贾红双
- 作品数:2 被引量:6H指数:1
- 供职机构:齐齐哈尔大学生命科学与农林学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省自然科学基金黑龙江省研究生创新科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 靶向MRP1基因的shRNA稳定逆转肺癌的多药耐药性被引量:6
- 2011年
- 目的:利用短发夹RNA(shRNA)表达载体逆转肺癌细胞株(A549/DDP)的多药耐药性。方法:构建2个多药耐药相关蛋白1(MRP1)基因特异的shRNA表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-MRP1,稳定电转染A549/DDP细胞,实时荧光定量PCR分析MRP1 mRNA的表达,免疫荧光检测细胞MRP1蛋白的表达,流式细胞术检测细胞内罗丹明123(Rho123)的潴留情况。MTT法检测细胞活力。结果:成功构建了shRNA表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-MRP1,稳定转染sh-MRP1-2.1-1和sh-MRP1-2.1-2后,A549/DDP细胞MRP1 mRNA和蛋白表达均显著降低,细胞内Rho123相对荧光强度由16.93%±0.58%分别升高至89.02%±0.59%和82.56%±1.37%;A549/DDP亲本细胞顺铂的IC50分别由(101.45±0.64)μmol/L降至(38.06±0.05)μmol/L和(53.72±0.36)μmol/L,5-氟尿嘧啶的IC50分别由(263.20±2.00)μmol/L降至(98.82±1.16)μmol/L和(141.81±0.49)μmol/L。结论:shRNA干扰表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-RMP1能够稳定、持久地抑制MRP1基因,有效地逆转了A549/DDP细胞的多药耐药性。
- 邵淑丽崔婷婷贾红双谢振丽张伟伟刘迁陈薇薇李爽陈丽
- 关键词:短发夹RNA多药耐药多药耐药相关蛋白1RNA干扰A549/DDP细胞
- 靶向mrp1基因shRNA表达载体构建
- 2010年
- 目的:构建靶向mrp1基因的shRNA表达载体。方法:根据mrp1基因序列设计并合成编码shRNA的DNA模板,将其定向克隆到psilencer2.1U6-neo质粒上,构建重组载体。经菌落PCR和DNA测序分析检测重组载体构建结果。结果:成功构建靶向mrp1基因shRNA表达载体。结论:为进一步研究mrp1基因在肺癌多药耐药中的作用以及探索肺癌的基因治疗奠定了基础。
- 邵淑丽崔婷婷刘迁陈丽贾红双吴敏
- 关键词:SHRNA