陈国珍
- 作品数：17 被引量：25H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TGF-β2对心肌细胞H9C2转录因子表达的影响及其组蛋白H3乙酰化调控机制
- 目的：探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)对心肌细胞H9C2转录因子Mef2c和GATA4的影响及其与组蛋白H3乙酰化的关系.方法：比较TGF-β2对细胞生长的影响.利用Real-time PCR检测心肌细胞的心脏相关...
- 王文文田杰郑敏孙慧超陈国珍
- 关键词：转录因子组蛋白H3转化生长因子-Β2
- 经胸超声心动图测定在成年及胚胎小鼠心脏实验研究中的应用
- 目的建立利用高频超声仪检测实验动物正常和异常心脏功能指标的方法和体系。方法利用Vevo 770高频超声仪检测C57BL/6品系1～2月龄野生型(WT)小鼠的心脏结构和功能,监测胎鼠9.5天～出生前的整个心脏发育过程。结果...
- 陈国珍初清周广玉柳宏波田杰黄旭培
- 小鼠胚胎心脏发育形态学研究与p300和CBP在胎心中的表达
- 目的:观察小鼠胚胎心脏发育过程及组蛋白乙酰化酶 p300和 CREB 结合蛋白 (CBP)在小鼠胚胎心脏上的时空表达规律,为进一步探明其与先天性心脏病的发生之间的关系奠定基础。方法:选取胎龄7.5-18d 和出生1d 小...
- 陈国珍朱静田杰吴晓云张晓萍吴刚孙慧超
- 关键词：组蛋白乙酰化酶胚胎心脏
- 文献传递
- Oct-4表达下调促大鼠骨髓多能成体祖细胞向心肌分化
- 2011年
- 目的:明确骨髓多能成体祖细胞(Bonemarrowmultipotentadultprogenitorcells,MAPCs)体外向心肌特异性分化及其与八聚体结合转录因子4(Octamer-bindingtranscription factor-4,Oct-4)表达的相关性。方法:将大鼠骨髓中分离出的MAPCs,在无血清培养基中连续培养35 d,采用5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza,1μmol/L)诱导24 h促使其向心肌细胞分化。结果:MAPCs在5-aza诱导的24 h后早期心脏特异性基因NKx2.5与GATA-4的mRNA水平显著增加,Western blot和免疫荧光染色显示心肌特异性蛋白Connexin-43与肌钙蛋白Ⅰ在5-aza诱导后的7 d开始表达,流式细胞分析表明在35 d后超过37%的细胞为肌钙蛋白Ⅰ阳性;同时实时定量聚合酶链反应、Western blot、免疫荧光染色和流式细胞技术检测到未分化的MAPCs高表达特异性干细胞标志物Oct-4,但在心肌分化过程中其表达明显下降。结论:MAPCs在5-aza诱导后能够有效地分化为心肌样细胞,并与Oct-4的表达下调相关。
- 谢靖芸吕铁伟朱静陈国珍孙慧超刘振国田杰
- 关键词：OCT-45-AZA
- 小鼠心脏发育过程及组蛋白乙酰化酶SRC1在发育心脏的时空表达
- 目的观察小鼠心脏形态发育过程并研究组蛋白乙酰化酶亚型类固醇受体共激活因子-1（steroid receptor coactivator-1,SRC1）在小鼠心脏中的时空表达规律,为阐明心脏发育过程中多基因时序表达的染色质...
- 陈国珍田杰朱静吕铁伟吴刚孙慧超
- 文献传递
- 小鼠胚胎心脏发育过程中组蛋白乙酰化酶亚型p300调控心脏特异转录因子的动态表达被引量：8
- 2010年
- 目的:观察小鼠胚胎心脏发育过程中GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的动态表达和这些基因的启动子区域组蛋白H3乙酰化修饰状态的变化,以及组蛋白乙酰化酶亚型p300对这些基因启动子的直接调控作用,为进一步研究先天性心脏疾病的发生机制奠定基础。方法:选取胎龄(Embryoday,E)10.5d和16.5d小鼠正常胚胎心脏,用实时荧光定量PCR(RealTimePCR)的方法观察上述基因mRNA的动态表达;采用染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation,ChIP),用ChIP级抗乙酰化H3和抗p300抗体免疫沉淀与其所结合的DNA,采用RealTimePCR扩增抗体所富集的上述基因启动子的DNA量,观察胚胎心脏发育过程中乙酰化组蛋白及组蛋白乙酰化酶亚型p300是否参与调控上述四种心脏特异转录因子的表达。结果:①胎龄E10.5d和E16.5d小鼠胚胎心脏的GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的mRNA表达水平都有明显差异(P<0.05),其中GATA4和MEF2C mRNA相对β-actin的表达水平,E10.5明显低于E16.5,而Nkx2.5和Tbx5mRNA相对表达水平,E10.5明显高于E16.5;并且ChIP结果显示这些基因启动子的乙酰化水平也随着时间而改变,但差异无统计学意义。②E10.5和E16.5胚胎小鼠心脏中,p300抗体均能免疫沉淀GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因启动子,其沉淀的基因量在这两个小鼠心脏发育的关键时间点有所不同,但差异无统计学意义。结论:小鼠胚胎心脏发育过程中,心脏发育相关基因GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5呈现动态表达,提示这些基因在心脏发育不同阶段具有重要作用。ChIP结果提示p300介导的组蛋白乙酰化修饰可能为调节这些基因动态表达的机制之一。
- 杨雪芳田杰陈国珍孙慧超钟立霖吴晓云朱静
- 关键词：P300组蛋白乙酰化心脏发育染色质免疫沉淀
- 小鼠胚胎心脏发育过程中胰岛素基因增强子结合蛋白1的时序表达与组蛋白乙酰化酶p300的关系被引量：2
- 2012年
- 目的观察小鼠胚胎心脏发育过程中转录因子胰岛素基因增强子结合蛋白1(Islet-1)的时序性表达规律,并探讨其与组蛋白乙酰化酶p300介导的组蛋白乙酰化调控网络中的关系。方法以健康6～8周龄昆明小鼠为研究对象,下午1700雄雌按12比例合笼,次日观察阴栓,观察到阴栓最早之日计为胎龄0.5 d(E0.5)。取胎龄为E11.5、E14.5、E17.5的胎鼠和新生鼠的心脏,利用Western blot方法定量分析Islet-1的时序性表达规律,并利用蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)和串联质谱分析方法(MS)鉴定Islet-1与组蛋白乙酰化酶p300的关系,同时应用Western blot方法反验证实验结果。结果 1.在小鼠胚胎心脏发育过程中,Islet-1在E14.5时的表达水平(0.434±0.353)明显高于与其在E11.5(0.074±0.456)、E17.5(0.120±0.127)和新生鼠(0.049±0.083)的表达水平,差异均有统计学意义(Pa<0.05),而其他时间点(E11.5、E17.5和新生鼠)间的表达差异无统计学意义(Pa>0.05)。2.在胚胎心脏发育过程中,Islet-1与组蛋白乙酰化酶p300相互结合,以蛋白复合物的形式存在。结论在小鼠胚胎心脏发育过程中,Islet-1可能作为枢纽因子,募集组蛋白乙酰化酶p300参与组蛋白乙酰化修饰调控。
- 孔娟娟陈国珍孙慧超余仲苏朱静黄国英田杰
- 关键词：心脏发育表观遗传组蛋白乙酰化P300小鼠
- 组蛋白乙酰化转移酶亚型类固醇受体共激活因子1在发育心脏的时空表达
- 2010年
- 目的研究组蛋白乙酰化转移酶亚型类固醇受体共激活因子1(SRC1)在小鼠心脏中的时空表达规律,初步探讨其与心脏发生发育的关系。方法取胎龄E7.5～18、出生1d和3个月成年小鼠正常心脏,每个时间点选9个标本,采用免疫组织化学SP法观察SRC1蛋白在不同发育阶段心脏的空间表达;每个时间点选6组标本,利用蛋白质印迹分析技术检测其在小鼠心脏发育过程中时序性表达变化。结果免疫组织化学结果显示,SRC1蛋白在E7.5胚胎心脏原基中不表达;E8.5～E9.5心管中微弱表达;E10.5后心脏发育各时期,小梁弱表达,心脏其他区域均有较强而广泛表达。蛋白质印迹分析结果显示,E10.5以后的心脏发育阶段,SRC1蛋白在E10.5较低表达,与E11.5、E12.5相比表达差异有统计学意义(P<0.05),与其他发育时间点相比表达差异无统计学意义(P>0.05);E11.5～E12.5达到表达高峰,此两个发育时间点相比表达差异无统计学意义(P>0.05),与其他发育时间点相比表达差异有统计学意义(P<0.05);此后表达下降并持续低表达至成年鼠期,此阶段表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SRC1蛋白广泛表达于E8.5后的发育心脏,并呈时空动态变化,提示其参与了心脏发育的整体调控,可能与心脏间隔早期的诱导形成关系更为密切。
- 陈国珍田杰朱静吕铁伟孙慧超杨雪芳
- 关键词：心脏发育
- 儿童心脏猝死的预测与防范
- 本文介绍了心脏性猝死的定义、发生率和危险分层、预测、防范措施及治疗急救措施，论述了儿童心脏性猝死潜在的原因及其危险因素，如冠状动脉畸形、家族史等。
- 陈国珍田杰
- 关键词：心脏性猝死急救措施冠状动脉畸形家族史
- 文献传递
- 乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞的毒性及H3K9表突变作用被引量：4
- 2010年
- 目的探讨乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞的毒性作用及H3K9表突变作用。方法以心肌祖细胞株为研究对象,分别用不同剂量乙醇(200、100、50mmol/L)、乙醛(16、12、8、4mmol/L)和乙酸(16、12、8、4mmol/L)处理。应用MTT实验筛选出乙醇及其代谢产物的干预浓度,Westernblot检测组蛋白H3K9乙酰化作用,实时定量PCR检测心脏发育相关基因GATA4、Mef2c、Tbx5mRNA表达量的变化。结果 MTT结果显示低浓度组50mmol/L乙醇、4mmol/L乙醛、4mmol/L乙酸的细胞活力与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),不影响心肌祖细胞增殖;高浓度组200mmol/L乙醇、12mmol/L乙醛、16mmol/L乙酸对心肌祖细胞抑制率分别为31.5%、36.0%、32.1%,抑制细胞增殖(P<0.05)。低浓度组乙醇、乙酸分别使组蛋白H3K9乙酰化水平升高2.4、2.2倍(P<0.05)。心脏发育相关基因表达无明显变化(P>0.05);高浓度组乙醇、乙酸分别使组蛋白H3K9乙酰化水平升高5.3、5.6倍,同时心脏发育相关基因GATA4、Mef2c表达均增加,与对照组及相应低浓度组比较均有统计学差异(P<0.05);乙醛则无论低浓度还是高浓度对组蛋白H3K9乙酰化水平及基因表达均无明显影响(P>0.05)。结论高浓度的乙醇及其代谢产物对心肌祖细胞均有毒性作用,而乙醇及乙酸具有组蛋白H3K9表突变作用,可能为酒精致先心病发病机制之一。
- 钟立霖朱静吴晓芸陈国珍孙慧超杨雪芳田杰
- 关键词：乙醇代谢产物乙酰化
