谢梅花
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省重点学科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- B群脑膜炎球菌NspA与黏膜佐剂LTB重组融合蛋白疫苗的构建及其免疫效果的初步研究
- 目的构建LTB-NspA重组融合蛋白疫苗,免疫BALB/c雌性小鼠,探讨黏膜佐剂LTB是否能够增强疫苗抗原NspA的体液免疫应答(尤其是黏膜免疫应答)水平,初步评价LTB-NspA重组蛋白疫苗的免疫效果。方法分别以B群脑...
- 张璐思胡四海邓苏宏谢梅花李开铭
- 文献传递
- 脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NMB0315作为B群流脑疫苗候选抗原的免疫效果被引量：1
- 2015年
- 目的研究原核重组表达的B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白0315(rNMB0315)在诱导小鼠产生特异性免疫应答中的作用、免疫血清抗体体外杀菌活性和重组蛋白的免疫保护效果,初步评价rNMB0315作为B群流脑疫苗候选抗原的潜力。方法将构建的原核表达载体p ET30a-NMB0315转化大肠杆菌BL21表达重组蛋白,纯化鉴定后的重组蛋白免疫雌性BALB/c小鼠,检测体液免疫和细胞免疫水平;测定血清抗体在补体介导下的体外杀菌活性,观察rNMB0315蛋白疫苗对实验小鼠的免疫保护效果。结果 rNMB0315具有良好的免疫原性,能诱导产生较高水平的体液免疫应答:包括血清特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgG3、IgG2b和生殖道黏膜特异性分泌型IgA(s IgA),免疫后第6周抗体效价分别为1∶150 000、1∶85 000、1∶60 000、1∶35 000、1∶30 000和1∶30 000;也能激发较高水平的细胞免疫应答,免疫小鼠脾淋巴细胞增殖反应的刺激指数(SI)值明显高于PBS、Freund佐剂对照组。在免疫的2、4、6周,血清IgG2a/IgG1比值均小于1,提示rNMB0315疫苗以诱导Th2细胞性体液免疫应答为主。rNMB0315疫苗免疫血清在补体介导下的体外杀菌抗体效价为1∶128;72 h内,对实验小鼠的免疫保护率为90%。结论原核表达的rNMB0315具有良好的免疫活性和免疫保护效果,NMB0315外膜蛋白具有作为预防B群流脑蛋白疫苗候选抗原的潜力。
- 谢梅花李赫宁余敏君唐双阳李开铭张璐思邓苏宏胡四海
- 关键词：重组蛋白疫苗
- B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NMB0315核酸疫苗的免疫活性和免疫保护作用初步研究被引量：4
- 2015年
- 目的:构建B群脑膜炎奈瑟菌pc DNA3.1(+)/NMB0315真核表达重组质粒,检测其诱导小鼠产生的特异性体液免疫和细胞免疫应答水平、免疫血清体外杀菌效果及免疫保护作用,初步探讨NMB0315核酸疫苗的免疫活性和免疫保护效果,为研制一种新的预防B群流脑的核酸疫苗提供实验依据。方法:以B群脑膜炎奈瑟菌标准株MC58基因组DNA为模板设计引物,PCR扩增NMB0315基因,克隆至pc DNA3.1(+)真核表达载体中,经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切及测序鉴定重组质粒。构建成功的pc DNA3.1(+)/NMB0315重组质粒转染COS-7细胞和RAW264.7细胞,免疫细胞化学染色法和Western blot法检测重组蛋白在真核细胞中的表达。大量提取重组质粒,肌注免疫BALB/c小鼠,检测小鼠体内抗NMB0315的特异性体液免疫和细胞免疫水平;测定免疫血清体外杀菌滴度,观察核酸疫苗对实验小鼠的免疫保护效果。结果:构建的核酸疫苗pc DNA3.1(+)/NMB0315能够在真核细胞中有效转录和表达;免疫小鼠后能诱导产生特异性体液免疫应答和细胞免疫应答。在疫苗免疫后的2、4、6周,pc DNA3.1(+)/NMB0315组和pc DNA3.1(+)/NMB0315+Cp G组血清总Ig G及Ig G1、Ig G2a、Ig G2b和Ig G3亚类抗体水平呈递增趋势,均明显高于PBS、pc DNA3.1(+)、Cp G对照组(P<0.001);小鼠血清Ig G2a/Ig G1比值均小于1;生殖道灌洗液中特异性s Ig A水平均明显高于PBS、pc DNA3.1(+)、Cp G对照组(P<0.01)。免疫第6周,脾淋巴细胞刺激指数(SI)均明显高于对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。pc DNA3.1(+)/NMB0315+Cp G、pc DNA3.1(+)/NMB0315疫苗组免疫血清补体介导的体外杀菌效价分别为1∶128和1∶64;在致死量B群脑膜炎奈瑟菌MC58攻击后72 h存活率分别为70%和65%,对照组[PBS,pc DNA3.1(+),Cp G]72 h存活率为0。结论:NMB0315核酸疫苗能够诱导小鼠产生较高水平的体液免疫(包括黏膜免疫)和细胞免疫应答;免疫血清补体介导的体外杀菌活性较高;NMB0315核酸疫苗对感�
- 李开铭谢梅花余敏君唐双阳张璐思邓苏宏胡四海
- 关键词：核酸疫苗免疫活性免疫保护
- H因子结合蛋白作为B群流脑候选疫苗抗原的研究进展
- 2015年
- 脑膜炎奈瑟菌表面蛋白H因子结合蛋白(f HBP),是脑膜炎奈瑟菌的外膜蛋白和重要毒力因子,能与补体调节蛋白H因子结合。结合于脑膜炎奈瑟菌表面的H因子,能下调补体系统的激活作用,使脑膜炎奈瑟菌逃避补体系统的攻击。f HBP能诱导机体产生高水平的保护性抗体,抗f HBP抗体与f HBP结合后可阻止f HBP与H因子的结合,从而使细菌易于被补体系统杀灭和清除。因此,f HBP已成为B群流行性脑脊髓膜炎理想的疫苗候选抗原之一。现就f HBP的结构、基因的表达与调节、作为B群脑膜炎奈瑟菌疫苗候选抗原的作用、应用策略、安全性和有效性等最新研究进展进行综述。
- 谢梅花肖骁胡四海
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌候选疫苗
- B群流脑新疫苗候选抗原NMB0315免疫效果的初步评价
- [目的]研究原核重组表达的B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白0315（rNMB0315）在诱导小鼠产生特异性免疫应答中的作用、免疫血清抗体体外杀菌活性和重组蛋白的免疫保护效果，初步评价 rNMB0315作为 B群流脑疫苗候选抗原的...
- 谢梅花
- 关键词：重组蛋白疫苗
- B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白作为疫苗候选抗原的研究进展被引量：6
- 2014年
- 目前获准上市的流脑疫苗主要有A群、A+C群以及A、C、W-135及Y群的四价混合疫苗,上述疫苗的有效免疫原成分均为脑膜炎球菌的荚膜多糖。而B群脑膜炎奈瑟菌的荚膜多糖因与人类N-乙酰神经氨酸聚合物结构相似,可能产生交叉反应,引起自身免疫病,不适合用作B群流脑的疫苗候选抗原。因此,研究者把焦点转向B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白,目前报道的B群流脑疫苗外膜蛋白候选抗原主要包括fHBP、NspA、NHBA、NhhA、NadA、GNA1946、GNA1162、NMB0315等。本文就上述外膜蛋白作为B群流脑疫苗候选抗原的最新进展作一综述。
- 谢梅花李开铭胡四海
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白疫苗候选抗原
- B群脑膜炎球菌NspA与黏膜佐剂LTB重组融合蛋白疫苗的构建及其免疫效果的初步研究
- 目的 构建LTB-NspA重组融合蛋白疫苗,免疫BALB/c雌性小鼠,探讨黏膜佐剂LTB是否能够增强疫苗抗原NspA的体液免疫应答(尤其是黏膜免疫应答)水平,初步评价LTB-NspA重组蛋白疫苗的免疫效果.方法 分别以B...
- 张璐思胡四海邓苏宏谢梅花李开铭
- B群脑膜炎球菌NspA与黏膜佐剂LTB重组融合蛋白疫苗的构建及其免疫效果的初步研究
- 目的构建LTB-NspA重组融合蛋白疫苗,免疫BAL-B/c雌性小鼠,探讨黏膜佐剂LTB是否能够增强疫苗抗原NspA的体液免疫应答(尤其是黏膜免疫应答)水平,初步评价LTB-NspA重组蛋白疫苗的免疫效果。方法分别以B群...
- 张璐思胡四海邓苏宏谢梅花李开铭
