世贵周发林; 文献传递

斑节对虾细胞周期蛋白T基因的克隆和表达分析被引量：1: 2016年; 真核生物的转录调控多发生在转录的延伸阶段,细胞周期蛋白T(cyclin T)是细胞转录的重要调控因子。文章利用RACE技术获得斑节对虾(Penaeus monodon)cyclin T(Pmcyclin T)c DNA全长,其全长为3 421 bp,其中开放阅读框(ORF)3 135 bp,编码1 044个氨基酸;生物信息学分析显示,该氨基酸序列含有一个周期蛋白家族特有的CYCLIN保守区,并含有N-糖基化位点和磷酸化位点;经BLAST同源性分析显示,细胞周期蛋白T编码的蛋白与柑橘木虱(Diaphorina citri)、切叶蚁(Acromyrmex echinatior)等多种节肢动物有很高的同源性;利用qRTPCR技术对Pmcyclin T在不同组织及卵巢发育各时期的mRNA水平的表达谱进行了研究。结果表明,细胞周期蛋白T在斑节对虾的心、卵巢等7个组织中均有表达,其中卵巢中表达量显著高于其他组织(P<0.05);在卵巢发育各时期中,细胞周期蛋白T在Ⅲ期表达量最高。; 郭松傅明骏赵超李伟杰江世贵杨其彬周发林邱丽华; 关键词：斑节对虾基因克隆卵巢发育

斑节对虾CDK8基因的克隆表达和原核表达及蛋白纯化: 细胞周期蛋白激酶8(CDK8)是转录调控的关键因子。本实验在构建和测序c DNA文库获得斑节对虾(Penaeus monodon)CDK8(Pm CDK8)部分序列的基础上,利用RACE技术获得Pm CDK8 c DNA...; 郭松傅明骏赵超李伟杰江世贵杨其彬邱丽华; 关键词：斑节对虾基因克隆原核表达卵巢发育; 文献传递

斑节对虾细胞周期蛋白T基因及其编码的蛋白: 本发明公开了一种斑节对虾细胞周期蛋白T基因及其编码的蛋白，旨在提供一种为研究斑节对虾细胞周期蛋白T在卵巢发育中的作用奠定基础，而且可以为斑节对虾养殖过程中所出现的性腺发育参差不齐的情况从分子层面提供理论基础基因及其蛋白，...; 邱丽华傅明骏赵超郭松江世贵周发林; 文献传递

斑节对虾cyclin G2基因克隆及不同刺激下的表达分析: 2016年; 细胞周期蛋白G2(cyclin G2)是细胞周期中的重要调控因子。该研究初步探讨斑节对虾(Penaeus monodon)细胞周期蛋白G2(Pmcyclin G2)在卵巢发育中的作用,利用RACE技术克隆获得4075bp Pmcyclin G2 c DNA全长,其开放阅读框(ORF)1161bp,编码386个氨基酸。利用荧光定量PCR技术研究了Pmcyclin G2组织表达模式,结果显示,Pmcyclin G2在斑节对虾的心脏、血淋巴、肝胰腺、卵巢等组织中均有表达,其中肌肉中表达量最高;卵巢发育不同阶段Pmcyclin G2的表达分析则表明,Pmcyclin G2在III期表达量最高;注射5-羟色胺(5-HT)能诱导卵巢Pmcyclin G2基因表达升高,多巴胺(DA)则抑制卵巢中Pmcyclin G2基因表达。利用原核表达技术获得了cyclin G2的体外重组蛋白,Western Blot分析证实重组蛋白为cyclin G2蛋白。此结果为进一步研究该蛋白的功能提供了条件。以上研究结果表明,Pmcyclin G2基因可能与斑节对虾卵母细胞发育有密切关系,该结果可为进一步探究斑节对虾卵巢的发育机理提供理论依据。; 谢波波郭松傅明骏赵超杨其彬焦宗垚邱丽华; 关键词：斑节对虾卵巢发育 5-羟色胺多巴胺

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郭松