张姣丽
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用蛋白质组学技术发现结肠癌相关生物标志物的研究进展被引量：3
- 2014年
- 寻找出精确又能提供诸多信息的生物标志物将给结肠癌的早期诊断及选择最优治疗策略方面带来显著意义.蛋白质组学技术是肿瘤研究中的一个重要工具,近年来许多研究通过它发现了诸多潜在的结肠癌生物标志物.
- 张姣丽贾小芳吕建新张丽军
- 关键词：结肠肿瘤蛋白质组学
- 大鼠酒精性肝纤维化肝非实质细胞蛋白质组学研究被引量：1
- 2014年
- 目的本文研究酒精对肝非实质细胞蛋白质表达的影响,以探讨酒精性肝纤维化的发病机制。方法大鼠酒精灌胃导致其发生肝纤维化。采用James染色法检测大鼠肝脏的病理学变化,通过Percoll密度梯度离心富集肝非实质细胞,再通过二维凝胶电泳(2DE)分离非实质细胞的蛋白质,经考马斯亮蓝(G250)染色,采用液相色谱串联质谱鉴定差异表达的蛋白质,并对部分差异蛋白质采用实时定量RT-PCR和免疫印迹的方法进行验证。对于2DE胶上的蛋白质点,采用两样本t检验的方法,对于RT-PCR分析,采用Mann-Whitney U检验进行统计分析。结果建立了酒精性肝纤维化大鼠模型,通过Percoll密度梯度离心纯化的非实质细胞中淋巴细胞、Kupffer细胞和内皮细胞分别富集了1.5、3.2和3.7倍。采用二维凝胶电泳法检测到了800多个蛋白质点,检测到具有2倍以上的差异蛋白质有26个,采用LC-MS法鉴定了21个非冗余蛋白质,对其中7个蛋白质的RT-PCR分析发现:ANXA3、CES3、ATPA和NDUFV2的mRNA水平和蛋白质组研究结果一致。结论本研究鉴定了一批与酒精性肝纤维化相关的蛋白质,可能为了解酒精性肝纤维化发病机制提供一些新线索。
- 张丽军贾小芳吴达革刘晓茜黄燕张姣丽程能能
- 关键词：蛋白质组
- 慢性乙型肝炎外周血单核细胞的蛋白质组学分析筛选肝纤维化诊断标志物被引量：1
- 2014年
- 目的 通过慢性乙型肝炎患者的外周血单核细胞（PBMCs）筛选诊断肝纤维化的标志物. 方法 入组48例慢性乙型肝炎的肝纤维化患者[其中24例为轻度肝纤维化（S1）,另24例为重度（S4）].用密度梯度离心法分离PBMCs且进行纯度测定,提取PBMCs蛋白质进行双向电泳分离,并通过液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）鉴定出差异表达的蛋白质.患者年龄、单核细胞和淋巴细胞比例采用非参数检验分析,患者性别采用x2检验分析,血小板及白细胞数目采用t检验分析. 结果 在纯化的PBMCs中,24例S1和24例S4患者的血小板数目（×109/L）分别为19.268±6.413和19.480±6.538,与临床正常参考值（100 ～ 300）× 109/L相比,血小板数目明显减少,而两组之间的差异没有统计学意义（P=0.930）.通过双向电泳和LC-MS/MS分析,共鉴定了12个差异蛋白质. 结论 从PBMCs中筛选出的膜突蛋白、辅酶Q脱氢酶铁硫蛋白3等12个蛋白质对肝纤维化具有诊断潜能.这些蛋白质参与了细胞运动、细胞黏附、激酶和转录等重要生物过程,可能与肝纤维化的形成密切相关.
- 张姣丽刘永福贾小芳陆伟尹林刘晓茜吕建新张占卿刘保池张丽军
- 关键词：蛋白质组
- 免疫性肝纤维化大鼠血浆氨基酸浓度与肝纤维化程度的相关性研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨血浆氨基酸浓度与肝纤维化程度的相关性。方法通过注射猪血清构建不同分期大鼠肝纤维化模型。采用Agilent 1100,通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatograph,HPLC)测定大鼠血浆中的氨基酸浓度。利用统计学方法分析血浆氨基酸浓度与肝纤维化程度之间的相关性。结果根据柱前衍生高效液相色谱法测定的大鼠血浆中16种游离氨基酸含量及Spearman等级相关分析和方差分析发现:血浆组氨酸(histidine,His)、苯丙氨酸(phenylalanine,Phe)、苏氨酸(threonine,Thr)、酪氨酸(tyrosine,Tyr)、缬氨酸(valine,Val)等与肝纤维化程度具有相关性(His:rs=0.512,P=0.015;Phe:rs=0.713,P<0.01;Thr:rs=0.567,P=0.006;Tyr:rs=0.753,P<0.01;Val:rs=0.508,P=0.016);His、Phe和Tyr在不同肝纤维化病理分期中的浓度均与正常组有统计学差异,但在不同病理分期间无统计学差异。结论血浆中His、Phe和Tyr浓度与肝纤维化程度正相关,但对肝纤维化病理分期无判别意义。
- 张姣丽贾小芳尹林冯艳玲吕建新张丽军
- 关键词：肝纤维化氨基酸HPLC
- 液质联用多反应监测法定量肝纤维化非实质细胞中的ATPA蛋白质
- 2015年
- 目的建立液质联用多反应监测方法定量复杂样品中的蛋白质。方法合成标准多肽,建立较通用的蛋白质多肽定量方法;挑选目标蛋白质及其定量离子对。采用SDS-PAGE方法分离复杂样品中的蛋白质,切取目标蛋白质条带进行胶内酶解和液质联用MRM定量,运用定量PCR方法分析目标蛋白在蛋白质和mRNA水平的一致性。结果选择在二维凝胶电泳中具有3倍差异的ATPA蛋白质进行了MRM定量分析,ATPA的4条多肽513.8、586.4、644.5和777.3对应的10个离子对均能特异地被质谱MRM方法检测,与正常对照相比,酒精性肝纤维化样本中ATPA的10个离子的曲线下面积变化基本一致,均表现为上调。MRM定量结果也表明ATPA在酒精性肝纤维化样品中上调了3.19倍,与二维凝胶电泳检测结果一致。进一步的定量PCR分析结果显示,该蛋白质的表达变化同步发生在mRNA和蛋白质水平。结论本研究构建了一种简单有效的液质联用MRM定量SDS-PAGE分离的复杂样品中蛋白质的方法。
- 张姣丽贾小芳尹林刘晓茜吕建新张丽军
- 关键词：蛋白质多反应监测
- 结肠癌黏膜及其细胞质膜蛋白质组学分析
- 目的： 通过蛋白质组学方法比较不同时期结肠黏膜组织的差异表达蛋白质，以期筛选出与结肠癌发生发展过程相关的蛋白质，为结肠癌的诊断和防治提供新的靶标。 方法： 1、小鼠结肠癌模型建立与验证:利用氧化偶氮甲烷(Azoxy...
- 张姣丽
- 关键词：结肠癌黏膜组织细胞质膜蛋白质
