谭秀华 作品数:25 被引量:74 H指数:4 供职机构: 滨州医学院 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 国家科技重大专项 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 文化科学 农业科学 更多>>
VES诱导的人口腔鳞癌Tca8113细胞凋亡作用机制的初步研究 被引量:4 2007年 目的:明确维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导的人口腔鳞癌Tca8113细胞的凋亡作用,初步探讨其凋亡机制。方法:PI单染色和Annexin Ⅴ-PI双染色后,流式细胞术检测VES对细胞周期的影响及细胞凋亡率;RT-PCR、west-ernblot法检测促凋亡基因bax在mRNA水平和蛋白水平上的表达。结果:VES能显著抑制Tca8113细胞的生长,诱导出现典型的凋亡峰,bax基因及蛋白表达上调。结论:VES能诱导口腔鳞癌细胞Tca8113的凋亡,该作用可能与bax基因表达上调有关。 宋晓冬 刘凤 谭秀华 张树栋 左伋关键词:凋亡调节蛋白质类 细胞凋亡 维生素E琥珀酸酯 TCA 高温耐碱性果胶酶菌株的筛选及其产酶的分离纯化研究 被引量:4 2016年 从环境土壤中筛选到一株酶活较高、高温耐碱性的果胶酶菌株AP-1并对其产酶性质和分离纯化做了初步研究。酶活性质研究结果表明:该酶最适温度为70℃,最适p H 7.5。稳定性实验表明:该酶具有较好的耐碱性,同等条件下Mg^(2+)对该酶具有显著的激活作用。分离纯化实验表明:硫酸铵盐析法中80%饱和度的硫酸铵溶液的纯化倍数最高达到了2.20倍;有机溶剂沉淀法中乙醇(2∶1)的纯化效果最好达到了5.20倍。 谭秀华关键词:碱性果胶酶 酶学性质 分离纯化 海藻酸钠裂解酶产生菌的筛选及酶活性研究 被引量:2 2010年 [目的]筛选海藻酸钠高效降解菌并研究其产酶活性。[方法]以海藻酸钠为唯一碳源,通过驯化培养、初筛、复筛得到一株优势菌,并对该菌的最适生长条件、最适产酶条件及酶的性质作了初步研究。[结果]优选出1株海藻酸钠高效降解菌8号菌株,为革兰氏阴性菌,形态为杆状。该菌在30℃培养72h产酶量最高。海藻酸钠裂解酶作用的最适底物质量分数为1.00%~2.00%,最适pH值为7.o,最适反应温度为4JD℃,温度继续升高,酶活力急剧下降。[结论]为海藻酸钠的有效降解提供了科学依据。 武玉永 谭秀华 姚庆收关键词:最适温度 最适PH值 酶学性质 一种新型内切型褐藻胶裂解酶基因及工程菌和应用 本发明公开了一种重组褐藻胶裂解酶及其工程菌和水解制备褐藻寡糖的方法,根据从海藻中新分离菌株Vibrio?sp.BZM-1,筛选得到褐藻胶裂解酶基因—AlgM;构建含有该基因的表达载体pHBM905BDM-AlgM,转化毕... 武玉永 姚庆收 谭秀华 马朋 秦加阳 孙业盈文献传递 医学遗传学课程的优化整合与实践 被引量:4 2015年 随着生命学科的发展以及高等教育的大众化,高等医药院校各课程门类不断增多。因此,各门课程的学时数不断减少,而教学内容不断充实和提高,但课程间相互重叠、重复、交叉的现象也多了起来。为此,自2008年以来,在医学遗传学教学过程和教学实践中,进行与其相关课程内容之间以及理论和实验课的整合和衔接。为避免课程间以及讲授和实践教学内容之间的相互重叠、重复、交叉的现象出现,以免学生在学习过程中,增加不必要的学习负担;全面提高医学各学科的教学质量。 单长民 武玉永 杨军厚 孙业盈 谭秀华关键词:医学遗传学 理论教学 实验教学 应用RAPD和ISSR标记对24份花生栽培种材料进行遗传多样性分析 被引量:6 2011年 利用RAPD引物和ISSR引物分析我国24份花生栽培种材料的遗传多样性。结果表明:所选的RAPD引物和ISSR引物中分别有13条引物和10条引物扩增出了清晰并可重复的条带,共扩增出123条带和87条带,平均每条引物扩增出9.5条带和8.7条带,其中多态性带分别占条带总数的47.15%和57.47%,平均每条引物扩增出4.7条和5.7条多态性带。在此基础上,根据Nei-Li系数采用UPGMA法进行了聚类分析,可将24份花生材料分成4类:四粒红、汕油523、冀花2号、花育16和粤油7号等5个品种聚为一类;花育20、中花8号聚为一类;黑花生单独为一类;其余的花生聚为一类。RAPD和ISSR标记能够揭示花生栽培种的遗传多样性,在种质鉴定和遗传作图等方面具有一定应用潜力。 闫苗苗 魏光成 谭秀华 王传堂关键词:花生 RAPD ISSR 紫杉醇诱导HepG2肝癌细胞凋亡中miR-224沉默凋亡抑制因子5基因的作用 2015年 目的探讨紫杉醇诱导肝癌HepG2细胞凋亡时miRNA对基因的沉默的作用。方法用不同浓度紫杉醇处理肝癌HepG2细胞后,流式细胞术检测其细胞凋亡;通过实时定量PCR(Real-time PCR)测定miR-224和凋亡抑制因子5(api-5)mRNA的表达;用免疫组织化学二步法和免疫印迹法(Western blotting)检测API-5蛋白的表达。结果紫杉醇诱导HepG2细胞凋亡时,通过2-ΔΔCT法分析发现,除了0.5mg/L、1mg/L紫杉醇培养HepG2肝癌细胞24h miR-224不升反降外,其他浓度和处理时间miR-224表达均显示上调;0.5mg/L、1mg/L紫杉醇培养HepG2肝癌细胞24h api-5 mRNA表达稍微降低,0.5mg/L紫杉醇处理48h无增长,其他浓度和处理时间api-5 mRNA表达均上调;应用IPP v 5.1图像分析软件处理,经t检验分析发现,紫杉醇处理后API-5蛋白表达均下调(P<0.05)。结论上调的miR-224可能作用其靶基因api-5的表达,通过与api-5 mRNA的3’UTR结合阻止翻译的完成,从而对肝癌细胞的凋亡途径产生影响。 单长民 孙业盈 李娟 王东 姚庆收 谭秀华 刘向勇关键词:紫杉醇 肝癌细胞HEPG2 实时定量聚合酶链反应 免疫印迹法 油菜叶绿体乙酰辅酶A羧化酶单交换表达载体的构建 2015年 根据已知序列设计引物,通过PCR扩增获得质体定位的乙酰辅酶A羧化酶的4个亚基的基因序列。先将该酶4个亚基的基因进行拼接,然后将这4个拼接好的片段,克隆到pMD18-T载体上,得到质粒pH BM714。再以质粒pHBM714 DNA为模板,用分别带有CpoI和Asc I酶切位点的引物进行PCR扩增,PCR产物在dTTP的保护下经T4 DNA聚合酶处理,与将质粒pHBM720DNA纯化后经CpoI和AscI双酶切后得到的大片段连接,连接产物转化大肠杆菌Xl_(10)-gold,得到正确的重组子命名为pHBM726。此质粒pH BM726,即为带有壮观霉素抗性基因(aadA)筛选标记的质体定位的乙酰辅酶A羧化酶基因油菜叶绿体单交换表达载体;在此载体中壮观霉素抗性基因(aadA)、乙酰辅酶A羧化酶的4个亚基的基因(ACC)和绿色荧光蛋白基因(gfp)共6个基因串联在一起,共用一个启动子序列,一起来进行表达;通过酶切检测、PCR验证和测序验证,均表明该表达载体构建成功。最后此载体在大肠杆菌中表达时,发现重组菌能够在含壮观霉素的培养基上生长,且在可见光下,能看到绿色荧光,表明壮观霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因均在大肠杆菌中成功表达;表达产物通过Western印迹验证表明组成乙酰辅酶A羧化酶的4个亚基的基因在大肠杆菌中成功表达。以上结果表明,该表达载体中串联排列的这6个基因均在大肠杆菌中成功表达。该研究结果可为质体定位的乙酰辅酶A羧化酶转叶绿体的研究奠定基础,为油菜油脂代谢研究提供参考。 武玉永 谭秀华 马立新关键词:油菜 叶绿体 乙酰辅酶A羧化酶 环境微生物果胶酶活性研究 被引量:6 2009年 [目的]对从环境中筛选到的一种产果胶酶酶活较高的菌株进行酶学特征研究。[方法]通过功能平板从果园土壤中筛选到一种产果胶酶的菌株,通过DNS法在不同的温度和pH值条件下测定该酶酶活力。[结果]对菌株TP1粗酶进行的分析表明:其最适温度为60℃,最适pH值为7.50,酶活为38U,半衰期为1h,在80℃保温5min其酶活由最初酶活的79%下降到15%,温度下降到65℃后活性可恢复到最初酶活的65%以上。[结论]菌株TP1所产果胶酶的酶学特征适合推广,有进一步研究的价值。 谭秀华 闫苗苗关键词:果胶酶 菌株 酶活 油菜RNA干扰(RNAi)文库的构建 2010年 为了通过构建高通量RNAi(RNA干扰)双元载体来得到油菜RNAi文库,对PCR引物设计时,在目的片段5′端和3′端分别引入合适的酶切位点序列,在3种中间载体的基础上构建高通量RNAi双元载体pHBMT4。该载体Bsu36Ⅰ酶切位点间的片段可被油菜的任意一种功能片段取代。载体pHBMT4含有用以检测载体功效的gus报告基因,原多克隆位点处被一个插入目标序列表达框取代,该框含有的反向重复nos终止序列可自然形成发夹环结构引发转录后水平的基因沉默(PTGS)。通过抽提的油菜总DNA与载体pHBMT4相连转化获得了油菜RNAi文库,为以后研究油菜的基因组功能打下良好的基础。 谭秀华 武玉永 单长民 马立新关键词:油菜 双元载体