王静
- 作品数：27 被引量：79H指数：6
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅重点项目四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 苹果酸酶在葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性中的作用研究
- 2012年
- 本研究旨在研究不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性过程中苹果酸酶(Malic enzyme,ME)的活性及其mRNA表达情况,以探讨ME在鹅肝脂肪变性中的作用。根据鸡ME基因序列保守区设计引物,通过RT-PCR、克隆测序等技术扩增鹅ME基因;分离、培养四川白鹅原代肝细胞,添加不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导肝细胞脂肪变性,检测细胞内甘油三酯(TG)含量、ME活性及其mRNA表达情况。结果发现,鹅ME基因跟原鸡同源性最高;与对照组相比,葡萄糖及其与胰岛素协同作用均能显著促进肝细胞内甘油三酯(TG)沉积,且呈现出剂量递增效应,而胰岛素对细胞内TG含量影响不明显;与对照组比较得出:ME的活性和mRNA表达水平随着葡萄糖浓度升高而增加,30mmol.L-1葡萄糖具有明显的促进作用(P<0.05);低浓度(50nmol.L-1)胰岛素显著增加ME的活性和mRNA表达水平(P<0.05),当胰岛素浓度达到200nmol.L-1时,ME的活性和mRNA表达水平受到一定抑制;葡萄糖和低浓度胰岛素(50nmol.L-1)协同能促进ME的活性和mRNA表达水平。本研究扩增获得了鹅ME基因部分序列,且发现葡萄糖和胰岛素协同可以增强ME的活性和mRNA表达水平,从而显著增加肝脏中TG的含量,诱导鹅肝脂肪变性。
- 夏露潘志雄唐慧向梳瑕王静韩春春李亮王继文
- 关键词：苹果酸酶葡萄糖胰岛素
- 普通小麦/欧山羊草后代抗旱生理指标的鉴定及评价
- 赵慧张玮王静李芙蓉纪军李俊明
- 关键词：抗旱性生理指标
- 文献传递
- 一种高质量的3’RNA-seq建库方法及其用途
- 本发明开发了一种高效的3'RNA‑seq方法，即简化的poly(A)锚定测序(SiPAS V2)。该方法特定地调转了文库中二代测序接头，使测序时R1端读取文库的非poly(T)端，并更加适用于标准PE150测序格式。通过...
- 鲁非王静徐俊杨晓寒
- 文献传递
- 普通小麦/欧山羊草后代抗旱生理指标的鉴定及评价
- <正>干旱是影响农业生产的最主要非生物胁迫因子,干旱缺水已成为制约世界粮食生产的主要因素。小麦在世界农业的生产与发展中占有举足轻重的地位,因此,创制、研究和利用小麦抗旱基因资源对于保障中国乃至世界粮食安全具有重要意义
- 赵慧张玮王静李芙蓉纪军李俊明
- 关键词：抗旱性生理指标
- 文献传递
- 一种基于RNA-Seq转录组的基因分型方法
- 本发明涉及一种基于3’RNA‑Seq转录组的基因分型方法。利用本发明的基因分型方法，能够改进现有技术中分型操作复杂且准确度低的问题，实现低成本且高效准确的基因分型。本发明的基因分型方法对于动物和植物群体高通量基因分型具有...
- 王静杨晓寒许嵩鲁非徐俊
- 吐温-20和吐温-80对稻瘟病菌孢子萌发的影响被引量：4
- 2016年
- 为了研究吐温-20和吐温-80对稻瘟病菌孢子萌发的影响,从而明确稻瘟病菌喷雾接菌时孢悬液的配置方法和保存时长。本试验通过配置不同浓度的吐温-20和吐温-80的孢悬液,将其放置不同的时间,然后通过显微镜观察吐温-20和吐温-80对体型不同的稻瘟病菌孢子萌发的影响。结果发现稻瘟病菌孢子在水、吐温-20和吐温-80的溶液中均可萌发,且在吐温-20和吐温-80的溶液可以生成两条或多条芽管。吐温-20和吐温-80均能抑制稻瘟病菌孢子的萌发,但与吐温-80相比,吐温-20对孢子萌发的抑制作用较小。与孢子体型较大的稻瘟病菌Zhong10-8-14相比,体型较小的Guy11的孢子对吐温-20和吐温-80的抑制作用更敏感。由此表明,吐温-20更适合用来制作稻瘟病菌的孢悬液。新鲜配置的孢悬液,只要吐温-20的浓度不高于0.50%,且放置时间不超过2 h,孢子的萌发率不会显著降低,依然可以用来进行喷雾接菌试验。
- 冉莉朱紫薇杨超许有嫔李沛华贺闽王静陈学伟李伟滔
- 关键词：稻瘟病菌萌发吐温-80
- 一种mRNA 3’末端混合建库的反转录引物及其用途
- 本发明涉及一种mRNA 3’末端混合建库的反转录引物及其用途。利用本发明的反转录引物，以总RNA为起始进行文库构建，能够改进现有技术中的测序数据质量低的问题，并实现低成本mRNA 3’末端混合建库。本发明的反转录引物对于...
- 鲁非王静徐俊
- 文献传递
- 一种植物抗病性蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种植物抗病性蛋白及其编码基因与应用。该植物抗病性蛋白，是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列3的氨基酸残基序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列3的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和...
- 朱立煌尚俊军陈学伟王静徐吉臣
- 文献传递
- 应用GST pull-down技术筛选水稻抗稻瘟病蛋白PID3互作蛋白的研究被引量：6
- 2015年
- Pid3是从水稻中克隆获得的编码CC-NBS-LRR类蛋白的稻瘟病抗病基因。为了更深入地研究Pid3编码蛋白PID3介导的稻瘟病抗性的分子调节机制,我们应用GST pull-down结合质谱技术,对水稻抗稻瘟病蛋白PID3的互作蛋白进行了鉴定和分析。首先,成功构建了带有GST标签且能够表达PID3的CC-NBS结构域的融合蛋白表达载体p GEX6P1-PID3CC-NBS,经诱导表达和GST beads纯化后获得GST-PID3CC-NBS融合蛋白。我们以Pid3的转基因水稻纯合株系Pid3-TP309为研究材料,分别用对其致病和不致病的稻瘟病菌生理小种ZB13和ZHONG-10-8-14接种,然后取叶片分别提取获得两组总蛋白。用纯化后的蛋白GST-PID3CC-NBS分别与两组总蛋白共培养后,利用GST pull-down技术获得了分别在抗病、感病反应中能与PID3CC-NBS互作的两组候选蛋白。通过质谱技术鉴定这些蛋白的氨基酸序列,比对分析其在抗病、感病途径中与PID3结合的差异性,我们共筛选出31个只在PID3介导的抗稻瘟病反应中能与其特异结合的PID3互作蛋白,这些互作蛋白包括受体激酶、LRR类蛋白、ATP酶、磷酸羧化酶和离子通道蛋白等,广泛参与了调控细胞程序化死亡、胁迫防御反应、物质与能量代谢和信号传导等多个生物学过程。本研究探寻了PID3介导的抗病信号转导过程的关键因子,研究结果为揭示PID3介导的稻瘟病抗病分子机理奠定了良好基础。
- 赵文王静李伟滔李晓兵朱立煌陈学伟陈学伟
- 关键词：抗稻瘟病GST稻瘟病菌
- 水稻白叶枯病抗性基因Xa21和稻瘟病抗性基因Pi-d2激酶蛋白质在毕赤酵母中的表达及条件优化
- 2010年
- 【目的】白叶枯病和稻瘟病是最主要的水稻病害,Xa21是水稻白叶枯病抗性基因,Pi-d2是稻瘟病抗性基因,二者都编码类受体激酶蛋白质。本研究旨在毕赤酵母系统中表达XA21和PI-D2激酶蛋白质。【方法】用Xa21和Pi-d2的激酶区PCR产物,构建了pPICZαA-Xa21K、pPICZαA-Pi-d2K重组质粒,酶切及测序验证后,将重组质粒线性化,转化到毕赤酵母菌株中,系统地比较了不同酵母菌株(KM71、GS115、X33),不同甲醇浓度(1%、2%、3%),不同pH(pH5、pH6、pH7、pH8)值,不同诱导时间(24h、48h、72h)条件下激酶蛋白质的表达情况。【结果】XA21和PI-D2激酶蛋白质可以在毕赤酵母中表达,但表达的蛋白质不能分泌到培养基上清中,而只能在菌体中检测到,对表达条件的系统比较发现,毕赤酵母菌株KM71和X33、2%的甲醇诱导浓度、pH5和48h以上的诱导时间有利于激酶蛋白质的表达,最后我们在酵母裂解物上清中获得了纯化的考染可见的激酶蛋白质。【结论】在毕赤酵母中表达了XA21和PI-D2激酶蛋白质,为下一步生化特性研究奠定了基础。
- 李晓明王书利李莉云李晓兵王静刘国振
- 关键词：水稻白叶枯病稻瘟病抗病基因毕赤酵母蛋白质表达
