董成亚 作品数:28 被引量:63 H指数:5 供职机构: 首都医科大学附属北京天坛医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 北京市重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
一种蛋白质及编码该蛋白质的基因,其用于抗肿瘤的用途及作为抗肿瘤药物辅助药剂的应用 本发明涉及蛋白及其编码基因,进一步涉及一种蛋白质及编码该蛋白质的基因,及其用于抗肿瘤的用途及其作为治疗肿瘤药物辅助药剂的应用。为了解决现有治疗肿瘤、特别是胶质瘤治疗效果不理想的问题,本发明提供一种蛋白质及编码该蛋白质的基... 王雅杰 任远 李昊文 董成亚 李奇 刘丽STR分型技术鉴定后两株U87胶质瘤细胞系生物学特性评价 2018年 目的对经过短串联重复序列(short tandem repeats,STR)分型检测技术鉴定后的两株U87胶质瘤细胞系[(美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection,ATCC)数据库中U-87 MG Glioblastoma-Astrocytoma Human和德国微生物菌种保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen,DSMZ)数据库中U-87 MG]进行细胞生物学特性测定,对两株细胞用于后续研究工作的可能性进行评价。方法分别采用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验等方法,并结合显微镜下细胞形态学特征,比较两株肿瘤细胞系的增生、迁移及侵袭能力等生物学特性。结果 (1)CCK-8法:细胞生长曲线提示细胞增生能力差异无统计学意义(P>0.05)。(2)划痕实验:两细胞系迁移能力差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Transwell实验:两细胞系迁移能力差异无统计学意义(P>0.05),DSMZ数据库中U-87 MG细胞侵袭能力高于ATCC数据库中U-87 MG GlioblastomaAstrocytoma Human细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论两株U87细胞系均可反映脑胶质瘤的生物学特性,可用于后续科研实验。两细胞系的增生、迁移能力差异无统计学意义,侵袭能力差异具有统计学意义,可根据实验目的选择合适的细胞系。 张文丽 孔凡虹 何露 董成亚 王雅杰关键词:胶质瘤 生物学特性 小鼠白介素18与白介素1β转化酶共表达载体的构建及真核表达 被引量:4 2005年 为了制备白介素18前体(proIL-18)和白介素1β转化酶(ICE)共表达肿瘤疫苗,从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒(pIRES-proIL-18-ICE),经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,筛选稳定表达细胞株。转染细胞RT-PCR及转染细胞培养上清IL-18ELISA检测结果表明,肿瘤细胞可以表达并分泌成熟的IL-18。培养上清的IL-18可显著诱导ConA刺激的小鼠脾细胞产生IFN-γ,表明其具有功能活性。生长曲线和细胞周期实验证实与未转染的肿瘤细胞相比,转染空载体pIRES、pIRES-proIL-18、pIRES-ICE、pIRES-proIL-18-ICE基因对肿瘤细胞生长增殖无明显影响。IL-18白血病瘤苗的成功制备表明,利用pIRES载体在同一肿瘤细胞中共表达的proIL-18和ICE能够完全模拟生理过程,在真核细胞内有效酶切,分泌出成熟并有功能活性的IL-18;构建的IL-18瘤苗为进一步评价其在小鼠体内的抗白血病效果奠定基础。 徐玢 马小彤 董成亚 石洋 林永敏 宋玉华 吴克复关键词:肿瘤疫苗 人mda-7/IL-24对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用 被引量:3 2008年 目的:探索人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用。方法:用RT-PCR法检测11个造血系统恶性肿瘤细胞系mda-7受体的转录情况。用脂质体转染法将构建的重组真核表达载体pTarget-IL-24转染K562细胞。以RT-PCR和Western blotting方法检测转染的K562细胞mda-7的表达情况;通过MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Annexin-Ⅴ/PI检测mda-7/IL-24对K562细胞增殖、集落形成、细胞周期和凋亡的影响;以裸鼠移植瘤模型观察mda-7对K562细胞移植瘤的治疗作用。结果:在11个造血系统恶性肿瘤细胞系(NB4、HL60、CEM、Namalwa、Jurkat、KG1a、U937、K562、Ramos、J6-1、HEL细胞)中没有检测到完整mda-7受体的表达。转染mda-7的K562细胞能显著表达mda-7mRNA及其蛋白;其与转染空载体和未转染的K562细胞相比,细胞增殖活力以及集落形成能力明显下降(P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05),但细胞凋亡率没有明显变化。裸鼠体内实验证实了mda-7/IL-24明显抑制K562细胞移植瘤生长(P<0.01)。结论:mda-7/IL-24对白血病细胞系K562具有明显的体内外抑制作用,该作用与mda-7/IL-24引起细胞周期G0/G1期阻滞有关。 杨宾霞 马小彤 董成亚 张芳 林永敏 段永娟关键词:基因治疗 慢性粒细胞白血病 细胞周期 生物被膜分散方式的研究进展 被引量:5 2005年 临床上生物被膜与感染的慢性迁延不愈密切相关,而生物被膜菌的分散又会造成感染的反复急性发作,给临床感染的有效控制带来很大困难。生物被膜菌的分散过程受到了遗传和环境等多因素的调控,主要是通过蜂式分散、块式分散和毯式分散3种形式来实现的。深入进行生物被膜基础研究对改变目前临床感染治疗的窘境有重大意义。 董成亚 马小彤关键词:生物被膜 长链非编码RNA CRNDE调控胶质瘤细胞凋亡 被引量:6 2016年 目的探讨长链非编码RNA CRNDE在胶质瘤细胞凋亡中发挥的功能和可能的作用机制。方法将CRNDE基因干扰siRNA转染人胶质瘤U87细胞系,利用PE Annexin-V/7-AAD双染,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并利用Western方法检测细胞凋亡关键蛋白的表达变化。结果 siRNA干扰CRNDE表达的胶质瘤细胞中,细胞凋亡程度增加,凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase7、Caspase9、PARP表达量明显升高。结论 CRNDE可能通过降低凋亡相关蛋白活性及表达水平,抑制胶质瘤细胞凋亡能力。 李昊文 季楠 董成亚 李子瑞 王雅杰关键词:长链非编码RNA 脑胶质瘤 细胞凋亡 小鼠β-防御素2和IL-18瘤苗协同抗白血病作用研究 肿瘤免疫方面的最新进展表明,有效的抗肿瘤免疫需要天然免疫和获得性免疫的协同作用。本研究将天然免疫及获得性免痊调节剂MBD2和IL一18分别转染小鼠淋巴细胞白血病L121a细胞,制备细胞瘤苗观察抗肿瘤免疫效果,并探讨MBD... 马小彤 徐玢 董成亚 张芳 林永敏 吴克复关键词:Β-防御素2 IL-18 白血病 免疫治疗 基于微电子阻抗技术实时细胞监测系统在细胞凋亡检测时点选择中的应用 被引量:3 2016年 目的探讨基于微电子阻抗技术的实时细胞监测系统用于确定细胞凋亡最佳检测时间点。方法应用顺铂诱导胶质瘤细胞U251凋亡,使用实时细胞监测系统连续74 h监测不同药物浓度作用于U251后细胞指数的动态变化,根据药物作用时间与细胞指数关系曲线确定凋亡最佳检测时间点,采用流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果通过实时监测发现,2.5μg/m L、5μg/m L、10μg/m L顺铂分别在作用49 h、60 h和74 h,U251细胞指数值达到最低;在这些时间点,流式细胞仪检测细胞凋亡率分别达到高峰(15.6±1.4)%,(34.2±7.6)%,(63.9±4.6)%。结论应用实时细胞监测系统可进行细胞凋亡最佳检测时间点的辅助判断。 董成亚 孔凡虹 李奇 李昊文 贺文艳 刘丽 王雅杰关键词:实时系统 凋亡检测 实时无标记细胞检测技术在细胞培养质量控制中的应用 被引量:2 2016年 目的以恶性胶质瘤细胞系(U87)为细胞模型研究实时无标记细胞分析技术(real-time cellular analysis,RTCA)在细胞系培养质量控制中的应用。方法记录三株不同来源U87细胞系72小时实时细胞增殖曲线,并结合显微镜下细胞的形态学特征,判断细胞系是否发生变异。结果与购自协和的细胞株U87-1相比,U87-2、U87-3显微镜下形态学发生了明显的改变,同时细胞增殖曲线结果也显示出明显的变异。结论实验室存在细胞系在培养过程中发生变化的现象,若使用发生变化的细胞,将影响后续的实验结果。通过RTCA技术在细胞系培养时进行质量监控非常必要。 孔凡虹 董成亚 何露 王雅杰关键词:胶质瘤细胞系 HOXA基因簇在胶质瘤中的表达分析 2023年 目的探讨HOXA基因簇各蛋白编码基因mRNA表达水平及与预后的关系。方法采用生物信息学方法分析癌症基因组图谱(TCGA)_GBMLGG数据库中669例不同级别胶质瘤和TCGA_GBM数据库中489例胶质母细胞瘤组织HOXA基因簇编码基因mRNA的表达情况,分析其与胶质瘤临床病理分级和预后的关系。纳入2011年1月至2015年12月经术后病理证实的70例胶质瘤组织和手术切除的正常脑组织20例,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测HOXA基因簇各蛋白编码基因在胶质瘤中的表达水平,并分析其与总生存时间(OS)的关系。结果HOXA基因簇由HOXA1、HOXA2、HOXA3、HOXA4、HOXA5、HOXA6、HOXA7、HOXA9、HOXA10、HOXA11、HOXA13共11个蛋白编码基因组成。TCGA_GBMLGG数据库分析显示,HOXA基因簇中11个编码基因的相对表达量随胶质瘤级别的升高而升高,在Ⅳ级胶质瘤中的相对表达量高于Ⅱ~Ⅲ级(P<0.001)。在胶质母细胞瘤组织中,除HOXA6基因外,其他10个基因的相对表达量均高于正常脑组织(P<0.001)。HOXA基因表达水平在胶质母细胞瘤组织中最高,其次为星形细胞瘤,最少为少突星形细胞瘤和少突神经胶质瘤。HOXA基因簇在IDH1野生型胶质瘤中的表达水平均高于IDH1突变型胶质瘤(P<0.001)。HOXA基因簇高表达与较短的OS有关(P<0.001)。在70例临床胶质瘤组织中,Ⅱ~Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤组织中HOXA基因簇的相对表达量高于20例正常脑组织,其表达水平随胶质瘤级别的升高而升高(P<0.05)。70例临床胶质瘤患者的中位OS为20.9个月,HOXA基因低表达组患者的中位OS明显优于高表达组(P<0.001)。结论胶质瘤组织中HOXA编码基因表达水平升高,可能参与了胶质瘤的发生、发展过程;HOXA基因簇高表达是预后不良因素,可作为预测预后的生物标志物。 董成亚 黄永进 史明明 霍续磊 王燚 李子瑞 李奇关键词:脑胶质瘤 预后