张于芝
- 作品数:3 被引量:15H指数:1
- 供职机构:江苏省人民医院更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 新生期小鼠胰岛细胞凋亡及其机制的研究
- 2014年
- 目的 观察新生期小鼠胰岛细胞凋亡的变化特点并分析细胞凋亡相关基因的表达差异,初步探讨相关机制.方法 采用胶原酶消化法分离纯化第1、3和8周小鼠胰岛细胞,以磷脂结合蛋白V-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测细胞凋亡率.透射电镜观察胰岛细胞凋亡形态,原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(Tunel)/胰岛素免疫荧光双染法检测凋亡.采用实时定量PCR技术检测凋亡相关基因mRNA的表达.采用Western blotting技术检测促凋亡基因和抗凋亡基因的表达.多组间统计数据比较采用单因素方差分析.结果 (1)新生期小鼠胰岛细胞凋亡率在3周时显著增加,明显高于1周和8周[分别为(10.53±2.61)%、(1.80±0.69)%、(3.26±0.94)%,F=32.09,P<0.01].透射电镜结果显示新生第3周小鼠胰岛细胞核出现凋亡早期改变.3周时Tunel/胰岛素双阳性细胞数明显高于1周和8周.(2)新生期小鼠胰岛细胞凋亡相关基因的表达呈动态变化,3周时,促凋亡基因Fas和FasL的mRNA表达均明显高于1周和8周(分别为1.53±0.21、1.00±0.00、0.46±0.24,F=24.85,P<0.01;2.63±0.56比1.00±0.00、0.52±0.14,F=32.77,P<0.01),抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达明显低于1周和8周(分别为0.30±0.23、1.00±0.00、1.71±0.00,F=78.06,P<0.01).(3)3周时,Fas、FasL和裂解的Caspase-3蛋白表达均明显高于1周和8周(分别为2.05±0.16、1.00±0.00、0.59±0.24,F=61.47,P<0.01;3.54±0.86、1.00±0.00、0.72±0.26,F=27.04,P<0.01;5.74±0.59比1.00±0.00、3.11±0.20,F=128.79,P<0.01);Bcl-2蛋白表达明显低于1周和8周(0.62±0.13比1.00±0.00、1.90±0.10,F=151.08,P<0.01).结论 Fas/FasL以及Bc1-2介导的细胞凋亡信号通路可能参与新生期小鼠胰岛细胞凋亡的调控.
- 高莉徐一力朱嘉瑜张于芝赵静章辉武晓泓
- 关键词:胰岛凋亡基因
- 不同取样和提取方法对甲状腺结节细针穿刺标本提取RNA检测目的基因的影响
- 2014年
- 目的 :比较不同取样和提取方法对甲状腺结节细针穿刺(fine needle aspiration,FNA)标本提取RNA检测目的基因结果的影响。方法:以单独穿刺与穿刺针冲洗液2种方式收取FNA标本,以TRIzol法和Qiagen法2种方法提取RNA,利用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测甲状腺细胞相关基因,比较不同方法对RNA质与量及RT-PCR结果的影响。结果:102例FNA标本均提取了RNA,RT-PCR结果显示,GAPDH的检出率达97.06%,TG为93.14%,其余依次为TPO、TSHr、NIS。在单独穿刺样本中,TRIzol法提取的RNA浓度及总量均大于Qiagen法,但差异未达统计学意义(P>0.05)。2种方法所提取RNA的吸光度值及PCR成功率也无统计学差异(P>0.05)。在冲洗液标本中亦未发现Qiagen法与TRIzol法在RNA浓度、总量、吸光度值及PCR成功率之间有显著差异(P>0.05)。在TRIzol组中,单独穿刺与穿刺针冲洗液2种取样方式对其RNA浓度、RNA总量、吸光度值以及PCR成功率的影响均无统计学意义(P>0.05)。在Qiagen组中,不同取样方式对其RNA浓度、RNA总量、OD值以及PCR成功率的影响亦无统计学意义(P>0.05)。结论:FNA标本可以成功提取RNA并进行基因检测。单独穿刺、穿刺针冲洗液2种取样方式以及TRIzol法、Qiagen法2种RNA提取方法均可用于FNA标本RNA的提取。
- 张于芝吕颖钺陈欢欢崔岱刘晓云王知笑段宇杨涛武晓泓
- 关键词:甲状腺结节甲状腺细针穿刺RNA提取
- TIRADS、BSRTC与BRAF^V600E检测在甲状腺结节良恶性病变鉴别诊断中的比较研究被引量:15
- 2016年
- 目的:比较甲状腺影像报告和数据系统( TIRADS )、Bethesda 甲状腺细胞病理报告系统( BSRTC)以及BRAF^V600E检测3种方法在甲状腺结节良恶性病变鉴别诊断中的价值,评估不同方法联合应用的意义。方法选取于南京医科大学第一附属医院行B超引导下细针穿刺活检( FNAB)的128例甲状腺结节患者(128例结节),予超声、细针穿刺细胞学(FNAC)检查及BRAF^V600E检测,超声及FNAC分别根据TIRADS、BSRTC进行诊断。构建受试者工作特征( ROC)曲线评价各方法的诊断价值。结果 TIRADS的敏感性、特异性、ROC曲线下面积(AUC)分别为74.3%、84.5%、0.794。 BSRTC敏感性与TIRADS相同,但特异性(98.3%)较高。 BRAF^V600E检测的敏感性、特异性(82.9%、100.0%)均高于前两种方法,诊断价值最大(AUC=0.914)。不同方法联合应用均可以提高诊断的敏感性和准确率。其中,BSRTC联合BRAFV600E检测具有最高的准确率(98.4%),较高的敏感性、特异性(98.6%、98.3%),其AUC(0.984)显著高于其他方法(P〈0.05)。结论 BRAF^V600E检测在甲状腺结节良恶性病变鉴别诊断中的价值优于TIRADS和BSRTC。BSRTC联合BRAF^V600E检测具有最高的诊断效率。
- 张于芝徐婷李霄巩海燕崔岱刘晓云陈欢欢蒋琳叶新华姚青张智弘沈美萍段宇杨涛武晓泓
- 关键词:甲状腺结节细针穿刺活检