王浩
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南华大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：湖南省医药卫生科研计划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-328通过C/EBPα表达上调抑制K562细胞增殖被引量：3
- 2015年
- 目的:本研究旨在探讨miR-328(microRNA-328)对慢性髓系白血病(CML)急变期细胞株K562增殖的影响及C/EBPα的介导作用。方法:构建miR-328靶向基因及抑制基因的真核表达载体hsa-miR-328及hsa-miR-328-inhibitor,并分别通过脂质体lipofectamineTM2000介导转染至K562细胞;通过荧光显微镜观察细胞转染情况;通过实时荧光定量RT-PCR检测miR-328、C/EBP mRNA的表达水平;Western-Blot方法测定C/EBPα蛋白的表达;CCK-8检测细胞增殖的情况。结果:本研究通过成功构建重组真核表达载体hsa-miR-328、hsa-miR-328-inhibitor;将载体转染K562细胞,24 h后在荧光显微镜下可见荧光细胞,表明载体成功转入K562细胞,48 h和72 h后可见荧光细胞数逐渐增多。实时荧光定量RT-PCR证实miR-328在K562细胞中成功表达,而miR-328对细胞C/EBPαmRNA表达无明显影响;通过Western blot检测发现miR-328恢复C/EBPα蛋白表达;细胞活力检测提示miR-328抑制K562细胞的增殖。结论:成功构建并转染miR-328基因至K562细胞,miR-328通过恢复C/EBPα的表达抑制K562细胞的增殖。
- 曹锦霞文锋王浩廖佩李君君
- 关键词：C/EBPΑK562细胞细胞增殖
- EGCG通过mTOR通路拮抗低氧诱导的PC12细胞的凋亡与自噬被引量：5
- 2014年
- 目的:氯化钴(cobalt chloride,Co Cl2)诱导的低氧具有神经毒性,可以诱导神经细胞的凋亡和自噬。茶多酚活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)具有一定的抗细胞凋亡和自噬的作用,但作用机理尚未完全阐明。近年来有研究报道,雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)通路参与了多种神经功能的调节,如神经细胞的分化成熟、抗氧化应激等。为此,我们用Co Cl2诱导低氧引起细胞的凋亡与自噬,从m TOR通路探讨EGCG拮抗Co Cl2诱导低氧引起细胞凋亡与自噬的作用机制。方法:研究使用Western blotting方法测定Co Cl2以及EGCG处理后m TOR和自噬蛋白beclin-1的表达,使用ELISA法检测细胞caspase-3表达,CCK-8检测细胞活力,免疫荧光法观察LC-3在胞核内的表达。结果:Co Cl2诱导低氧引起了细胞凋亡与自噬,而EGCG通过m TOR通路拮抗了Co Cl2诱导低氧引起的细胞凋亡与自噬,阻断m TOR通路则逆转了EGCG对神经细胞的保护作用。结论:EGCG通过m TOR通路拮抗了Co Cl2诱导的低氧引起的PC12细胞的凋亡与自噬。
- 曹锦霞王浩王红卫游咏
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯雷帕霉素靶蛋白低氧凋亡自噬
- EGCG通过mTOR通路拮抗高糖诱导的PC12细胞的凋亡
- <正>目的探讨EGCG(Epigallocatechin Gallate,表没食子儿茶素没食子酸酯)通过mTOR(Mammalian target of rapamycin,雷帕霉素靶蛋白)通路拮抗高糖诱导的PC12细胞...
- 游咏王浩曹锦霞
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